- ￥1980 - 4280
- LMAI Bio
- 美国/中国
- LM050Po01
- 2026年01月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
避免反复冻融。2-8°C不超过一个月，-80°C不超过12个月
- 保质期：
1年
- 英文名：
Recombinant Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1)
- 库存：
30
- 供应商：
联迈生物
- 规格：
10µg/50µg/200µg/1mg/1g
| 来源 | 原核表达 |
| 宿主 | E.coli |
| 内毒素水平 | <1.0EU/µg(LAL法测定) |
| 亚细胞定位 | n/a |
| 片段与标签 | N-terminal His Tag |
| 缓冲液成份 | 磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.） |
| 性状 | 冻干粉 |
原理：
蛋白质的翻译效率很大程度上跟翻译起始效率有关，因此mRNA的5'端必须得很好翻译，最好不要有复杂的二级结构；通过PCR的方法在基因的5‘端引入简并序列，构建克隆，挑选多个克隆，诱导表达之，SDS-PAGE电泳检测表达量的高低，挑选高表达克隆进行测序。
实验步骤：
1.设计目的重组蛋白质的N端10-15个氨基酸的简并序列。
2.引物合成上述简并序列，同时设计合成目的基因反向引物。
3.PCR扩展目的基因，这样在目的基因的5‘端就引入了兼并序列，同时不改变氨基酸序列。
4.双酶切，插入到目标载体。
5.转化。
6.挑选多个克隆（比如100-200个）到1.5ml EP管，直接诱导表达（记得带上为改造克隆菌株的对照）。
7.SDS-PAGE检测。
8.挑选高表达的多个克隆，测序。
重组蛋白的特性
Immune tech的重组蛋白分为冻干粉和溶液态两种保存形式，原核细胞表达的重组蛋白为冻干粉状态，真核细胞表达的重组蛋白为溶液态保存，这样使得重组蛋白非常稳定，在-80℃条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解，其中溶解的方法非常关键，因为溶解不好会降低蛋白的效用。溶液态保存的重组蛋白在冻融稀释使用过程中也需要仔细注意，这些都是用户在实际应用中经常遇到的问题。
（1）原核细胞表达的重组蛋白。Immune tech大肠杆菌表达的冻干重组蛋白，已经从包涵体中提纯，添加了蛋白保护剂，使用过滤后的无菌水作为复溶剂即可，复溶冻干蛋白100 μg，用86 μl的超纯水，轻轻摇晃使蛋白溶解，再用移液枪的枪头轻吹几下即可完全溶解，一定不能使用涡旋仪进行快速振荡或剧烈摇晃。
（2）真核细胞表达的重组蛋白。有活性的蛋白质不仅要转录和翻译，还要进行翻译后的加工，使得蛋白质的空间折叠方式维持正常，所以重组蛋白必须在真核细胞中进行，如哺乳动物细胞能够识别和去除基因中的内含子，对翻译后的蛋白质进行加工，这样表达的蛋白质具有生物活性。我们用溶液态来保存，保持了其良好的活性和稳定性。
（3）重组蛋白的保护剂。在冻干和储存过程中常用的保护剂或稳定剂有糖类，多元醇，聚合物，表面活性剂，某些蛋白和氨基酸等。我们通常加8%（质量比体积）的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖可明显阻止蛋白质二级结构改变以及冻干过程中蛋白质的伸展和聚集，甘露醇也是一种普遍应用的冻干保护剂和填充剂。
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文献和实验的物理性嗅觉干预即可显著抑制同侧嗅球中肿瘤的发生与发展。综上，利用化学遗传学以及物理方法，研究团队充分证明了嗅觉感知可以调控胶质瘤的发生。 利用硅胶塞剥夺小鼠嗅觉可以抑制嗅球中胶质瘤 接下来，研究团队对嗅觉调控胶质瘤发生的分子机制进行了探究。 通过对单侧嗅觉剥夺小鼠的两侧嗅球组织进行转录组测序，筛选出了潜在效应因子- 胰岛素样生长因子 1（IGF1）。 有趣的是，团队之前发表的工作已经证明了前癌细胞表达的 IGF1 受体（IGF1R）对胶质瘤发生发展具有重要作用，支持对 IGF1
症综合征的遗传热点。由于WAPCre系统，这种点突变只在小鼠的乳腺中活跃，通过这种突变，该菌株将在1岁左右自发地发展出与人类相关的乳腺肿瘤。我们经常让这些小鼠模型接触胰岛素样分子。频繁注射两种模型化合物AspB10和胰岛素样生长因子-1（IGF1）后，大鼠乳腺肿瘤的表达明显降低。AspB10，又称X10，是一种早期胰岛素类似物，由于增强了IGF1R结合亲和力，具有很强的启动细胞分裂的潜力。IGF1是IGF1R的天然配体，这种受体在细胞分裂信号中起着重要作用。与常规胰岛素相比，甘精胰岛素在体外实验中
的点突变而得名;一种与人类李弗罗梅尼癌症综合征基因热点相对应的基因。由于WAPCre系统，该位点突变只在小鼠乳腺中活跃，在1岁左右，该菌株会自发地发展为人类相关乳腺肿瘤。我们经常将这些小鼠模型暴露在类胰岛素分子中。频繁注射两种模型化合物AspB10和胰岛素样生长因子-1 (IGF1)后，肿瘤表达明显下降，这两种模型化合物均与大鼠乳腺肿瘤相关。AspB10，也被称为X10，是一种早期的胰岛素类似物，由于增强了IGF1R的结合亲和力，具有启动细胞分裂的强大潜力。IGF1是IGF1R的天然配体，该受体在细胞
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