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核苷酸类似物法易错PCR试剂盒
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一年
dNTP Analogs Error-Prone PCR Kit
大量
联迈生物
15 次
核苷酸类似物法易错PCR试剂盒产品及特点
dPTP和8-oxo-dGTP是两种dNTP类似物,其分子结构图如下。PCR过程中,在Taq DNA聚合酶的作用下,dPTP和8-oxo-dGTP可以随机掺入到PCR产物中而引起突变。8-oxo-dGTP引起的突变率(A→C;T→G)可以达2%;dPTP引起的总突变率(A→G;T→C;G→A;C→T)最高可达19%。dPTP和8-oxo-dGTP引起的突变率和PCR循环数的关系图如下:
本产品即是基于dPTP、8-oxo-dGTP的易错PCR试剂盒,其具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品DNA模板和引物,无需单独准备各成分。
2. 经过两轮PCR扩增。
3. 总突变率可以高达20%。
4. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
使用及效果
取自备的DNA模板、引物添加至25 μLPCR Mix 3.0中,分别添加2.5 μLdPTP和8-oxo-dGTP,补水至50 μL。PCR仪上进行第一轮PCR扩增。扩增结束后,取适当体积第一轮PCR反应液作为模版,相同PCR参数条件下(不加dPTP、8-oxodGTP),进行第二轮PCR扩增(20-30循环)。
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