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DNA磷酸化试剂盒
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6个月
DNA Phosphorylation Kit
大量
联迈生物
20次
DNA磷酸化试剂盒产品及特点
人工合成的PCR引物、linker和adaptor的5′端一般都是-OH基团而不是-PO4基团(除非额外付费要求在人工合成时加上-PO4基团),而任何DNA连接酶都不能将一个DNA分子 5′端的-OH基团和另一个DNA分子3′端的-OH基团进行连接,因此通过人工合成的DN**段和天然DNA之间的连接效率一般都比天然DNA彼此的连接效率低(天然DNA 4个端口均可连接,人工合成的DNA跟天然DNA有2个端口可以连接,人工合成的DNA之间没有任何端口可以连接),尤其是在平末端连接时。本公司开发的DNA磷酸化产品能将DNA分子5′端的-OH基团磷酸化。其操作流程如下:
它具有下列特点:
1. 可以快速把DNA 5′端的-OH基团变成-PO4基团,使人工合成的DNA(包括PCR产物)跟天然DNA一样有高的连接效率。
2. 既可以对单链DNA进行磷酸化处理,也可以对双链DN**段同时磷酸化处理。
3. 处理后的DNA可以直接用于连接反应、克隆等,不需要纯化。
4. 本产品足够20次DNA的磷酸化实验。
DNA磷酸化试剂盒使用及效果
将PCR胶回收片段或单链DN**段与TPK缓冲液、ATP溶液(10 mM)、T4 多核苷酸激酶(10U/uL)混合,37℃反应30分钟,70℃热处理5分钟,灭活酶。即可直接用于后续克隆(加入量不要超过总体积的1/5)。
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