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北京柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)现货价格

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  • ¥120 - 1770
  • 百奥莱博
  • 北京
  • WE0318-CVW
  • 2025年07月08日
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      2~8℃

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      长期

    • 英文名

      Citrate Buffer(100×)

    • 库存

      679

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专业生产供应北京柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)现货价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:北京柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)现货价格
    英文名:Citrate Buffer(100×)
    产地:国产|进口
    编号:WE0318
    规格:100ml
      福尔马林固定时,组织中的许多*基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。因此,对于石蜡切片,要求在进行IHC染色前,先进行抗原修复,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,恢复抗原的原有空间形态。本抗原修复液适合于大多数的抗原,用该修复液修复后阳性染色明显增强,抗原定位理想。

    注意事项
    1、请使用足量的修复液,修复过程中保证组织切片完全浸没在修复液中。
    2、使用沸水浴或高压修复时,操作请务必谨慎,尤其高压修复时,保证锅内有足量的修复液,以防止干烧。
    3、推荐的修复时间为达到理想修复效果所需时间,如组织粘片不牢,容易掉片,请酌情减少修复时间。

    操作步骤

    1、高压热修复:根据需要量,取适量本品,稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将稀释好的修复液加入高压锅内,将待修复切片浸于其中,保证修复液没过组织(最好将切片浸入盛修复液的塑料容器内,再置于锅内修复液浴中),盖上压力锅盖,加热至均匀喷汽,从喷汽开始计时,1~2 分钟后压力锅离开热源,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水冲洗后,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度最大,是最常用的热修复法。

    2、微波热修复:根据需要量,取适量本品,稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将切片放入盛有修复液的容器中,置微波炉内加热至沸腾,停止加热,使容器内液体温度下降保持在 95℃~98℃之间并持续 10~15分钟(注意:请根据具体机型酌情设置条件,务必满足以上步骤中对温度和时间的要求)。取出容器,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水冲洗后,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度大于沸水浴,但小于高压修复。

    3、沸水浴热修复:根据需要量,取适量本品,稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将待修复切片完全浸入盛有修复液的容器中,并将此容器置于盛去离子水的大器皿水浴中,电炉上加热煮沸,从修复液的温度到达95℃起开始计时15~20分钟。让切片在修复液中自然冷却至室温,蒸馏水冲洗,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。该方法效果较微波和高压修复差。

    储存条件:2~8℃

    北京柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)现货价格正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:

    ·罗丹明标记驴抗小鼠IgG(H+L)
    编号:WE0367
    英文名称:Donkey Anti-Mouse IgG,Rhod(TRITC)Conjugated
    规格:100μl
    本产品为TRITC标记的经抗原亲和纯化的驴抗体,特异识别小鼠IgG重链和轻链,检测灵敏度高,本底低,稳定性好。

    荧光素标记抗体广泛应用于免疫学的研究。TRITC(四甲基异硫*酸罗丹明)为罗丹明的衍生物,激发后呈现明亮的橙红色荧光。与FITC的黄绿色荧光对比鲜明,可配合用于双重标记或对比染色。因其荧光淬灭慢,也可用于单独标记染色。

    免疫原:小鼠IgG
    缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
    稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
    防腐剂:0.05%叠氮*
    荧光团:TRITC,Amax=550; Emax=570
    应用范围:对于大多数实验(1:50-200)

    ·BaHF高保真DNA聚合酶
    编号:WE0113
    英文名称:BaHF High Fidelity DNA Polymerase
    规格:500U|2500U
      本产品是经过特殊处理的热启动高保真聚合酶。该聚合酶具有5"-3"DNA聚合酶活性,5"-3"核酸外切酶活性和3"-5"核酸外切酶活性,在普通PCR条件下,与BaldStar Taq DNA Polymerase相比,具有扩增效率高、错配率低的优良性能。化学修饰使该酶在常温下没有聚合酶活性,有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活须在95℃下孵育10分钟,该条件可以整合入已有的PCR热循环程序。优化的缓冲体系使酶的作用发挥最大功效,实现对目的片段的高保真、高特异性、高扩增效率、高灵敏度扩增。使用本制品扩增得到的PCR产物的3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。本产品应用于常规的PCR、RT-PCR和多重PCR,特别适用于对特异性、保真性和扩增效率均有较高要求的PCR。

    产品组成

     
    组份 500U 2500U
    BaHF DNA Polymerase, 5 U/μl 100μl 5×100μl
    5×BaldStar PCR Buffer 1.9ml 5×1.9ml

    注意:本产品的5×BaldStar PCR Buffer中含有8.5 mM*离子。

    活性定义
    用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

    质量控制
    1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
    2、经检测无外源核酸酶活性;
    3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
    4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;
    5、室温存放一个月,无明显活性改变。

    使用方法
    以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

    1、PCR反应体系
    试剂 50μl反应体系 终浓度
    5×BaldStar PCR Buffer 10μl
    dNTP Mix,10 mM each 1μl 200μM each
    Forward Primer,10μM 2μl 0.4μM
    Reverse Primer,10μM 2μl 0.4μM
    Template DNA <0.5μg <0.5μg/50μl
    BaHF DNA Polymerase ,5 U/μ l 0.5μl 2.5 U/50μl
    ddH2O up to 50μl  

    注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。

    2、PCR反应条件
    步骤 温度 时间 循环数
    预变性 95℃ 10 min  
    变性 94℃ 30 s 30-40个循环
    退火 55-65℃ 30 s
    延伸 72℃ 60 s
    终延伸 72℃ 5 min  


    注意:
    1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
    2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品中所包含的BaHF DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
    3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
    4)本产品须在预变性95℃,10 min条件下实现酶的活化。

    储存条件:-20℃,避免反复冻融。


    北京柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)现货价格关键词:IHC抗原修复液,100×,WE0318,Citrate Buffer(100×),柠檬酸缓冲液,柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)


    ·DNA/RNA提取试剂盒
    编号:WE0203
    英文名称:NuPure DNA/RNA Extraction Kit
    规格:50次
      本试剂盒可用于从同一细胞或组织样本中同时纯化基因组DNA和总RNA。由于不需要将样本分成两份用于不同的纯化步骤,该试剂盒可最大限度的回收DNA和RNA。纯化的DNA和RNA被单独洗脱并可直接用于各种下游实验。本试剂盒中不包含*酚和*仿等有毒物质,无需乙醇沉淀,操作简单、快捷。基因组DNA可用于PCR、Real-time PCR、Southern Blot、 Dot Blot、 比较基因组杂交(CGH)、 基因分析和SNP分析; 总RNA可用于RT-PCR、 Real-time RT-PCR、cDNA的合成、Northern Blot、Dot Blot等分析。

    试剂盒组成
    组份 50次
    Buffer RL 35ml
    Buffer RW1 40ml
    Buffer RW2(浓缩液) 11ml
    RNase-Free Water 10ml
    Buffer GW1(浓缩液) 13ml
    Buffer GW2(浓缩液) 15ml
    Buffer GE 15ml
    吸附柱DM及收集管 50套
    吸附柱RM及收集管 50套
    RNase-Free离心管(1.5ml) 100个


    自备试剂:β-巯基乙醇(新开封或提取RNA专用)、70%乙醇(用无RNase的水配制)、无水乙醇。

    实验前准备及重要注意事项/strong>:
    1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
    ① 使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
    ② 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M的NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
    ③ 配制溶液应使用RNase-Free Water。
    ④ 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
    2、样品应避免反复冻融,否则影响提取DNA和RNA的质量。样品在Buffer RL中,可于-70℃保存一个月。
    3、Buffer RL在使用前请加入β-巯基乙醇,1ml Buffer RL加10μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RL室温可保存1个月。
    4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer RW2、Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
    5、使用前请检查Buffer RL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请于56℃水浴重新溶解。
    6、所有离心步骤均使用台式离心机,室温下进行。

    操作步骤
    1、材料处理
    ① 贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液(最大提取量为107个细胞), 收集细胞,弃尽培养液,加入600μl Buffer RL(用前检查是否加入β-巯基乙醇),反复吹打使其充分裂解。
    注意:一定要弃尽培养液,否则影响裂解和后续的核酸纯化步骤。
    ② 取不大于30 mg的动物组织,液氮研磨成细粉末,加入600μl Buffer RL(用前检查是否加入β-巯基乙醇),或直接加入600μl Buffer RL(用前检查是否加入β-巯基乙醇),匀浆处理。
    注意:匀浆要充分,否则影响RNA产量。
    2、将上步所得溶液12000rpm(~~13400×g)离心3-5分钟,小心的将上清加入到已装入收集管的吸附柱DM中,12000rpm离心30-60 秒,收集滤液。将吸附柱DM放在一个新的收集管中,室温或4℃放置,待提DNA。
    注意:确保吸附柱DM上没有液体残留,如果有必要可以重复离心,直至所有的液体通过吸附柱DM的膜。

    总RNA提取
    3、向步骤2所得滤液中加入1倍体积的70%乙醇(无RNase的水配制),混匀。
    4、将上步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱RM中,若一次不能全部加完溶液,可分次转入。12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱RM重新放回收集管中。
    5、向吸附柱RM中加入700μl Buffer RW1, 12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱RM重新放回收集管中。
    6、向吸附柱RM中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心20秒, 倒掉收集管中的废液,将吸附柱RM重新放回收集管中。
    7、重复步骤6。
    8、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱RM置于室温数分钟,以彻底晾干。
    注意:此步骤目的是去除吸附柱RM中残余的乙醇,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
    9、将吸附柱RM置于一个新的无RNase1.5ml离心管中,向吸附柱RM的中间部位加入30-50μl RNase-Free Water,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集RNA溶液,-70℃保存RNA,防止降解。
    注意:
    ① RNase-Free Wate体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
    ② 如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤9。
    ③ 如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤9。

    基因组DNA提取
    10、向吸附柱DM中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DM放收集管中。
    11、向吸附柱DM中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇), 12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DM放回收集管中。
    12、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱DM置于室温数分钟,以彻底晾干。
    注意:这一步的目的是将吸附柱DM中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
    13、将吸附柱DM置于一个新的无RNase 1.5ml离心管中,向吸附柱DM的中间部位加入100μl Buffer GE,室温放置2-5分钟,12000rpm离心2分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
    注意:
    ① Buffer GE的体积不应小于100μl,体积过小影响回收率。
    ② 如果要提高DNA的产量,将100μl新的Buffer GE加至吸附柱上,重复步骤13。
    ③ 如果要提高DNA浓度,可以将步骤15所得的DNA洗脱液重新加至吸附柱上,重复步骤13。

    储存条件:室温(15~30℃)


    北京柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)现货价格关键词:IHC抗原修复液,100×,WE0318,Citrate Buffer(100×),柠檬酸缓冲液,柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液,100×)

    PY02-133  胆盐乳糖培养基(BL)  250克  
    ARB10326 人内皮素1(ET-1)Elisa定量检测 Human endothelin 1,et-1 ELISA KIT
    半胱*酰甘*酸 Celite 545 19246-18-5
    ARB11873 人糖链抗原19-9(CA19-9)酶标法分析 Human carbohydRate antigen19-9,ca19-9 ELISA KIT
    ARB13472 鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)Elisa定量检测 Chicken egg immunoglobulin of yolk,igy ELISA KIT
    HC0168 双凹载玻片
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    葡聚糖凝胶G-75 D-Xylose 37224-29-6
    5-*基荧光素 DMT 3326-34-9
    PY02-057A  四硫*(代"磺")酸*亮绿增菌液基础(TTB)  250克  
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    ARB11456 人特异性免疫球蛋白E(sIgE)elisa测定使用说明书 Human specific immunoglobulin e,sige ELISA KIT
    罗丹宁 Basic Blue 26 141-84-4
    ARB12159 大鼠白介素2(IL-2)酶联免疫定量检测 Rat interleukin 2,IL-2 ELISA KIT
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      800 进口分装 C0362 IgM间接法试剂盒配套试剂 ( 各种动物 ) 96T/ELISA法 800 进口分装 含20× 浓缩洗涤液 50ml 、终止液、 10× 标本稀释、显色剂、酶标抗体工作液、包被缓冲液各 12ml ,        

    • 湿兄,我有块蜡肉,怎么才能毕业?

      的方式主要分为热修复和酶修复两种,其中热修复是在微波炉或者高压锅中,切片在沸腾温度(95~99℃)加热一段时间后完成,所用到的修复液主要有柠檬酸缓冲液(pH=6.0),EDTA(pH=8.0)和 TE(pH=9.0)三种;酶修复则是在 37℃ 温箱中进行,利用胃蛋白酶、胰蛋白酶或者蛋白酶 K 进行的酶解作用达到抗原修复的目的,使用这种修复方式需注意对修复液进行预热,使其在切片放入前,就已达到酶类的最佳反应温度。抗原修复IHC 中最重要的一环,目的蛋白抗原表位的修复效果影响着后续的一抗结合效果

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      因素之一,AR的PH值、浓度、化学成分也是重要的影响因素之一。使用低PH值AR必须使用阴性对照片,以防止定位不准[9]。Shi等人[10]强调修复缓冲液的PH值对某些抗原的修复十分重要,实验中我们也发现要获得满意结果必须选择抗原修复液的最适PH值。在常规石蜡切片做AR-IHC,采用不同浓度的Alcl3做AR,发现4%的Alcl3取得最理想的染色[11]。在修复的抗原中,金属盐可影响蛋白的结构。郑辉等人[12]使用0.01mmol/LPBS、0.01mol/L柠檬酸缓冲液、0.1mol/L Tris

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