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pET-48b(+)

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  • Ybscience
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  • YB-0055
  • 2025年07月16日
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    • 英文名

      pET-48b(+)

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    • 供应商

      钰博生物

    • 规格

      1ug/5ug

    pET-48b(+)

    pET48b载体基本信息

    出品公司: Ybscience
    别名: pET48b, pET 48b
    质粒类型: 大肠杆菌蛋白表达
    表达水平:
    克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
    载体大小: 5605 bp
    5' 测序引物序列:   T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'; Trx-F: 5'-TTCCTCGACGCTAACCTG-3'
    3' 测序引物序列:   T7t: 5'-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'
    载体标签: N-Trx, N-His,N-HRV 3C, C-S, C-Thrombin
    载体抗性: 卡那
    表达宿主菌: Rosetta-gami2 、 Rosetta-gami2(DE3)
    备注: 与pET47系列载体相同,但多了Trx标签。; 含有HRV 3C蛋白酶切位点,可以在低温下将融合标签切除。含有C端Thrombin蛋白酶切位点。
    稳定性: 瞬时表达
    组成型: 组成型
    病毒/非病毒: 非病毒
     

    pET48b载体质粒图谱和多克隆位点信息

    pET-48b载体图谱



    pET-48b多克隆位点

    pET-48b载体特征

    pET48b载体简介

    pET-48b载体含有N端Trx和His标签,在标签后面紧跟着的是HRV 3C蛋白酶切位点。HRV 3C蛋白酶能够高特异性的识别LEVLFQ↓GP蛋白序列,能够在低温下高效切割掉融合标签序列。pET-48b载体还含有一个可选择的C端Thrombin蛋白酶切位点,紧接着位点后是S标签。

    pET48b载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意:载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的,所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。

    T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的,所以在T7噬菌体聚合酶的作用下,包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生,并启动蛋白表达,同时蛋白表达将被T7终止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下终止蛋白翻译。

    载体的单链测序应该使用S 18引物(Cat. No. 71262-3)。


    pET Vectors 选择指南
     

    pET48b载体序列

    LOCUS       pET-48b(+)              5605 bp    DNA     circular     11-SEP-2008
    DEFINITION  pET-48b(+).
    SOURCE      
      ORGANISM  
    COMMENT     This file is created by Vector NTI
                http://www.biofeng.com/
    COMMENT     ORIGDB|GenBank
    COMMENT     VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
    COMMENT     VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|
    FEATURES             Location/Qualifiers
         rep_origin      complement(5146..5593)
                         /vntifkey="33"
                         /label=f1\ori
         misc_RNA        complement(3522..4077)
                         /vntifkey="53"
                         /label=RNA\II
         rep_origin      complement(3522..3522)
                         /vntifkey="33"
                         /label=ColE1,\pBR\ori
         misc_RNA        3962..4069
                         /vntifkey="53"
                         /label=RNA\I
         CDS             2900..3091
                         /vntifkey="4"
                         /label=ROP\gene
         CDS             1246..2328
                         /vntifkey="4"
                         /label=lacI
                         /note="lac repressor"
         promoter        complement(839..855)
                         /vntifkey="30"
                         /label=T7\promoter
         protein_bind    complement(814..834)
                         /vntifkey="31"
                         /label=lacO
         protein_bind    complement(342..359)
                         /vntifkey="31"
                         /label=His-Tag
         terminator      complement(26..73)
                         /vntifkey="43"
                         /label=T7\terminator
         CDS             4231..5046
                         /vntifkey="4"
                         /label=Kan
         misc_feature    complement(213..230)
                         /vntifkey="21"
                         /label=Thrombin\site
         protein_bind    complement(168..212)
                         /vntifkey="31"
                         /label=S-Tag
         CDS             complement(441..767)
                         /vntifkey="4"
                         /label=Trx-Tag
         protein_bind    complement(310..332)
                         /vntifkey="31"
                         /label=3c
         primer          complement(300..336)
                         /vntifkey="27"
                         /label=S-SacII/Bam\+SanDI\-dcm
         misc_feature    complement(234..315)
                         /vntifkey="21"
                         /label=MCS
         primer          complement(374..421)
                         /vntifkey="27"
                         /label=S-Tag\Spacer-Spe\I
    BASE COUNT     1355 a      1434 c      1492 g      1324 t
    ORIGIN
            1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
           61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
          121 tgtttagcag cctaggttaa ttaagcctcg agagcagcag aagtagagct gtccatgtgc
          181 tggcgttcga atttagcagc agcggtttct ttactaccgc gtggcaccag agcgagctct
          241 gcggccgcaa gcttgtcgac ggacgtcggg cgcgccaagg cctgtacaga attcggatcc
          301 tggtacccgg gtccctgaaa gaggacttca agagccgcgg agtgatggtg atggtgatga
          361 ccagaaccac tagatggagt aggagtagga ggattgttat tagaaccgcc accaccacta
          421 gtatggccag aaccagaacc ggccaggtta gcgtcgagga actctttcaa ctgaccttta
          481 gacagtgcac ccactttggt tgccgccact tcaccgtttt tgaacagcag cagagtcggg
          541 ataccacgga tgccatattt cggcgcagtg ccagggtttt gatcgatgtt cagttttgca
          601 acggtcagtt tgccctgata ttcgtcagcg atttcatcca gaatcggggc gatcattttg
          661 cacggaccgc accactctgc ccagaaatcg acgaggatcg ccccgtccgc tttgagtaca
          721 tccgtgtcaa aactgtcgtc agtcaggtga ataattttat cgctcatatg tatatctcct
          781 tcttaaagtt aaacaaaatt atttctagag gggaattgtt atccgctcac aattccccta
          841 tagtgagtcg tattaatttc gcgggatcga gatcgatctc gatcctctac gccggacgca
          901 tcgtggccgg catcaccggc gccacaggtg cggttgctgg cgcctatatc gccgacatca
          961 ccgatgggga agatcgggct cgccacttcg ggctcatgag cgcttgtttc ggcgtgggta
         1021 tggtggcagg ccccgtggcc gggggactgt tgggcgccat ctccttgcat gcaccattcc
         1081 ttgcggcggc ggtgctcaac ggcctcaacc tactactggg ctgcttccta atgcaggagt
         1141 cgcataaggg agagcgtcga gatcccggac accatcgaat ggcgcaaaac ctttcgcggt
         1201 atggcatgat agcgcccgga agagagtcaa ttcagggtgg tgaatgtgaa accagtaacg
         1261 ttatacgatg tcgcagagta tgccggtgtc tcttatcaga ccgtttcccg cgtggtgaac
         1321 caggccagcc acgtttctgc gaaaacgcgg gaaaaagtgg aagcggcgat ggcggagctg
         1381 aattacattc ccaaccgcgt ggcacaacaa ctggcgggca aacagtcgtt gctgattggc
         1441 gttgccacct ccagtctggc cctgcacgcg ccgtcgcaaa ttgtcgcggc gattaaatct
         1501 cgcgccgatc aactgggtgc cagcgtggtg gtgtcgatgg tagaacgaag cggcgtcgaa
         1561 gcctgtaaag cggcggtgca caatcttctc gcgcaacgcg tcagtgggct gatcattaac
         1621 tatccgctgg atgaccagga tgccattgct gtggaagctg cctgcactaa tgttccggcg
         1681 ttatttcttg atgtctctga ccagacaccc atcaacagta ttattttctc ccatgaagac
         1741 ggtacgcgac tgggcgtgga gcatctggtc gcattgggtc accagcaaat cgcgctgtta
         1801 gcgggcccat taagttctgt ctcggcgcgt ctgcgtctgg ctggctggca taaatatctc
         1861 actcgcaatc aaattcagcc gatagcggaa cgggaaggcg actggagtgc catgtccggt
         1921 tttcaacaaa ccatgcaaat gctgaatgag ggcatcgttc ccactgcgat gctggttgcc
         1981 aacgatcaga tggcgctggg cgcaatgcgc gccattaccg agtccgggct gcgcgttggt
         2041 gcggacatct cggtagtggg atacgacgat accgaagaca gctcatgtta tatcccgccg
         2101 ttaaccacca tcaaacagga ttttcgcctg ctggggcaaa ccagcgtgga ccgcttgctg
         2161 caactctctc agggccaggc ggtgaagggc aatcagctgt tgcccgtctc actggtgaaa
         2221 agaaaaacca ccctggcgcc caatacgcaa accgcctctc cccgcgcgtt ggccgattca
         2281 ttaatgcagc tggcacgaca ggtttcccga ctggaaagcg ggcagtgagc gcaacgcaat
         2341 taatgtaagt tagctcactc attaggcacc gggatctcga ccgatgccct tgagagcctt
         2401 caacccagtc agctccttcc ggtgggcgcg gggcatgact agcatgatcg tgctcctgtc
         2461 gttgaggacc cggctaggct ggcggggttg ccttactggt tagcagaatg aatcaccgat
         2521 acgcgagcga acgtgaagcg actgctgctg caaaacgtct gcgacctgag caacaacatg
         2581 aatggtcttc ggtttccgtg tttcgtaaag tctggaaacg cggaagtcag cgccctgcac
         2641 cattatgttc cggatctgca tcgcaggatg ctgctggcta ccctgtggaa cacctacatc
         2701 tgtattaacg aagcgctggc attgaccctg agtgattttt ctctggtccc gccgcatcca
         2761 taccgccagt tgtttaccct cacaacgttc cagtaaccgg gcatgttcat catcagtaac
         2821 ccgtatcgtg agcatcctct ctcgtttcat cggtatcatt acccccatga acagaaatcc
         2881 cccttacacg gaggcatcag tgaccaaaca ggaaaaaacc gcccttaaca tggcccgctt
         2941 tatcagaagc cagacattaa cgcttctgga gaaactcaac gagctggacg cggatgaaca
         3001 ggcagacatc tgtgaatcgc ttcacgacca cgctgatgag ctttaccgca gctgcctcgc
         3061 gcgtttcggt gatgacggtg aaaacctctg acacatgcag ctcccggaga cggtcacagc
         3121 ttgtctgtaa gcggatgccg ggagcagaca agcccgtcag ggcgcgtcag cgggtgttgg
         3181 cgggtgtcgg ggcgcagcca tgacccagtc acgtagcgat agcggagtgt atactggctt
         3241 aactatgcgg catcagagca gattgtactg agagtgcacc atatatgcgg tgtgaaatac
         3301 cgcacagatg cgtaaggaga aaataccgca tcaggcgctc ttccgcttcc tcgctcactg
         3361 actcgctgcg ctcggtcgtt cggctgcggc gagcggtatc agctcactca aaggcggtaa
         3421 tacggttatc cacagaatca ggggataacg caggaaagaa catgtgagca aaaggccagc
         3481 aaaaggccag gaaccgtaaa aaggccgcgt tgctggcgtt tttccatagg ctccgccccc
         3541 ctgacgagca tcacaaaaat cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg acaggactat
         3601 aaagatacca ggcgtttccc cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt ccgaccctgc
         3661 cgcttaccgg atacctgtcc gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt tctcatagct
         3721 cacgctgtag gtatctcagt tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg
         3781 aaccccccgt tcagcccgac cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc
         3841 cggtaagaca cgacttatcg ccactggcag cagccactgg taacaggatt agcagagcga
         3901 ggtatgtagg cggtgctaca gagttcttga agtggtggcc taactacggc tacactagaa
         3961 ggacagtatt tggtatctgc gctctgctga agccagttac cttcggaaaa agagttggta
         4021 gctcttgatc cggcaaacaa accaccgctg gtagcggtgg tttttttgtt tgcaagcagc
         4081 agattacgcg cagaaaaaaa ggatctcaag aagatccttt gatcttttct acggggtctg
         4141 acgctcagtg gaacgaaaac tcacgttaag ggattttggt catgaacaat aaaactgtct
         4201 gcttacataa acagtaatac aaggggtgtt atgagccata ttcaacggga aacgtcttgc
         4261 tctaggccgc gattaaattc caacatggat gctgatttat atgggtataa atgggctcgc
         4321 gataatgtcg ggcaatcagg tgcgacaatc tatcgattgt atgggaagcc cgatgcgcca
         4381 gagttgtttc tgaaacatgg caaaggtagc gttgccaatg atgttacaga tgagatggtc
         4441 agactaaact ggctgacgga atttatgcct cttccgacca tcaagcattt tatccgtact
         4501 cctgatgatg catggttact caccactgcg atccccggca aaacagcatt ccaggtatta
         4561 gaagaatatc ctgattcagg tgaaaatatt gttgatgcgc tggcagtgtt cctgcgccgg
         4621 ttgcattcga ttcctgtttg taattgtcct tttaacagtg atcgcgtatt tcgtctcgct
         4681 caggcgcaat cacgaatgaa taacggtttg gttgatgcga gtgattttga tgacgagcgt
         4741 aatggctggc ctgttgaaca agtctggaaa gaaatgcata aacttttgcc attctcaccg
         4801 gattcagtcg tcactcatgg tgatttctca cttgataacc ttatttttga cgaggggaaa
         4861 ttaataggtt gtattgatgt tggacgagtc ggaatcgcag accgatacca ggatcttgcc
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         4981 tatggtattg ataatcctga tatgaataaa ttgcagtttc atttgatgct cgatgagttt
         5041 ttctaagaat taattcatga gcggatacat atttgaatgt atttagaaaa ataaacaaat
         5101 aggggttccg cgcacatttc cccgaaaagt gccacctgaa attgtaaacg ttaatatttt
         5161 gttaaaattc gcgttaaatt tttgttaaat cagctcattt tttaaccaat aggccgaaat
         5221 cggcaaaatc ccttataaat caaaagaata gaccgagata gggttgagtg ttgttccagt
         5281 ttggaacaag agtccactat taaagaacgt ggactccaac gtcaaagggc gaaaaaccgt
         5341 ctatcagggc gatggcccac tacgtgaacc atcaccctaa tcaagttttt tggggtcgag
         5401 gtgccgtaaa gcactaaatc ggaaccctaa agggagcccc cgatttagag cttgacgggg
         5461 aaagccggcg aacgtggcga gaaaggaagg gaagaaagcg aaaggagcgg gcgctagggc
         5521 gctggcaagt gtagcggtca cgctgcgcgt aaccaccaca cccgccgcgc ttaatgcgcc
         5581 gctacagggc gcgtcccatt cgcca
    //

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