北京现货总SOD活性检测试剂盒(WST-8法)哪里卖

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名称：北京现货总SOD活性检测试剂盒(WST-8法)哪里卖
英文名：Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-8
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：YT309
本试剂盒是一种基于WST-8的显色反应，通过比色来检测细胞、组织或其它样品中SOD即超氧化物歧化酶活性的试剂盒。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。

试剂盒组分：
SOD检测缓冲液——————70ml
WST-8——————————800μl
酶溶液——————————100μl
反应启动液(40X)——————60μl

超氧化物岐化酶能催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成过氧化*(H2O2)和氧气(O2)，是生物体内一种重要的抗氧化酶。

目前有多种SOD活性测定法，其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用。但NBT法产生的甲臜染料水溶性差，易和被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用，抑制百分率达不到100%等，从而使检测的灵敏度和精确度受到影响；细胞色素C法也是一种常用来检测SOD活性的方法，但细胞色素C其氧化活性高，易受样品中的还原剂干扰，另外该方法需要连续测定吸光度值，对于SOD的检测灵敏度比较低，并且不太适合大批量样本的检测。

目前测定SOD比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法，其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性更好、灵敏度更高的的WST-8法。WST-8法的原理参考下图，WST-8可以和黄嘌呤氧化酶催化产生的超氧化物阴离子反应产生水溶性的甲臜染料(formazan dye)，该反应步骤可以被SOD所抑制。通过对WST-8产物的比色分析即可计算SOD的酶活力。


基于黄嘌呤氧化酶藕联反应体系和WST-8的SOD酶活力检测原理图。XO：xanthine oxidase。

WST-8的反应产物是稳定的水溶性产物，可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力，适合高通量筛选研究。同时WST-8法测定SOD酶活力时，最大抑制百分率可以接近100%，并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰，使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。

本试剂盒的检测不受样品中过氧化*的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化*，会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化*酶等特殊方法，能有效去除常规样品中过氧化*的干扰。例如，对于SOD标准品的检测，标准品中添加高达0.1mM的过氧化*时，对于检测结果仍无显著影响。

注意事项：
1. 待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
2. 细胞或组织等样品制备时不能采用含有Triton X-100等去垢剂的溶液，否则会干扰本试剂盒的检测。
3. 抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色，如果设置了使用说明中的空白对照3，就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。

储存条件：-20℃，有效期6个月。

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·小鼠抗Sequestosome-1抗体
编号：YT757
英文名称：Sequestosome-1 Mouse Monoclonal Antibody
规格：50μl
本品为来源于小鼠的抗Sequestosome-1的单克隆抗体。
宿主：小鼠
克隆性：单克隆抗体
用途：WB,FC, IHC,ICC, IF
交叉反应性：人，小鼠，大鼠
分子量：62KDa
推荐稀释比例：WB(1:500-1:1000),IF(1:200),IHC(1:200),ICC(1:200),FC(1:50-1:100)

About this Antibody
Name	Sequestosome-1 Mouse Monoclonal Antibody
Category	Monoclonal antibody(mAb); Primary antibody
Isotype	IgG1
Purification	ProA affinity purified
About the Immunogen
Immunogen	This antibody is produced by immunizing mice with a synthetic peptide (KLH-coupled) corresponding to SQSTM1.
Gene ID	8878
SwissProt	Q13501
Synonyms	OSIL antibody; Oxidative stress induced like antibody p60 antibody p62 antibody p62B antibody Paget disease of bone 3 antibody PDB 3 antibody PDB3 antibody
Category	Autophagy
Background	Sequestosome 1 (SQSTM1, p62) is a ubiquitin binding protein involved in cell signaling, oxidative stress and autophagy. It was first identified as a protein that binds to the SH2 domain of p56Lck and independently found to interact with PKCζ. SQSTM1 was subsequently found to interact with ubiquitin, providing a scaffold for several signaling proteins and triggering degradation of proteins through the proteasome or lysosome. Interaction between SQSTM1 and TRAF6 leads to the K63-linked polyubiquitination of TRAF6 and subsequent activation of the NF-κB pathway. It may play a role in titin/TTN downstream signaling in muscle cells and regulate signaling cascades through ubiquitination. P62 may be involved in cell differentiation, apoptosis, immune response and regulation of K+ channels.

注意事项：
1. 如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验，请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，请4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10,000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果，请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)
编号：YT512
英文名称：Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
规格：500U
本酶是一种模板依赖的DNA聚合酶，可以催化在寡核苷酸、单链或双链DNA的3"羟基端加上dNTP。可以催化的寡核苷酸的最短长度为3个核苷酸。

用途：寡核苷酸或DNA 3"羟基末端标记；DNA末端加尾(DNA tailing)；5"-RACE；合成同一种脱氧核苷酸的寡聚链等。
来源：由大肠杆菌表达，表达基因的来源为小牛胸腺。
活性定义：37℃60分钟内，催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3"羟基末端中所需的酶量定义为1个活性单位。
酶活性检测条件：200mM potassiu*(代"m") cacodylate(pH7.2),1mM CoCl2,0.1mM DTT,0.01%(v/v)Triton X-100,10μM oligo(dT)10,1mM dTTP and 0.4MBq/ml[3H]-dTTP。
纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNase。
酶储存溶液：100mM KAc(pH6.8),2mM 2-mercaptoethanol,0.01%(v/v)Triton X-100 and 50%(v/v)glycerol 。
Reaction Buffer(5X)：0.125M Tris(pH7.2 at 25℃),1M potassiu*(代"m") cacodylate,0.05%(v/v)Triton X-100,5mM CoCl2。
失活或抑制：70℃加热10分钟或加入适量EDTA均可导致Terminal Deoxynucleotidyl Transferase失活。金属离子螯合剂，较高浓度的铵根离子、*离子、碘离子和磷酸根均对Terminal Deoxynucleotidyl Transferase有抑制作用。
储存条件：-20℃。

使用说明：

1. DNA 3’末端标记：
a. 参考如下表格设置反应体系：
待标记DNA————————————————————10 pmol of 3"-termini
Reaction Buffer (5X) ——————————————10µl
[α-32P]-ddATP, ~10TBq/mmol (3000Ci/mmol)————1.85 MBq (50µCi)
TdT (20U/µl) ——————————————————2µl
补充无核酸酶的去离子水 —————————————至50µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育15分钟。
d. 70℃孵育15分钟或加入5µl 0.5M EDTA终止反应。
说明：标记的效率和3’羟基末端的类型有关，3’突出末端的标记效率要显著高于3’缩进末端或平末端的标记效率。

2. DNA末端加尾(DNA Tailing)：
a. 参考下表格设置反应体系：
DNA片段 ————————————————————1 pmol of 3"-termini
Reaction Buffer (5X)——————————————4µl
dATP or dTTP——————————————————130pmol
或 dGTP or dCTP (四种中通常只需加入一种)————60pmol
TdT (20U/µl)——————————————————1.5µl
补充无核酸酶的去离子水—————————————至20µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育15分钟。
d. 70℃孵育15分钟或加入5µl 0.5M EDTA终止反应。
说明：在上述反应条件下，每个3’羟基末端可以加上100-130个dA或dT，或20-30个dC或dG。

3. 其他用途可以参考上述用途或适当的文献资料进行。


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BTN131022 碱性磷酸酶标记链霉亲和素 Streptavidin,AP Conjugated

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