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WE0179型口腔拭子基因组DNA提取试剂盒价格

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  • ¥200 - 2400
  • 百奥莱博
  • 北京
  • WE0179-VDZ
  • 2025年07月10日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      室温(15~30℃)

    • 保质期

      长期

    • 英文名

      Swab Genomic DNA Extraction Kit

    • 库存

      289

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    WE0179型口腔拭子基因组DNA提取试剂盒价格是高品质的DNA纯化产品,由北京百奥莱博供应,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多口腔拭子基因组DNA提取试剂盒等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。


    名称:WE0179型口腔拭子基因组DNA提取试剂盒价格
    规格:50次|200次
    产地:国产|进口
    英文名:Swab Genomic DNA Extraction Kit
    品牌:百奥莱博
    编号:WE0179
      本试剂盒提供一种简单快速分离纯化口腔拭子样本总DNA的方法。该试剂盒采用可特异性结合DNA的硅基质膜和独特的缓冲系统,高效专一吸附DNA,每个拭子可得到0.5-3.5μg基因组DNA,提取的DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠。适用于酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

    试剂盒组成

     
    组份 50次 200次
    Buffer GR 25ml 120ml
    Buffer GL 25ml 120ml
    Buffer GW1(浓缩液) 13ml 52ml
    Buffer GW2(浓缩液) 15ml 75ml
    Buffer GE 15ml 60ml
    蛋白酶K 25mg 90mg
    蛋白酶K 储存液 1.25ml 5ml
    吸附柱DS及收集管 50套 200套
    离心管(1.5ml) 50个 200个


    产品特点
    1、采用硅基质膜原理,简单、快速从口腔拭子中提取基因组DNA。
    2、提取的基因组DNA片段大、纯度高。
    3、单个拭子样本得率达到0.5-3.5μg。

    自备试剂:无水乙醇。

    实验前准备及重要注意事项/strong>:
    1、向蛋白酶K 中加入指定用量(1.25ml/5ml)的蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
    2、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
    3、使用前若发现Buffer GL有沉淀,请将Buffer GL于56℃水浴溶解。
    4、全部离心步骤可在室温下进行。
    5、取样:使用口腔拭子在口腔内壁擦拭6次,晾干2小时保存,为确保样本不被食物或饮料污染,取样前30分钟内请勿进食和饮水。

    操作步骤

    1.将口腔拭子的棉签用剪刀从杆上剪下,置于2ml的离心管(自备)中,加入400μl Buffer GR。
    注意:如需无RNA污染的基因组DNA,可加入4μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀。
    2.加入20μl 蛋白酶K 和 400μl Buffer GL,立即涡旋震荡15秒,充分混匀。
    注意:加入Buffer GL后立即充分混匀;不可将蛋白酶K 直接加入Buffer GL中使用。
    3.56℃放置10分钟,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
    4.加入400μl无水乙醇,涡旋震荡充分混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
    注意:加入无水乙醇后可能会产生白色沉淀,不会影响后续实验。
    5.将上步所得溶液和沉淀分两次加入到已装入收集管的吸附柱中,一次最多不超过700μl 。12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    6.向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    7.向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心3分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤7。
    8.12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
    注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
    9.将吸附柱置于一个新的1.5ml离心管中,向吸附柱的中间部位悬空加入50μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存。
    注意:
    1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
    2)若需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

    储存条件:室温(15~30℃)。


    我公司的WE0179型口腔拭子基因组DNA提取试剂盒价格,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:

    ·抗His标签多克隆抗体
    编号:WE0351
    英文名称:Anti His-Tag Rabbit Polyclonal Antibody
    规格:20μl|100μl
    该抗体可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端和内部的六个连续组*酸标签,而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的His-Tag融合蛋白。

    抗体类型:亲和纯化兔多克隆抗体IgG
    免疫原:人工合成多肽
    应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:1000-20000)

    ·细胞核/浆蛋白抽提试剂盒
    编号:WE0265
    英文名称:Nuclear and Cytoplasmic Extraction Kit
    规格:50次
      本试剂盒能够简单、快速的提取来源于哺乳动物细胞及组织的细胞核和细胞浆蛋白,所提取蛋白保持生物学活性。本试剂盒首先通过细胞浆蛋白抽提试剂裂解细胞膜,释放细胞浆蛋白,然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过细胞核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。抽提获得的核蛋白及浆蛋白纯度高,有效避免核/浆蛋白的交叉污染,可以用于Western、Gel Shift、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。

    试剂盒组成
    组份 50次  
    Buffer A 50ml
    Buffer B 3ml
    Buffer C 25ml
    Protease Inhibitor Cocktail 750μl

    保存条件:Protease Inhibitor Cocktail:-20℃,其它组分:2~8℃

    注意事项
    1、如需提取磷酸化蛋白请在抽提试剂中加入磷酸酶抑制剂。
    2、所有样品操作请置于冰上进行。
    3、可根据具体实验情况调整试剂用量,保证各试剂使用比例为Buffer A:Buffer B:Buffer C=100:5.5:50。
    4、可以采用更高的速度来离心。

    使用方法

    一、细胞中胞浆、胞核蛋白的提取
    1、请在蛋白抽提前取出抽提试剂Buffer A和Buffer C进行预冷
    2、收集细胞,计数。离心去上清。
    3、1×107细胞中加入1ml Buffer A(按照1:99比例在蛋白抽提前2-3分钟内加入Protease Inhibitor Cocktail),涡旋5秒以充分混匀,冰上孵育20分钟。
    注意:各种细胞的特性不同,需要根据不同细胞的特性调整Buffer A的用量,如果蛋白浓度小,按比例减少Buffer A及后续Buffer B、Buffer C的用量。
    4、加入55μl Buffer B,涡旋5秒以充分混匀,冰上孵育 1分钟。
    5、4℃ 12000rpm(~~13400×g)离心 15分钟,收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中,-20℃保存(此提取液为胞浆蛋白)。
    6、向上步所得的沉淀中加入500μl Buffer C(使用前按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail),涡旋5秒以充分混匀,重悬沉淀,冰上孵育40分钟,每隔10分钟涡旋混匀一次,每次约15-30秒。
    7、4℃ 12000rpm离心15分钟,收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中,-20℃保存(此提取液为胞核蛋白)。

    二、组织中胞浆、胞核蛋白的提取
    1、取材,保存组织。
    2、在蛋白抽提前取出抽提试剂Buffer A和Buffer C进行预冷。
    3、称组织重量,每100 mg组织中加入1ml Buffer A(按照1:99比例在蛋白抽提前2-3分钟内加入Protease Inhibitor Cocktail),用匀浆器在冰上充分匀浆,放置在冰上孵育20分钟。
    注意:各种组织的特性不同,需要根据不同组织调整Buffer A的用量,如果蛋白浓度小,按比例减少Buffer A及后续Buffer B、Buffer C的用量。
    4、加入55μl Buffer B,涡旋5秒以充分混匀,放置在冰上孵育 1分钟。
    5、4℃ 12000rpm离心 15分钟,收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中,-20℃保存(此提取液为胞浆蛋白)。
    6、向上步所得的沉淀中加入500μl Buffer C(使用前按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail),涡旋5秒以充分混匀,重悬沉淀,冰上孵育40分钟,每隔10分钟涡旋混匀一次,每次约15-30秒。
    7、4℃ 12000rpm离心15分钟,收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中,-20℃保存(此提取液为胞核蛋白)。

    储存条件:-20℃


    WE0179型口腔拭子基因组DNA提取试剂盒价格关键词:Swab Genomic DNA Extraction Kit,WE0179,口腔拭子基因组DNA提取试剂盒


    ·一步法逆转录实时荧光定量PCR试剂盒(低含量ROX校正染料)
    编号:WE0149
    英文名称:BaldStar TaqMan One Step RT-qPCR Kit(Low ROX)
    规格:100次
      本试剂盒是采用探针法(TaqMan,Molecular Beacon等)进行一步法Real-Time RT-qPCR的专用试剂盒。使用本产品进行Real Time RT-qPCR反应时,逆转录和定量PCR在同一反应体系中进行,反应过程中无需添加试剂,无需打开管盖,避免了污染的同时提高了实验效率。本产品的检测灵敏度高,荧光信号强,信噪比高,非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。其所包含的特殊缓冲系统能使逆转录酶与DNA聚合酶同时发挥最大功效,提高反应效率。使用本产品可以得到更宽广的线性范围,对目的基因定量更准确,重复性好,可信度高。

      ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
    不需要ROX校正的仪器:(WE0148)
    Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。
    需要Low ROX校正的仪器:(WE0149)
    ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
    需要High ROX校正的仪器:(WE0150)
    ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。

    试剂盒组成
    组份 WE0148-100次 WE0149-100次 WE0150-100次
    2×BaldStar TaqMan One Step Buffer 1.4ml 1.4ml 1.4ml
    BaldStar TaqMan One Step EnzymeMix 100μl 100μl 100μl
    50×Low ROX - 50μl -
    50×High ROX - - 50μl
    RNase-Free Water 1.5ml 1.5ml 1.5ml


    注意事项
    1、本试剂盒中试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
    2、本产品以RNA为模板进行一步法RT-PCR实验,在操作过程中应避免RNase污染,建议在专门的区域进行RNA操作,使用专门的仪器和耗材,操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套,实验相关耗材应用0.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时,并高压灭菌30分钟后使用。
    3、本试剂盒中的各试剂应尽量避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。
    4、本试剂盒必须使用特异性引物,引物的选择可根据具体实验来选择,引物设计的好坏直接影响到RT-qPCR反应的结果,设计引物时需考虑GC含量,引物长度,引物位置,PCR产物的二级结构等因素,建议采用专业的引物设计软件进行设计。
    5、本试剂盒推荐使用特异性探针,建议采用专业的设计软件进行设计。


    使用方法
    以下举例为常规的反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小的不同进行相应的改进和优化。(反应液的配置请在冰上进行)

    1、将RNA模板、引物、2×BaldStar TaqMan One Step Buffer、BaldStar TaqMan One Step EnzymeMix和RNase-Free Water溶解并置于冰上备用。
    2、PCR反应体系:

     
    试剂 25μl反应体系 终浓度
    2×BaldStar TaqMan One Step Buffer 12.5μl
    Forward Primer,10μM 0.5μl 0.2μM
    Reverse Primer,10μM 0.5μl 0.2μM
    Probe,10μM 0.5μl 0.2μM
    BaldStar TaqMan One Step EnzymeMix 1.0μl  
    RNA Template Xμl 10 pg~100ng
    50×Low ROX or High ROX(可选) 0.5μl
    RNase-Free Water up to 25μl  

    注意:
    1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
    2)使用的探针浓度,与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时请参照仪器说明书,或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
    3)通常RNA模板的量以10 pg – 100ng为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。
    4)不同仪器的激发光学系统有所不同,根据使用荧光定量的仪器选择加入50×Low ROX or 50×High ROX。

    3、混匀,短暂离心,将溶液收集到管底。
    4、RT-PCR反应条件:

     
    步骤 温度 时间 循环数
    逆转录 45℃ 10 min  
    PCR预变性 95℃ 10 min  
    变性 95℃ 15 s 30-40个循环
    退火/延伸 60℃ 45 s

    注意:
    1)1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、5-10 min条件下实现酶的活化。
    2)建议采用两步法PCR反应程序,若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。

    储存条件:-20℃,避免反复冻融


    WE0179型口腔拭子基因组DNA提取试剂盒价格关键词:Swab Genomic DNA Extraction Kit,WE0179,口腔拭子基因组DNA提取试剂盒

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