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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Rabbit HRP Kit(DAB)
- 库存:
775
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")免疫组化试剂盒(兔源一抗)价格厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:免疫组化试剂盒(兔源一抗)价格厂家
品牌:百奥莱博
规格:3ml
英文名:Rabbit HRP Kit(DAB)
产地:国产|进口
编号:WE0314
本试剂盒根据生物素与链霉亲和素具有很强亲和力的原理设计。在兔源的一抗与相应靶抗原结合后,本试剂盒中的生物素化羊抗兔二抗与一抗特异结合;二抗上标记的生物素与标记了过氧化物酶的链霉亲和素结合,形成抗原~特异性一抗~生物素化的二抗~HRP标记的链霉亲和素复合物。HRP可以催化底物显色,从而推断待检抗原的存在及分布。该试剂盒使用的生物素化二抗、SA-HRP,均采用优化的标记和纯化技术,使得其染色有更高灵敏度和更低的背景,适合于检测福尔马林固定石蜡包埋组织切片,以及冰冻切片、细胞爬片、新鲜制备的血涂片等。兔Streptavidin-HRP试剂盒适合与百奥莱博即用型或浓缩型抗体配套使用。
试剂盒组成:
| 组份 | 3ml |
| Solution A(Endogenous Peroxydase Enzymes Blocking Buffer,White Solution) | 3ml |
| Solution B(Normal Goat Serum For Blocking,White Solution) | 3ml |
| Solution C(Goat anti-Rabbit IgG,Biotin,Ready to Use,Yellow Solution) | 3ml |
| Solution D(Streptavidin-HRP,Ready to Use,Red Solution) | 3ml |
| DAB-A(20×) | 250μl |
| DAB-B(1×) | 5ml |
注意事项:
1、本试剂盒仅适用于一抗为兔源抗体的IHC实验。
2、以每张切片加入1滴(约50μl)计算,3ml可做60张切片,18ml可做360张切片。
3、对于内源性生物素含量比较丰富的组织,使用本试剂盒时最好用内源性生物素阻断剂进行封闭。
4、DAB工作液现配现用,配制好的工作液2~8℃避光1小时内有效。
5、实验过程中避免组织片干燥,因此各步孵育时工作液用量必需充足,保证完全覆盖组织样本,且尽量在湿盒中进行孵育。
6、为获得最佳实验结果,请务必优化实验条件及试剂用量。
7、DAB为可疑致癌物,使用时请采取必要的防护措施。
8、本产品仅用于科研,不能用于人体反应或人体治疗。
操作步骤:
1、常规处理欲检测的石蜡或冰冻组织切片或细胞爬片等样本。
1)组织切片或细胞爬片染色前处理:
a. 石蜡切片
脱蜡水化:60ºC烤片1小时,二甲*脱蜡二次,每次5分钟;再依次浸入梯度乙醇(无水乙醇-无水乙醇-95%-85%-75%乙醇)和蒸馏水中各5分钟水化。
b. 冰冻切片和细胞爬片
切片(或爬片)浸于0.01 M pH7.4 PBS洗涤3次×5分钟。然后用0.1%Triton X-100覆盖组织(或细胞)浸润15分钟,0.01 M pH7.4 PBS洗涤2次×5分钟。
2)石蜡切片的抗原修复:绝大大多数情况下,石蜡组织切片用柠檬酸缓冲液高压修复都是适合的。
修复工作液配制:1 L去离子水中加入10ml柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液, 100×)(WE0318),混匀即可。
修复过程:修复液加入高压锅内,待修复切片浸于修复液中(必需没过组织),盖上压力锅盖,加热至均匀喷汽,从喷汽开始计时,1~2分钟后压力锅离开热源,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水淋洗后,再用PBS(0.01 M pH7.4)漂洗2次,每次3分钟。
2、滴加适量Solution A白色溶液,即内源性过氧化物酶封闭液室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
3、滴加适量Solution B白色溶液,即封闭用正常羊血清工作液,室温孵育10分钟,甩干。
4、滴加适量一抗工作液(商品化即用型抗体或适当比例稀释的浓缩抗体),按实验要求孵育,然后PBS充分淋洗。
5、滴加适量Solution C黄色溶液,即生物素标记羊抗兔二抗工作液,室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
6、滴加适量Solution D红色溶液,即HRP标记的链霉亲和素,室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
7、DAB显色工作液配制:根据需要量,将DAB-A和DAB-B以1:19的体积比混匀后即为DAB显色工作液。也可选择每毫升试剂B中滴加1滴(约50μl)试剂A,混匀即可。
8、显色:加适量的DAB显色工作液于需要显色的组织切片或细胞爬片上即可显色,显色时间一般为1-5分钟。显微镜下观察控制显色时间,当达到最佳显色效果后,自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明,封片后可长期保存。
储存条件:2~8℃
免疫组化试剂盒(兔源一抗)价格厂家正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·哺乳动物蛋白抽提试剂盒
编号:WE0262
英文名称:Mammalian Protein Extraction Kit
规格:25次|100次
本试剂盒能够快速,温和,高效的裂解哺乳动物细胞,有效提取细胞浆和细胞核蛋白。该试剂使用温和配方保证所提取蛋白保持生物学活性并可应用于多种蛋白分析试验,如:报告基因和酶活性测定,免疫检测,蛋白纯化等。提取后蛋白可采用BCA法进行蛋白定量分析。哺乳动物蛋白抽提试剂盒中带有蛋白酶抑制剂混合物,可有效避免蛋白提取过程中蛋白的降解。
试剂盒组成:
| 组份 | 25次 | 100次 |
| Mammalian Protein Extraction Reagent | 25ml | 100ml |
| Protease Inhibitor Cocktail | 250μl | 1ml |
保存条件:Protease Inhibitor Cocktail:-20℃,其它组分:室温
注意事项:
1、本产品可有效裂解细胞培养板培养的贴壁细胞(无需刮取)以及离心收集的悬浮细胞,较反复冻融或超声法具有更高提取效率。但对于组织蛋白的抽提,建议使用组织蛋白抽提试剂盒(WE0260)。
2、表1中所列的是贴壁细胞蛋白提取的最佳使用量,先收集细胞可以减少试剂用量从而获得更高的蛋白浓度。
3、也可以根据细胞数量估计抽提试剂的使用量。如2×106个Hela细胞约重20 mg,需要加入200μl抽提试剂。
4、通过本产品提取的蛋白,可通过BCA法进行蛋白定量分析。
使用方法:
贴壁细胞蛋白抽提
1、请在蛋白抽提前取出实验所需Mammalian Protein Extraction Reagent进行预冷。
2、小心倾去贴壁细胞的培养液,使用PBS漂洗细胞。
3、加入适量Mammalian Protein Extraction Reagent(抽提蛋白前2-3分钟按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail),在冰上用枪头吹打贴壁细胞,将裂解液转移至离心管中,冰上孵育20分钟,让细胞充分裂解(试剂使用量请参考附表1,冰上放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
4、14000×g离心5-10分钟。
5、转移上清液至新管中,用于进一步分析。
悬浮细胞蛋白提取
1、请在蛋白抽提前取出实验所需Mammalian Protein Extraction Reagent进行预冷。
2、将悬浮细胞2,500×g,离心10分钟,弃去上清。使用PBS漂洗细胞。2,500×g,离心10分钟,弃去上清。
3、加入适量Mammalian Protein Extraction Reagent,抽提蛋白前2-3分钟按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail,即1×工作液。
4、每100 mg细胞加入至少1ml 1×工作液。如提取的样本量较大,可首先使用少量1×工作液重悬细胞,然后加入剩余工作液。
5、吹打均匀后,冰上放置20分钟,让细胞充分裂解(冰上放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
6、14000×g离心15分钟。
7、转移上清至新管中,进行下一步分析。
附表1. 抽提试剂使用量推荐表
| 细胞培养板类型或平皿类型 | 抽提试剂使用量 |
| 100mm | 500-1000μl |
| 60mm | 250-500μl |
| 6孔培养板 | 200-400μl/孔 |
| 24孔培养板 | 100-200μl/孔 |
| 96孔培养板 | 50-100μl/孔 |
附表2. 常见问题及解决办法
| 问题 | 可能原因 | 解决方法 |
| 低提取率 | 低蛋白表达量 | 优化转染系统 |
| 试剂使用量不够 | 增加抽提试剂使用量 | |
| 试剂无法溶解细胞膜 | 增加裂解时间或者加大晃动幅度 | |
| 无法获得膜蛋白 | 更适合提取核浆蛋白 | 使用真核细胞膜蛋白抽提试剂盒 |
储存条件:-20℃
免疫组化试剂盒(兔源一抗)价格厂家关键词:免疫组化试剂盒(兔源一抗),Rabbit HRP Kit(DAB),WE0314
·Tris-甘*酸转膜缓冲液(pH8.3,10×)
编号:WE0311
英文名称:Tris-Glycine Transfer Buffer(pH8.3, 10×)
规格:500ml
·FITC标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号:WE0392
英文名称:Goat Anti-Mouse IgG, FITC Conjugated
规格:100μl
产品为FITC(硫*酸荧光素)标记的经亲和纯化的山羊抗体,特异识别小鼠IgG重链和轻链。本产品检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应。荧光素标记抗体广泛应用于免疫学、细胞化学、流式细胞分析等研究,在临床检验上也用于细菌、病毒和寄生虫的检验及自身免疫病的诊断等。本
免疫原:小鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:FITC,Amax=492; Emax=520
应用范围:Immunofluorescence(1:25-100)
·PBS(pH7.5,10×)
编号:WE0312
英文名称:Goat Anti-Mouse IgG, FITC Conjugated
规格:500ml
产品为FITC(硫*酸荧光素)标记的经亲和纯化的山羊抗体,特异识别小鼠IgG重链和轻链。本产品检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应。荧光素标记抗体广泛应用于免疫学、细胞化学、流式细胞分析等研究,在临床检验上也用于细菌、病毒和寄生虫的检验及自身免疫病的诊断等。本
免疫原:小鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:FITC,Amax=492; Emax=520
应用范围:Immunofluorescence(1:25-100)
·游离DNA样本保存管(10ml)
编号:WE0398
英文名称:Cell-Free DNA Storage Tube(10ml)
规格:5ml×5支|5ml×50支
游离DNA保存管可直接用于血样的采集与运输,并稳定其中的游离DNA(Cell-Free DNA),是由EDTA抗凝剂和特殊的保护剂组成,能够有效抑制血浆中的核酸酶,并避免血液有核细胞中基因组DNA的释放。该产品适用于无创产前筛查与一些疾病的早期诊断相关的研究。
游离DNA保存管中血液样本可按大多数商业化试剂盒进行游离DNA提取,提取后的游离DNA可应用于下游的检测与分析。同时,该产品也能够用于血液有核细胞中的基因组DNA的保存。
免疫组化试剂盒(兔源一抗)价格厂家关键词:免疫组化试剂盒(兔源一抗),Rabbit HRP Kit(DAB),WE0314
BTN131054 免称量蛋白级DTT Weighting-free DTT
CYB168012 兔血清 200ml/瓶
BTN100873 尿素 Urea
BTN81201 酵母电转感受态细胞制备试剂盒 Yeast Electro Competent Cell Preparation Kit
ARB11930 大鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)酶联免疫定量检测 Rat 17-hydroxycorticosteroids,17-ohcs ELISA KIT
ARB12737 小鼠I型胶原(Col I)含量分析 Mouse collagen type i,col iELISA KIT
4.1-66kDa低范围分子量MARK Tylosin tartrate
ARB10895 人抗麻疹病毒抗体(MVAb)代做ELISA实验 Human anti-measles virus antibody ELISA KIT
L-酪*酸叔丁酯 Calcium DL-malate 16874-12-7
ARB10593 人血小板相关免疫球蛋白(PAIg)Elisa方法检测 Human platelet-associated immunoglobulins,paig ELISA KIT
BTN130569 GAPDH小鼠单抗 GAPDH Mouse Mab
盐*(代"酸")金霉素 MR 64-72-2
CYB163072 兔抗生物素-FITC
ARB11495 人脂多糖/内毒素(LPS)elisa检测 Human lipopolysaccharides,lps ELISA KIT
PY04-068 TTC 10mg/支×10支 每支添加于100mlKF链球菌琼脂培养基基础中,用于粪链球菌的选择性分离及计数
ARB13197 小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA检测服务 Mouse lipoprotein α,lp-α ELISA KIT
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文献和实验位。 IF(免疫荧光检测)是采用荧光素标记物作为探针,形成的抗原抗体复合物上带有荧光素,在荧光显微镜下,受激发光的照射后发出一定波长的荧光,从而对细胞、组织中的抗原进行定位或定量。 表 1 IHC/ICC与IF特点对比 IHC/ICC 与 IF 染色中使用的抗体主要为一抗与二抗,根据是否选用二抗以及二抗标记物类型可形成多种不同的检测系统。信号放大是免疫组化实验中的重要步骤,信号放大可以使目标蛋白质的信号从微弱到明显,从而更容易被观察和定量。现有的信号放大技术多为链霉亲和素-生物素法,该方法基于链酶亲和
。 实验类型:大多数只标明用于WB、IP、IHC、IF、ChIP的抗体都不适用于流式实验(FC,flow cytometry)。选择标明用于FC实验的抗体,并有引用文献和实验数据图。 克隆号:有一些标记物有多个克隆号,选择文献报道中使用多,荧光标记种类多的克隆号。 厂家和批号:不同厂家或同一厂家生产的不同批号的相同荧光的相同标记物的抗体,荧光染料的强度可能有少许差别,不建议一次实验混合使用。 2、流式抗体荧光标记的方式包括直接标记和间接标记两种。 在流式实验过程中,直标抗体一抗上连接有荧光染料,间标
要,表明这种抗体可能存在种属差异,且这种抗体适合检测哪种种属动物体内的抗原。 4、种属来源,一般兔来源的多是多克隆;而小鼠来源的多是单克隆,但也有另外。根据此来源来选择相应的二抗。 5、生产厂家的选择。如 santa Cruz 公司抗体一般 1 ml,价格 2100 元左右;而 chemicon 公司一抗一般 100 μl,价格 2800 元左右。这两个厂家的同一种抗体,它的实际效价稳定是不同的,我一般用后者抗体做免疫组化效果较好,而前者做 WB 效果还可以。 三、在什么情况下使用
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