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长期
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RNase-Free Tris-HCl Solution
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813
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH8.0)(不含RNase)哪里买,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH8.0)(不含RNase)哪里买
编号:BTN170103
规格:250mL
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:RNase-Free Tris-HCl Solution
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生物化工学科起始于第二次世界大战时期,以抗生素的深层发酵和大规模生产技术的研究为标志。20世纪60年代末至80年代中期,转基因技术、生物催化与转比技术、动植物细胞培养技术、新型生物反应器和新型生物分离技术等开发和研究的成功,使本学科进入了新的发展时期,学科体系逐步完善。20世纪后期,随着以基因工程为代表的高新技术的迅速崛起,为本学科的进一步发展开辟了新领域,无数前人的工作和我公司的不懈奋斗。造就了高品质的Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH8.0)(不含RNase)。
·大肠杆菌Rosetta(DE3)化学感受态细胞
编号:BTN121004
英文名称:E.coli Rosetta(DE3) Chemical Competent Cell
规格:0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测本产品,转化效率可达107。本感受态细胞适用于真核蛋白表达,具有*霉素抗性。
菌株基因型:F-ompT hsdSB(rB- mB-)gal dcm lacY1(DE3)pRARE(argU,argW,ileX,glyT,leuW,proL)(CmR)
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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文献和实验【求助】着急,不知道10mmol/L的Tris-HCl(pH8.0)如何配制?
ilovelc999 很着急,不知道10mmol/L的Tris-HCl(pH8.0)如何配制?有哪位知道吗?麻烦告诉我一下好吗。 mybbff 先配成10mM的,水先不要加足,调节pH到8.0后再定容到预定体积。 ilovelc999 恩,知道啦,多谢版主! wangbingying66 1.称取1.211g Tris 2.加800ml去离子
刚涉及RNA抽提的新手都会听到别人说RNase很顽固,用高压灭菌都无法去除其活性。于是在配制tris缓冲液时就遇到了两难的境地。tris缓冲液不能用DEPC处理,只能用DEPC处理
的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层 4、加固体Tris约1g/100ml酚,摇匀,去水相 5、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)平衡数次,至PH为8.0 6、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)于棕色瓶中4度保存 7、如黄色消失或呈粉红色,则不能使用
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