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cDNA第一链合成试剂盒
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低温运输、-20℃保存
一年
1st-Strand cDNA Synthesis Kit
大量
联迈生物
10次
cDNA第一链合成试剂盒产品及特点
本试剂盒提供合成cDNA第一链所需要的全部试剂。其原理是用莫洛尼氏鼠白血病病毒反转录酶(M-MLV RT)高效合成mRNA的全长cDNA拷贝。在基因特异性引物存在条件下,此单链cDNA产物可直接用来进行PCR扩增,或进行其它下游操作,包括合成cDNA第二条链、构建cDNA文库、核酸杂交等。基于Oligo(dT)引物的cDNA合成原理如下:
1. 使用突变的反转录酶,内源RNase H活性低。
2. 最长可合成13 Kb的cDNA。
3. 可以使用oligo-dT、随机引物和RNA专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提供)。
4. 总RNA、poly(A)+RNA或特殊RNA均可作为模板。
5. 可用于cDNA文库构建、RT-PCR、探针标记等。
cDNA第一链合成试剂盒使用及效果
在无菌管中加入1-10 μ L(1 ng-2 μ g)总RNA ,1 μ L引物,加无核酸酶污染水补至13 μL,70℃加热5分钟后立即冰浴,再加入5 uL RT Buffer(含dNTP),37℃保温5分钟。继续向反应液中加入2 μ L M-MLV反转录酶(含RI),反应终体积 为20 μ L。42℃温育1小时。70℃ 保温10分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。反应产物即为cDNA。
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