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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
Blocking Buffer(PBS)
- 库存:
633
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应封闭液(用PBS配置,含吐温20)促销,我公司销*(代"售")全品类的细胞生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:封闭液(用PBS配置,含吐温20)促销
品牌:百奥莱博
英文名:Blocking Buffer(PBS)
编号:YT872
产地:国产|进口
规格:100ml
本品是最新一代的快速高效封闭液,总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、脱脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封闭液及国外同类产品,可以用于Western blot (WB)、Immunofluorescence (IF)、Immunohistochemistry (IHC)、Immunocytochemitry (IC) 等实验中的封闭、一抗或二抗的稀释。本产品配制在PBS中,含有适当浓度Tween-20。按照每张膜封闭需要5-10ml封闭液计算,一个包装的本产品 可以封闭10-20张膜。
本封闭液快速高效。封闭时间通常仅需5-15分钟,并且和BSA、脱脂奶粉、酪蛋白等传统封闭液以及国外同类的快速 封闭液相比,显示出更强的信噪比(参考下图)。
本封闭液封闭后背景极低。本封闭液不含血清和白蛋白,确保极高的信噪比。
本封闭液兼容性好,兼容辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶和生物素标记的二抗。本产品中添加了不影响HRP和AP活性的防腐剂,不会干扰HRP或AP标记二抗的检测。同时本产品不含生物素,不会干扰基于生物素的检测。
本封闭液使用灵活。本产品配制在含有适当浓度Tween-20的PBS中,可以直接用于相关实验,但也可以根据实验需要自行添加Tween-20或Triton X-100 至终浓度为0.05%-0.1%后用于封闭、一抗或二抗的稀释。
本产品与BSA及国外同类产品的封闭效果对比参见下图。在相同样品和实验条件下,仅封闭液及封闭时间存在如下图所示的差异时,我公司的本封闭液封闭后的整体背景明显低于BSA封闭后的背景,而且目的条带亮度明显高于国外同类品牌产品。

每组实验从左到右依次为:5μl蛋白Marker,2.5μg蛋白量的HeLa细胞裂解液,5μg蛋白量的HeLa细胞裂解液。请注意对于抗体A,本封闭液比BSA和国外同类产品具有更低 的背景,并且和国外同类产品相比信号明显更强。对于抗体B,本封闭液比BSA具有更低的背景,和国外同类产品相比信号明显更强。实际实验结果会因样品、抗体、实验条件等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
注意事项:
1. 本产品推荐仅使用一次,重复使用可能会导致封闭效果下降。但对于一些信噪比很高的一抗,例如一些内参抗体,本封闭液可以重复使用2-3次。回收的封闭液请勿与未使用 过的封闭液混合。
2. 通常本产品用于PVDF膜及NC膜时的封闭时间为5-15分钟。对于一些背景非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为30-60分钟。此外,如有特殊需要,也 完全可以4℃封闭过夜。
3. 由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的,因此对于一些特殊的实验,可能需要根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。
4. 取放PVDF膜和NC膜应使用平头镊子,并仅轻轻夹取其边角,操作过程须避免膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。
5. PVDF膜一经浸润和活化,需一直保持湿润,根据Western进行到的具体步骤可放置于western转膜液或洗涤液等适当溶液中,否则可能会产生难以封闭的异常背景。
储存条件:4℃,有效期一年。
除封闭液(用PBS配置,含吐温20)促销外,我公司正在打折促销以下产品:
·SP1凝胶迁移突变探针(10μM)
编号:YT252
英文名称:SP1 Mutation Probe For EMSA(10μM)
规格:30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的SP1 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-SP1的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时,可以进行约30个冷竞争反应。
SP1 consensus oligo的序列如下:
5"-ATT CGA TCG GGG CGG GGC GAG C-3"
3"-TAA GCT AGC CCC GCC CCG CTC G-5"
EMSA突变探针-SP1中SP1的公认的结合位点发生了突变,从而使SP1无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和SP1的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和SP1的结合的条带不会被抑制。参考下图。

一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
封闭液(用PBS配置,含吐温20)促销关键词:用PBS配置,含吐温20,Blocking Buffer(PBS),封闭液,封闭液(用PBS配置,含吐温20),YT872
·EMSA上样缓冲液(Gel-Shift上样缓冲液)(蓝色,10X)
编号:YT188
英文名称:EMSA/Gel-Shift Loading Buffer
规格:200次
本品含有*酚蓝,有时可能会干扰目的转录因子和特定的双链寡核苷酸的结合反应。如有干扰,可以选择不含*酚蓝的EMSA/Gel-Shift上样缓冲液(无色,10X)。每个包装的EMSA/Gel-Shift上样缓冲液(蓝色,10X)足够进行200个EMSA上样。
通过EMSA,也称gel-shift,可以研究目的蛋白和特定的DNA序列的结合情况,从而可以研究细胞内一些转录因子的激活水平。EMSA/Gel-Shift上样缓冲液(蓝色,10X)可以用于EMSA研究时细胞核蛋白或纯化的转录因子和特定的双链寡核苷酸的结合反应后的上样。
储存条件:-20℃,有效期一年。
·OCT-1凝胶迁移探针(10μM)
编号:YT234
英文名称:OCT-1 Probe For EMSA(10μM)
规格:30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的OCT-1 consensus oligonucleotide。这个双链寡核苷酸含有公认的OCT-1结合位点,可以用作EMSA研究时的探针。一个包装的探针可以进行约90个同位素标记探针的反应,每次标记的探针可以测定约100个样品;或约可以进行60个生物素标记探针反应。如果作为未标记的探针用于同位素标记探针的冷竞争,可以进行90-180个冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时,可以进行约30个冷竞争反应。
OCT-1 consensus oligo的序列如下:
5"-TGT CGA ATG CAA ATC ACT AGA A-3"
3"-ACA GCT TAC GTT TAG TGA TCT T-5"
本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记,也可以用于生物素标记。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
封闭液(用PBS配置,含吐温20)促销关键词:用PBS配置,含吐温20,Blocking Buffer(PBS),封闭液,封闭液(用PBS配置,含吐温20),YT872
·天冬*酸激酶
编号:YT573
英文名称:Aspartate Kinase (Crude Enzyme)
规格:100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的天冬*酸激酶,并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液,用于催化天冬*酸的磷酸化。
CAS:9012-50-4
外观:半透明黄色溶液
酶促反应:ATP + L-aspartate = ADP + 4-phospho-L-aspartate
储存条件:-20℃,有效期1个月。
注意事项:
1. 由于本产品需新鲜制备,在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活,所以收到酶液后请根据需要进行分装,并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长,酶活力会有一定程度的下降,收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生,融化后混匀即可,不影响正常使用。
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