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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
MFC
- 库存:
99
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 肿瘤类型:
胃癌
- 细胞类型:
肿瘤细胞
- 品系:
鼠源肿瘤细胞品系
- 组织来源:
胃
- 相关疾病:
胃癌
- 物种来源:
小鼠
- 免疫类型:
详情查看说明
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 器官来源:
小鼠
- 运输方式:
干冰运输及发送复苏存活细胞
- 年限:
永久
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
T25/株
MFC细胞(小鼠胃癌细胞)
| 一、细胞基本属性 | |
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细胞名称 |
MFC细胞(小鼠胃癌细胞) |
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细胞别称 |
MFC;小鼠前胃癌细胞 |
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商品货号 |
LM8C0156 |
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种属来源 |
小鼠 |
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年龄性别 |
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组织来源 |
胃 |
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生长特性 |
贴壁生长 |
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细胞形态 |
上皮细胞样 |
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背景简介 |
MFC细胞是由钱书森、高进等于1985年建立;利用源自615小鼠前胃鳞癌移植瘤FC瘤组织,小块法培养得到,已传132代;MFC细胞细胞在615小鼠皮下移植100%成功。 |
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生物安全等级 |
1 |
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细胞规格 |
1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装 |
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支原体检测 |
无 |
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基因表达情况 |
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保藏机构 |
中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心 |
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培养基 |
DMEM+10%FBS+PS |
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培养条件 |
气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
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冻存条件 |
无血清冻存液,液氮储存 |
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倍增时间 |
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STR鉴定位点 |
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二、细胞培养操作
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明書为主。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,弃去消化液,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c、按6-8 mL/瓶补加培养基,轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明書,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明書细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
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