- ¥862
- 江蓝纯
- D2916
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
江蓝纯
- 规格：
1μg
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| D2916 | pET-N-GST-PreScission | 1μg | 862.00元 |
pET-N-GST-PreScission是一种用于表达N端含有GST标签(Glutathione S-transferase tag, GST tag)的目的蛋白的原核表达质粒。本质粒N端GST标签后含有PreScission酶切位点，可通过PreScission Protease (P2302/P2303)切除N端的GST标签。
本质粒为卡那霉素抗性。
本质粒含有T7启动子/lac操纵子，可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点的前面有一个GST标签的编码序列。因此在多克隆位点根据读码框插入目的基因就可以表达N端含有GST标签的目的蛋白。
本载体在N端GST标签与多克隆位点之间含有PreScission蛋白酶识别的八肽序列LEVLFQGP，对应的核酸序列为
CTGGAAGTTCTGTTCCAGGGGCCC，因此在目的蛋白纯化后可以利用PreScission Protease切除N端的GST标签。PreScission
蛋白酶酶切发生在八肽序列的Q和G之间，因此在酶切去除GST标签的时候目的蛋白的N端留下两个额外的氨基酸残基GP。
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文献和实验Preparation of N-GST Fusion Protein for Affinity Immobilization of RNA
in a few hours under non-denaturing conditions. However, the performance of affinity purification methods can vary tremendously depending on the RNA immobilization matrix. It was previously shown that RNA immobilization via an optimized λN-GST fusion protein
Protease 是一种由人鼻病毒 14 型的 3C 蛋白酶和 GST 组成的融合蛋白。它可以特异性的将 pGEX-6P 系列等载体表达出的带有酶底物识别氨基酸序列融合蛋白的 GST 标签进行分离。由于其自身带有 GST 标签，Prescission Protease 能在单一步骤实现 GST 标签的柱上酶切和蛋白质纯化。此蛋白酶在低温条件下具有最佳活性，因此低温孵育不仅可以保证 GST 标签的高效去除，也能维持目标蛋白的活性。 Thrombin 和 Factor Xa 常温下具有较高的酶活，当选
。这13个载体中有9个的多克隆位点是扩展过的，有6个限制性酶切位点。扩展后的多克隆位点方便我们从λ噬菌体载体构建的文库中将所需的基因克隆出来并定向插入到表达载体中。所有载体上都带有可以将GST切割下来的蛋白酶识别位点，不同载体携带的蛋白酶不同，可以分成T系列、X系列和P系列，分别代表采用凝血酶Thrombin、Xa因子蛋白酶以及GE医疗产的PreScission™蛋白酶作为蛋白酶切割位点。前面两个都是非常经典的融合表达载体的蛋白酶切割位点，但是由于这两种蛋白酶切割需时较长而且要求在室温条件下切割GST
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