1M Tris-HCl(pH9.0)(DNA级)供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应1M Tris-HCl(pH9.0)(DNA级)供应，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：1M Tris-HCl(pH9.0)(DNA级)供应
产地：国产|进口
规格：250mL
编号：BTN101208
品牌：百奥莱博

关于1M Tris-HCl(pH9.0)(DNA级)供应的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·植物RNA提取试剂盒(无酚无*仿柱式提取)
编号：BTN160906
英文名称：Plant RNA Column extraction kit(No phenol and no chloroform)
规格：50次
本试剂盒是在柱式植物RNA提取试剂盒(BTN71203)的基础上经过配方和流程优化得到的无*仿升级产品，它结合了植物RNA提取试剂盒的高效性、快捷性以及无*仿处理的安全性。

试剂盒特点：
1. 免酚和*仿处理，操作安全可靠。
2. 简单快速，处理一个样品只需要约十分钟。
3. RNA 纯度更高，平均 OD260/280一般都在2.0左右，能够有效去除大多数植物中的多糖污染。
4. 目前已测试过上百种植物。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
6. 性价比高于进口的柱式植物RNA提取产品。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA 洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
1. 估算组织细胞的用量。每次微量提取一般需要100-200mg植物叶片、或50-100mg植物种子、或200-500mg植物果实。
2. 先将新鲜植物组织剪切成小块(保存在RNAhold中的植物组织需用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块)，放入10-15mL塑料离心管中，加入1mL溶液A，然后用匀浆器匀浆5-20秒。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎植物组织，砚磨完后加入1mL溶液A。注意：溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将匀浆物或砚磨物转移至干净的1.5mL塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。有的植物组织(比如果实)含有大量水份，匀浆液会多于1mL，转移时也只取1mL。
4.室温12000～15000g离心3～5分钟，管底沉淀为细胞破碎物。
5. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中。
6. 加入等体积的溶液B，充分颠倒混匀。如果有沉淀产生(对某些植物，属于正常现象)，千万不要去掉沉淀，一定要把所有的混合物上柱。
7. 将一半的溶液(如果有沉淀，则先混匀)转移到离心吸附柱中，13000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
8. 将剩下的一半溶液(如果有沉淀，则先混匀)转移到同一离心吸附柱中，13000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
9. 加0.7mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。再加0.3mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。一般样品如此洗涤两次即可，但如果在第7 步加入溶液B后有沉淀产生，则需要洗三次，每次加入的通用洗涤液的量分别为0.4、0.3和0.3mL。
10.室温离心半分钟。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
11. 将离心吸附柱转移到RNase-free 收集管中，加入50-100μL RNA 洗脱液，室温放置1-2分钟。
12. 13000-15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
14. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
15. RNA 纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。


1M Tris-HCl(pH9.0)(DNA级)供应关键词：pH9.0,DNA级,1M Tris-HCl(pH9.0)(DNA级),百奥莱博,BTN101208
  我公司始终坚持“创新，品质，服务，节约，敬业，感恩”的理念。吸收新创意，严把质量关口，全方位的服务跟踪，坚持做出高品质产品。本着“追求、员工、技术、精神、利益”的宗旨。现拥有一批精干的管理人员和一支高素质的专业技术队伍。我们以质量为生命、时间为信誉、价格为竞争力的经营信念，立足于国内外市场。目前已在全国各大院系，和研究单位均有销*(代"售")，也得到了客户的认可。百奥莱博生产的1M Tris-HCl(pH9.0)(DNA级)等试剂进入飞速发展期，为了更好的服务客户，公司长期储备海量库存，以此助推中国科技的快速发展，更好的造福人类！



·1M DTT溶液(RNase-Free)
编号：BTN60405
规格：10mL

·一站式生物素检测TUNEL试剂盒(DAB法)
编号：BTN81026
英文名称：One-Stop Biotin-Based TUNEL Kit
规格：10次
TUNEL就是末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口及末端标记(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)，它是一种高灵、敏度、快速检测细胞凋亡的方法。其原理是在发生凋亡细胞中会有大量的具有切口的DNA片段、或具有游离3´-OH端、长度是180-200bp倍数的DNA片段，TdT(末端脱氧核苷酸转移酶)可以以不依赖模板的方式进行标记，如参入荧光素、生物素或地高*(代"辛")等标记的dUTP，而正常细胞DNA几乎没有游离的3´-OH和切口，所以通过对标记物的显色反应和荧光显微镜或流式细胞仪检测就可以区分正常和凋亡的细胞。

试剂盒特点：
1．一站式，不需要额外准备专用的试剂(但客户还是需要自备常规的试剂，如水、PBS和细胞涂片所需试剂)。
2．高灵敏度，可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，适合检测早期的细胞凋亡。
3．特异性高，只标记凋亡细胞，而不标记坏死细胞。
4．快速，整个操作过程仅需1-2个小时即可完成。
5．方便，一步染色反应，洗涤后即可观察，不必使用二抗等进行多步操作。
6．适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)，本试剂盒足够处理十张切片使用。

试剂盒组成：

成分	规格
1×TdT Buffer	0.5ml
TdT酶(20U/μL)	10μl
蛋白酶K溶液(200μg/mL)	1ml
Streptavidin-HRP	50μl
DAB干粉	1mg
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、样本预处理(操作步骤仅供参考，本试剂盒不提供相关试剂)
下面所用的固定液、淬灭液和通透液均需要新鲜配制。固定液是溶于pH7.4的PBS中的、浓度为4%的多聚甲醛溶液；淬灭液是用甲醇将H2O2原液(30%)稀释到3%而得；通透液是溶于0.1%柠檬酸*中的、浓度为0.1%的Triton X-100溶液。

对贴壁细胞或细胞涂片
1．将自然晾干的贴壁细胞或细胞涂片浸入固定液中室温固定30-60分钟。为改善细胞的渗透性，可将固定好的样本放在70%乙醇中-20℃放置过夜。为防止样本脱落，可使用硅烷处理的载玻片或采用多聚赖*酸铺片。
2．用自备的PBS漂洗2次，每次5分钟。
3．浸入淬灭液中室温放置10分钟后，用PBS漂洗2次，每次5分钟。
4．浸入通透液中，冰上放置2分钟后，用PBS漂洗 2次，每次5分钟。用吸水纸吸干样本周围水分，待用。
对石蜡组织切片
1．将切片置于染缸中，用二甲*脱蜡2次，每次5分钟；再分别用100%、95%、90%、80%、70%的乙醇和PBS各洗一次，每次3分钟。
2．在每张切片上滴加100μl蛋白酶K工作液(10μl蛋白酶K溶液+90μlPBS缓冲液)并在室温放置15-30分钟以降解交联的蛋白和其他内源蛋白。注意：蛋白酶K工作液的用量和处理时间一般都需根据样品的不同而单独进行优化，此处的用量只供参考。蛋白酶K处理后不需要再淬灭内源蛋白酶。
3．用PBS漂洗4次，每次3分钟。此步不能省略，否则残留的蛋白酶K将会降解后面降压加入的TdT。用吸水纸吸干样本周围水分，待用。
对冰冻切片
1．将切片在固定液中室温固定20-60分钟，PBS洗涤2次，每次10分钟。
2．浸入淬灭液中室温放置10分钟后，用PBS漂洗两次，每次5分钟。
3．浸入通透液中冰上放置2分钟后，用PBS漂洗两次，每次5分钟。用吸水纸吸干样本周围水分，待用。
阳性对照样本
所有处理步骤跟样品一样，只是在最后还需在样品上滴加100μL自备的DNase I反应液室温放置10-30分钟。反应液含40mM Tris-HCl pH7.9，10mM NaCl，6mM MgCl2，10mM CaCl2和不同浓度的DNaseI(冷冻切片需3U/mL、石蜡切片需1500 U/mL、一般样本需10U/mL)。用PBS洗两次，每次5分钟。用吸水纸吸干周围水分后待用。

二、标记和显色反应
1．配制所需量的TdT酶反应液：将1μl TdT酶加入到 50μl 1×TdTBuffer中即可。TdT酶反应液需即用即配，不宜保存，否则酶会失活。
2．在除阴性对照外的每个样本上滴加50μl TdT酶反应液，加盖玻片后37℃避光放置60分钟。注意：加盖玻片可使反应液均匀分布，并避免其挥发。阴性对照只滴加50μl不含TdT酶的反应液。
3．用自备的PBS清洗3次，每次 5分钟，用吸水纸吸干样本周围残留液体。
4．将5μl Streptavidin-HRP溶液加入45μl PBS中，混匀后全部加在切片上并加盖玻片，37℃避光放置30分钟。
5．用自备的PBS清洗4次，每次5分钟，用吸水纸吸干样本周围残留液体。
6．滴加50μl 新鲜配制的DAB工作液(将1mg DAB干粉溶于1mL PBS中，取50μL与1μl 30% H2O2混合即得DAB工作液，剩余的DAB溶液可-20℃避光保存)，室温显色10分钟。
7．PBS漂洗4次，前3次每次1分钟，最后1次5分钟。
8．光学显微镜下观察、拍照。亦可用苏木素或甲基绿复染复染后再观察。


1M Tris-HCl(pH9.0)(DNA级)供应关键词：pH9.0,DNA级,1M Tris-HCl(pH9.0)(DNA级),百奥莱博,BTN101208
  我公司主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销*(代"售")。并代理销*(代"售")R&D、Sigma、Amresco 、Gibco、Pharmacia、HyClone、GIBCO等多个国外知名品牌，致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务，满足生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学等生物科技实验需求。 公司主要产品：试剂盒：1M Tris-HCl(pH9.0)(DNA级)、ELISA试剂盒、分子生物学试剂、细胞凋亡试剂盒。各种动物血清：NBQQ、HyClone、GIBCO胎牛血清。抗体：进口原装抗体、进口分装抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、一抗、二抗。 我们立足于生命科学领域，全力打造高品质生物科技产品链和技术服务链，立志成为生命科学研究领域的问题解决专家。


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