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文献和实验RT。二步法荧光定量PCR:小鼠肝脏组织Bioteke 2×SYBR real-time PCR premixture Kit。 T公司荧光定量试剂。20μl反应体系包括:10μl 2×SYBR premixture,8.2μl RNA Free Water,0.4μl Primer F,0.4μl Primer R,1μl cDNA。T公司荧光定量试剂,20μl反应体系包括:10μl 2×T公司荧光定量试剂, 8.2μl RNA Free Water,0.4μl Primer F,0.4μl
设计了一个含有全新化学物质的新试剂盒,使一步法RT-PCR 更加有效,在两步法实验中可以获得更高的灵敏度。本文将对新试剂盒的表现进行检验。 简介 逆转录(RT)以及随后进行的PCR(RT-PCR)是RNA 分析中使用得最广泛的技术之一。如果需要平行分析多个RNA 样品,首选方法为一步法RT-PCR。如果要扩增困难目标片段或从单一cDNA 池中扩增多重目标片段则会选择两步法。Eppendorf 推出的全新的cMaster RTplusPCR 系统适用于各种RT-PCR 应用
定量的方法。 实时荧光定量 PCR 是目前确定样品中 DNA(或 cDNA) 拷贝数最敏感、最准确的方法。如果用于 RNA 检测,这被称为逆转录实时 PCR 即(Real-time RT-PCR)是实时 PCR 法,它是指对 DNA 或经过反转录(RT-PCR)的 RNA 通过聚合酶链式反应并实时监测 DNA 的放大过程,在扩增的指数增长期就测量扩增产物,因为扩增指数增长期测量值与特异 DNA(RNA)起始量存在相关性,从而实现定量检测。 RealTime PCR 的基本目标是精确
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