北京现货磷酸化Bcl-2(Ser70位点)抗体优惠价

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京现货磷酸化Bcl-2(Ser70位点)抗体优惠价在内的一系列抗体抗原产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京现货磷酸化Bcl-2(Ser70位点)抗体优惠价
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：anti-Phospho-Bcl-2(Ser70) antibody
规格：>20次
本抗体是用人工合成的经过修饰的含磷酸化Ser70的一段人Bcl-2多肽作为抗原制备而成的抗Phospho-Bcl-2(Ser70)兔单克隆抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

本Phospho-Bcl-2(Ser70)抗体识别Ser70位点磷酸化的Bcl-2，不识别非磷酸化的Bcl-2或其它Bcl-2家族蛋白。

Bcl-2是一种抗凋亡蛋白，定位在线粒体内膜，可以通过抑制细胞色素c释放(cytochrome c release)，来抑制细胞凋亡。Bcl-2被推测可以影响线粒体的*离子稳态(calcium homeostasis)和质子流(proton flux)。通常Bcl-2蛋白水平的上调被认为细胞的抗凋亡能力上调，而Bcl-2蛋白水平的显著下降则可能导致细胞凋亡。已发现Bcl-2有多个磷酸化位点，包括Thr56,Ser70,Thr74和Ser87。这些磷酸化位点很可能是ASK1/MKK7/JNK1信号通路的作用靶点，Bcl-2的磷酸化是有丝分裂的一个重要标志。在肾上腺糖皮质激素诱导的T淋巴细胞凋亡过程中，Bcl-2的Thr56或Ser87位点的突变，可抑制其抗凋亡活性。白细胞介素3(Interleukin 3)和JNK诱导的Bcl-2 Ser70的磷酸化可增强Bcl-2的抗凋亡活性，即Bcl-2蛋白Ser70位点磷酸化表明其抗凋亡活性增强。

组份：
Phospho-Bcl-2(Ser70)抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

交叉反应性：人
宿主：兔
免疫原：人工合成的经过修饰的含磷酸化Ser70的一段人Bcl-2多肽
同种型：IgG
Bcl-2分子量：～28kD
克隆性：单克隆抗体
应用：WB,IF,FCM
推荐稀释比例：WB（1:1000）, IF（1:50）, FCM（1:50）

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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·Klenow片段(无外切酶活性)
编号：YT510
英文名称：Klenow Fragment，Exo-
规格：100U
本酶是没有外切酶活性的Klenow片段，是大肠杆菌聚合酶I(E.coli.DNA polymerase I)的大片段(Large Fragment)缺失了外切酶活性的突变体。Klenow Fragment，Exo-保留了DNA聚合酶I的5"→3"聚合酶活性，但缺少完整的Klenow酶的5"→3"和3"→5"外切酶活性。

特点：由于Klenow Fragment，Exo-没有外切酶活性，其在末端补平时经常会在3"末端额外加上1个或多个核苷酸，因此不能用于产生平末端而用于后续的连接。
用途：5"突出末端的标记；随机引物法进行DNA标记；Sanger双脱氧法进行DNA测序等。
来源：由大肠杆菌表达，表达基因的来源为突变的 polA 基因片段。
分子量：约68kDa(单体)。
活性定义：37℃30分钟内，催化10nmol脱氧核糖核苷酸(dNTPs)摻入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。
酶活性检测条件：67mM potassiu*(代"m") phosphate(pH7.4)，6.7mM MgCl2，1mM 2-mercaptoethanol，0.033mM dATP，0.033mM dTTP，0.4MBq/ml[3H]-dTTP，62.5μg/ml poly(dA-dT)·poly(dA-dT)。
纯度：不含DNA内切酶，不含RNase。
酶储存溶液：25mM Tris-HCl(pH7.5)，0.1mM EDTA，1mM DTT，50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X)：500mM Tris-HCl(pH8.0 at 25℃)，50mM MgCl2， 10mM DTT。
失活或抑制：75℃加热10分钟或加入适量EDTA均可导致Klenow Fragment，Exo-失活。金属离子螯合剂，无机焦磷酸盐(PPi)，大剂量的无机磷酸盐(Pi)均对Klenow Fragment，Exo-有抑制作用。
储存条件：-20℃。

使用说明：

1. 随机引物法进行DNA标记：
a. 参考如下表格设置反应体系：
DNA———————————————————————————————10µl(100ng)
Reaction Buffer (10X)——————————————————————5µl
125µM random decamer or hexamer primer——————————————10µl
补充无核酸酶的去离子水——————————————————————至40μl
混匀后沸水浴孵育5-10分钟，立即置于冰浴冷却。进行后续步骤前离心沉淀液
3 dNTP Mixture (0.25mM each , without the labeled—————————4μl
[α-32P]-dNTP, ~110 TBq/mmol (3000Ci/mmol)————————————1.85MBq (50μCi)
Klenow Fragment，Exo-———————————————————————1µl (5U)
补充无核酸酶的去离子水———————————————————————至50µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 对于random decamer primer，37℃孵育5分钟；对于random hexamer primer，37℃孵育10分钟。
d. 加入4μl 0.25mM dNTP，混匀后37℃孵育5分钟。
e. 加入1μl 0.5M EDTA，pH8.0终止反应。
f. 取1μl上述液体用于检测标记的效率。
g. 用Sephadex G-50或Bio-Gel P-60或其它适当试剂盒纯化标记好的探针。

2. 双链DNA 5’突出(5’ overhang)末端的标记：
a. 参考如下表格设置反应体系：
Digested DNA ——————————————————————————10~15µl(0.1~4μg)
Reaction Buffer (10X)——————————————————————2µl
[α-32P]-dNTP, ~15-30 TBq/mmol(400-800Ci/mmol) —————————0.74 MBq(20μCi)
或 [α-32P]-dNTP, ~110 TBq/mmol(3000Ci/mmol)———————————2.96 MBq(80μCi)
3 dNTP Mixture (2.5mM each , without the labeled）————————2μl
Klenow Fragment，Exo-———————————————————————0.2μl (1U)
补充无核酸酶的去离子水———————————————————————至20µl
b. 按上述体系配好之后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 30℃孵育15分钟。
d. 75℃孵育10分钟终止反应。

3. 其他用途可以参考上述用途或适当的文献资料进行。


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·基因组DNA小量提取试剂盒(适用于动物组织/细菌/昆虫)
编号：YT013
英文名称：Genomic DNA Mini Preparation Kit with Spin Column
规格：50次
本试剂盒是非常先进的基因组DNA抽提试剂盒。可以抽提动物组织、鼠尾、培养细胞、细菌、酵母、动物血液、昆虫以及固定组织的包括基因组DNA在内的总DNA。一个试剂盒通过说明书中提供的不同操作方法，可以抽提除植物样品外的几乎所有样品中的总DNA。

样品首先被蛋白酶K消化，随后加入适合DNA结合到纯化柱上的缓冲液，然后加入到纯化柱内。通过高速离心，使DNA在穿过纯化柱的瞬间，结合到纯化柱上，随后通过两次洗涤去除各种杂质，最后通过洗脱液把DNA洗脱下来。整个过程无需酚*仿抽提，无需酒精沉淀，样品裂解后仅需约15分钟即可完成。

通过本试剂盒纯化得到的基因组DNA的长度最长可达50kb左右，平均为30kb左右，最短为100bp的DNA也可以被纯化。如需获得更长的基因组DNA，对于哺乳动物样品，包括组织或细胞等，可以使用百奥莱博的(YT012)哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒。通过本试剂盒获得的总DNA，OD260/OD280的范围通常在1.7至1.9之间。

本试剂盒可以抽提少至数百个细胞，多至25mg组织、0.5-1cm鼠尾、500万个培养细胞、20亿个细菌或5000万个酵母。样品用量过多，反而会影响抽提效果。如果待抽提样品的DNA含量小于5ng，建议加入适当量的carrier DNA，例如poly-dT或其它对后续实验没有干扰的DNA，也可以加入适当量的carrier RNA，例如yeast RNA等，以改善抽提效果。

本试剂盒的标准操作步骤抽提得到的总DNA会含有少量RNA，但如果按照可选步骤加入RNase A，就可以获得不含RNA的高纯度总DNA。含有RNA的总DNA可以用于PCR，但对于某些其它的后续反应可能会产生一些影响。

纯化柱对于DNA的最大容量约为30微克。通常每200万Hela细胞或500万淋巴细胞可以抽提得到15-25微克总DNA，每25mg肝、脑、肾组织可以抽提得到10-30微克总DNA，每25毫克心、肺组织可以抽提得到5-10微克总DNA，每10mg脾组织可以抽提得到5-30微克总DNA，每1.2cm小鼠尾尖或0.3cm大鼠尾尖可以获得10-25微克总DNA。本试剂盒可以抽提50个样品的总DNA。

产品组份：
样品裂解液A——————10ml
样品裂解液B——————11ml
洗涤液I————————21ml (第一次使用前加入7ml无水乙醇)
洗涤液II———————16ml (第一次使用前加入24ml无水乙醇)
洗脱液————————22ml
蛋白酶K————————1.1ml
DNA纯化柱及废液收集管————50套

储存条件：室温，有效期一年。(蛋白酶K需-20℃保存)

注意事项：
1.抽提细菌、酵母样品时还需要一些特定的试剂，详情请参考相关实验步骤。
2.如需制备不含RNA的高纯度总DNA，需自备RNase A。
3.温度较低时样品裂解液A或样品裂解液B中可能会有沉淀产生，属正常现象。使用前必须检查一遍。如有沉淀，55℃水浴孵育使沉淀溶解，混匀后使用。
4.第一次使用前洗涤液I需添加7ml无水乙醇，洗涤液II需添加24ml无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。
5.本试剂盒需使用55℃水浴，请提前作好准备。
6.除特别说明外，每次Vortex应控制在5-10秒左右。
7.本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
8.废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。
9.参考使用说明，从某些样品中抽提总DNA不需要使用样品裂解液A。


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·生物素标记STAT3凝胶迁移探针(0.2μM)
编号：YT255
英文名称：Biotin-labeled STAT3 Probe For EMSA
规格：200μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的并经生物素(Biotin)标记的STAT3 consensus oligonucleotide。这个生物素标记的双链寡核苷酸含有公认的STAT3结合位点，可以用作EMSA研究时的探针。一个包装的生物素标记探针可以进行约200-400个样品的EMSA检测。

STAT3 consensus oligo的序列如下：
5"-GAT CCT TCT GGG AAT TCC TAG ATC-3"
3"-CTA GGA AGA CCC TTA AGG ATC TAG-5"

本生物素标记EMSA探针已经过纯化，可以直接用于EMSA结合反应。本生物素标记EMSA探针可以和百奥莱博的化学发光法EMSA试剂盒(YT190)配套使用。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于基于生物素标记的EMSA检测的详细操作可以参考百奥莱博的化学发光法EMSA试剂盒(YT190)的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

·Caspase 3抑制剂(Ac-DEVD-CHO)
编号：YT146
英文名称：Caspase 3 Inhibitor Ac-DEVD-CHO
规格：10mM×0.1ml|5mg
本品是一种非常强的Caspase 3抑制剂，可以抑制由Caspase3激活导致的细胞凋亡。也可以抑制Caspase 7。本品是一种可逆的Caspase 3抑制剂，也是最常用的细胞凋亡抑制剂之一，常用于观察特定的细胞凋亡是否通过Caspase 3激活来介导。可以用于抑制培养细胞内的Caspase 3，也可用于抑制体外纯化或粗抽提的Caspase 3。在体外对Casapse 3的IC50＝200pM。本品10mM包装产品配制在DMSO中，可以直接使用。5mg包装为粉末装。

分子式：C20H30N4O1
分子量：502.5
纯度：＞95%。

注意事项：

1. 如果每次使用量少，使用次数较多，请适当分装。反复冻融会影响本抑制剂的使用效果。
2. 如果希望适当稀释后再分装保存，请使用DMSO进行稀释。
3. 本Caspase 3抑制剂Ac-DEVD-CHO在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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