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BglII

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  • 江蓝纯
  • D6093
  • 2025年07月12日
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      江蓝纯

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      500U

    产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
    D6093 BglII 500U 118.00元

          BglII内切酶为进口分装,基本信息如下:

    识别序列 缓冲液兼容性(%) 酶切温度 失活条件 甲基化干扰?
    A^GATCT TCTAG^A 1X B 1X G 1X O 1X R 1X Y 2X Y 37℃ 常规加热 
    不能失活*
    0-20 20-50 100 50-100 0-20 100

          *,可以采用加入EDTA至终浓度为20mM的方法使BglII失活,也可以采用酚氯仿抽提等方法使BglII失活。

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      限制性酶切位点。3. ShRNA 插入片段中的茎环应当靠近寡核苷酸的中央。4. 5~6 个 T 必须放置在 ShRNA 插入片段尾部以确保 RNA 聚合酶 III 终止转录。5. 在正义链和反义链序列上不能出现连续 3 个或以上的 T。这可能导致 ShRNA 转录的提前终止。下面以 pSUPER 质粒载体设计 ShRNA 为例:1. 选择双酶切位点分别是 BglII-HindIII site。2. pSUPER ShRNA design model:红色部分包含限制性酶切位点,绿色部分为茎环序列。3. shRNA 的引物

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      几个小技巧: 1:在做多个同类酶切反应预混液时,水要多加1-5微升(当然不能超过预混液总体积的5%),以防止最后一管酶液不够的尴尬局面. 2:记住所用酶的特性,不光体现BUFFER的选择上。也体现记住不同限制酶稳定性上。比如BamHI5小时内稳定(37度),而BglII16小时内都保留100%的活性;那么在用酶时,如果能反应16小时,就可以采用BamHI : BglII = 2:1的用量了(为了省钱). 3:如果反应较长时间而酶切体系又很小比如10微升,那么哪怕用PCR小管做

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