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- LMAI Bio
- 美国/中国
- LM355Hu01
- 2025年07月08日
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- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
避免反复冻融。2-8°C不超过一个月，-80°C不超过12个月
- 保质期：
1年
- 英文名：
Recombinant Thyroglobulin (TG)
- 库存：
30
- 供应商：
联迈生物
- 规格：
10µg/50µg/200µg/1mg/1g
| 来源 | 原核表达 |
| 宿主 | E.coli |
| 内毒素水平 | <1.0EU/µg(LAL法测定) |
| 亚细胞定位 | n/a |
| 片段与标签 | N-terminal His Tag |
| 缓冲液成份 | 磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.） |
| 性状 | 冻干粉 |
原理：
蛋白质的翻译效率很大程度上跟翻译起始效率有关，因此mRNA的5'端必须得很好翻译，最好不要有复杂的二级结构；通过PCR的方法在基因的5‘端引入简并序列，构建克隆，挑选多个克隆，诱导表达之，SDS-PAGE电泳检测表达量的高低，挑选高表达克隆进行测序。
实验步骤：
1.设计目的重组蛋白质的N端10-15个氨基酸的简并序列。
2.引物合成上述简并序列，同时设计合成目的基因反向引物。
3.PCR扩展目的基因，这样在目的基因的5‘端就引入了兼并序列，同时不改变氨基酸序列。
4.双酶切，插入到目标载体。
5.转化。
6.挑选多个克隆（比如100-200个）到1.5ml EP管，直接诱导表达（记得带上为改造克隆菌株的对照）。
7.SDS-PAGE检测。
8.挑选高表达的多个克隆，测序。
重组蛋白的特性
Immune tech的重组蛋白分为冻干粉和溶液态两种保存形式，原核细胞表达的重组蛋白为冻干粉状态，真核细胞表达的重组蛋白为溶液态保存，这样使得重组蛋白非常稳定，在-80℃条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解，其中溶解的方法非常关键，因为溶解不好会降低蛋白的效用。溶液态保存的重组蛋白在冻融稀释使用过程中也需要仔细注意，这些都是用户在实际应用中经常遇到的问题。
（1）原核细胞表达的重组蛋白。Immune tech大肠杆菌表达的冻干重组蛋白，已经从包涵体中提纯，添加了蛋白保护剂，使用过滤后的无菌水作为复溶剂即可，复溶冻干蛋白100 μg，用86 μl的超纯水，轻轻摇晃使蛋白溶解，再用移液枪的枪头轻吹几下即可完全溶解，一定不能使用涡旋仪进行快速振荡或剧烈摇晃。
（2）真核细胞表达的重组蛋白。有活性的蛋白质不仅要转录和翻译，还要进行翻译后的加工，使得蛋白质的空间折叠方式维持正常，所以重组蛋白必须在真核细胞中进行，如哺乳动物细胞能够识别和去除基因中的内含子，对翻译后的蛋白质进行加工，这样表达的蛋白质具有生物活性。我们用溶液态来保存，保持了其良好的活性和稳定性。
（3）重组蛋白的保护剂。在冻干和储存过程中常用的保护剂或稳定剂有糖类，多元醇，聚合物，表面活性剂，某些蛋白和氨基酸等。我们通常加8%（质量比体积）的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖可明显阻止蛋白质二级结构改变以及冻干过程中蛋白质的伸展和聚集，甘露醇也是一种普遍应用的冻干保护剂和填充剂。
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文献和实验抗甲状腺球蛋白抗体检查是临床医学检验人员需要了解的知识，医学教|育网整理供检验人员参考如下： 抗甲状腺球蛋白抗体（ATG）的靶抗原甲状腺球蛋白（TG）是一种由甲状腺上皮细胞合成和分泌的可溶性的碘化糖蛋白，它是T3、T4，即甲状腺素的生物合成前体，主要是以胶体形式贮存于甲状腺滤泡腔中，正常人血清中含量极微（10～40ng/ml）。
腺功能实验室检测指标：功能指标：总T4（TT4），游离T4（FT4） 总T3（TT3），游离T3（FT3） 促甲状腺激素TSH 蛋白和自身免疫指标：甲状腺球蛋白（TG） 甲状腺过氧化物酶抗体（Anti-TPO） 甲状腺球蛋白抗体（Anti-TG） 促甲状腺素受体抗体（Anti-TSHR） 甲状腺自身免疫性抗体的检测自身免疫性甲状腺疾病（AITD）的发病率极高，临床表现有毒性弥漫性甲状腺肿（格雷夫斯病，GD）、格雷夫斯眼病（GO）、桥本甲状腺炎（HT）和特发性黏液水肿。
也可出现阳性，检测TRAb有助于上述疾病的病因学诊断。 【适应症】 1）甲亢的鉴别诊断； 2）Graves眼病的诊断与评估； 3）Graves病孕妇的随访（包括新生儿）； 4）Graves病治疗随访； 5）是否有阻断抗体存在时甲减的评估； （2）针对甲状腺细胞内容物的抗体 包括甲状腺球蛋白抗体（Tg-Ab)和甲状腺过氧化物酶抗体（TPO-Ab)，是由于甲状腺细胞受损，胞浆内的“甲状腺球蛋白”及“过氧化物酶（合成甲状腺激素的关键酶）”溢入血液刺激机体而产生的，是自身免
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