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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输及保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Bacterial Endotoxin Erasol
- 库存:
大量
- 供应商:
联迈生物
- 规格:
200 mL
菌体内毒素清除剂产品及特点
内毒素(即lipopolysaccharides,LPS)是E.coli 细胞壁的主要成分,传统的去除内毒素的方法是将内毒素和DNA一起纯化出来,然后再用各种方法去除其中的内毒素,操作繁琐,DNA回收率低。本产品可以直接把E.coli 表面的内毒素去除,从根本上避免了内毒素对后续操作(如质粒DNA提取,重组蛋白质提取)的污染。本产品具有下列特点:
1. 首个在菌体收集阶段去除内毒素的产品,从源头上避免了内毒素跟DNA和胞浆
蛋白的接触,从根本上防止了可能产生的污染。
2. 操作简单快速,用酶溶液温和清洗菌体3-4次即可去掉细菌表面的内毒素,只需
要10分钟左右时间,不需要复杂仪器设备。
3. 高效,能去除99%以上的内毒素。
4. 跟各种质粒DNA提取、基因组DNA提取和蛋白质提取等操作兼容,DNA丢失率只有10%左右(其他方法DNA丢失率可以高达50%)。
5. 不影响DNA和绝大部分蛋白质的活性,处理过的质粒DNA可用于转染实验。
6. 既可小规模使用(在1.5 mL离心管内),也可放量用于大规模无内毒素质粒DNA提取和无内毒素蛋白质纯化。
菌体内毒素清除剂使用及效果
将1.5-3 mL E.coli 饱和菌液离心后弃上清,得到细菌沉淀,加入1 mL本产品
温和混匀后10000-12000 g离心1分钟,弃上清(含内毒素),重复上述操作2-3次,
得到的菌体可以直接进入后续的质粒DNA提取或蛋白质提取程序。
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文献和实验关键词: 鼠抗内毒素单链噬菌体抗体 制备 近几十年来,G-菌的感染一直是困扰临床的一个主要难题。以前统计,美国每年有约40万的脓毒症患者,并发休克患者的死亡率高于50%。内毒素(LPS)作为G-菌的毒性成分,在启动体内免疫系统反应、介导炎性介质因子的释放、导致脓毒症和中毒性休克中起着重要的作用。因此我们旨在制备出一株对内毒素具有较高亲和力的单链抗体。首先用内毒素腹腔注射免疫雌性BALB/c小鼠共4周,从小鼠脾脏中提取总RNA,然后反转录合成cDNA第一链。利用RT
的膜,在质粒抽提过程中,使质粒能在离心过柱的瞬间,充分结合到质粒纯化柱,并在一定条件下被充分洗脱,从而实现质粒的快速抽提纯化。同时,试剂盒中配套的内毒素清除剂可特异性溶解内毒素并与水相分离,纯化的质粒内毒素 在质粒提取过程中,未提出质粒或质粒得率低有哪些原因呢? 1)细菌老化:请凃布平板培养后,重新挑选新菌落进行液体培养; 2)细菌培养物生长过度或不新鲜:不要于37℃培养超过16小时,分离质粒前长时间存放培养物是不利的. 3)质粒拷贝数低:由于使用低拷贝数载体引起的质粒
内毒素存在于菌体内,是菌体的结构成份。细菌在生活状态时不释放出来,只有当菌体自溶或用人工方法使细菌裂解后才释放,故称内毒素。大多数革兰氏阴性都有内毒素,如沙门氏菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、奈瑟氏球菌等。 内毒素是磷脂一多糖一蛋白质(phospholid-polysaccharide-protein)复合物,主要成份为脂多糖(lipopolysaccharide,lps)。是细胞壁的最外层成分,覆盖在坚韧细胞壁的粘肽上。各种细菌内毒素的成份基本相同,都是
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