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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
Fluorescent Dye Hoechst 33258,Powder
- 库存:
680
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- CAS号:
23491-45-4
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京Hoechst 33258干粉哪里卖,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京Hoechst 33258干粉哪里卖
产地:国产|进口
英文名:Fluorescent Dye Hoechst 33258,Powder
编号:BTN130864
品牌:百奥莱博
Hoechst 33258是一种可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光,其常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。

CAS号:23491-45-4
分子式:C25H24N6O•3HCl
分子量:533.88
产品特点:
1.Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。
2.Hoechst 33258常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也常用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。
3.Hoechst 33258的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nm;其和双链DNA结合后,最大激发波长为352nm,最大发射波长为461nm。
4.Hoechst 33258溶于水,溶解度可达10mg/mL。用于细胞核染色时,推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/mL。
储存条件:低温运输,-20℃干燥避光保存,有效期一年。
使用举例:
1.用PBS或合适的缓冲液制备10~50 µM Hoechst33258染料。
2.将1/10细胞培养基体积的Hoechst染料溶液加入细胞培养物中。
3.在37℃培养细胞10~20分钟。
4.用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
5.用带有350nm激发波长,460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。
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·核酸清除剂
编号:BTN81216
英文名称:Nucleic Acid Scavenger
规格:1.5mL
本产品用于去除蛋白样品中的核酸污染。蛋白双向电泳的关键是制备好的样品,其中包括核酸的清除,因为核酸能与蛋白质结合,影响聚焦。同时,核酸的分子量大,容易堵塞凝胶,造成条带拖尾。此外,如果使用银染的方法检测蛋白质,污染的核酸也会被染色,为此我司开发了本产品。
产品特点:
1. 使用简单,加入样品中简单保温即可。
2. 效率高,10分钟内可以清除核酸(DNA和RNA)对蛋白质电泳的干扰。
3.基于酶学消化,所以会引入DNase和RNase。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在样品中加入0.1倍体积的本产品,轻柔混匀。
2.在冰上保温10-30分钟,使核酸降解成单核苷酸或寡核苷酸。
注意事项:
这两种酶也有可能在双向电泳图谱呈现蛋白斑点。用超离心方法也能除去核酸,但也可能除去大片分子质量的蛋白质,在低离子强度时,带负电的核酸和带正电的蛋白质会形成复合物,所以用高pH和高离子强度的溶液能减少这种反应,单最后还必需去盐。
·ATP溶液(100mM)
编号:BTN120625
英文名称:ATP Solution,100mM
规格:0.25mL
本产品纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于体外RNA转录合成。
ATP分子式为C10H13N5O13P3Na3,分子量是573.1,消光系数为15.4×103 M-1×cm-1(pH7.0),λmax为259nm。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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F030419 胶体金标记兔抗鸡IgY抗体 Rabbit Anti-Chicken IgY*GOLD
ARB11579 人基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)Elisa分析 Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3,timp-3 ELISA KIT
邻硝基*(代"*")-β-D-吡喃葡萄糖苷 D-Fructose-1,6-diphoshate calcium salt 2816-24-2
ARB11834 人醛固酮(ALD)ELISA检测服务 Human aldosterone,ald ELISA KIT
柠檬酸铋铵 DL-Lactic acid 31886-41-6
7761-88-*(代"8") 硝酸*(代"银")
9003-98-9 Deoxyribonuelease I
BTN120698 青霉素G*盐溶 Penicillin G Sodium Solution
大孔吸附树脂D101 1-β-D-Arabinofuranosylthymine 9060-05-3
616-91-1 N-Acety-L-Cysteine N-乙酰-L-半胱*酸
PY02-072B V-P反应培养基 250克
ARB13234 小鼠淋巴细胞因子elisa检测操作说明书 Mouse lymphocyte factor ELISA KIT
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·T7 RNA聚合酶
编号:BTN120310
英文名称:T7 RNA Polymerase
规格:1000U
T7 RNA聚合酶是一种高度特异识别T7启动子序列的DNA依赖的5´→3´RNA聚合酶,它可以催化单链或双链DNA T7启动子下游NTP的掺入,合成与T7启动子下游的模板DNA互补的RNA。
产品特点:
1.对于T7启动子有高度的特异性,用于体外RNA(含小RNA)的合成。
2.能识别修饰的NTP(生物素标记、地高*(代"辛")标记、荧光素标记的NTP),可用于标记探针。
3.所得RNA可用于下列后续实验:核酸杂交、基因组DNA序列分析、核糖核酸酶保护测定、反义RNA合成,体外翻译,RNA剪接、RNA二级结构分析、RNA-蛋白质相互作用、核酸扩增、siRNA、miRNA等小RNA。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| T7 RNA聚合酶(20U/μL) | 50μl |
| 5×反应缓冲液 | 250μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、制备DNA模板(本试剂盒不含所需试剂,此处信息仅供参考)
PCR片段和质粒DNA都可以用作体外转录的模板,但是必须注意以下几点。
⑴必须使用线性化的DNA。如果是质粒DNA,则必须先用适当的限制性内切酶切成线状。
⑵ 需要转录的DNA序列的上游必须有T7启动子。如果模板是PCR产物,则可以在设计引物时将T7启动子序列(5´TAA TAC GAC TCA CTA TAG GG 3´)加上。如果是将DNA片段克隆到载体上,则需要选择有T7启动子的载体,并且克隆位点必须位于T7启动子下游。
⑶ 需要转录的DNA序列的下游端最好不要是3´突出。如果是3´突出(比如选择了Pst I来线性化质粒),则最好用T4 DNA聚合酶修平。
⑷必须保证DNA模板中没有RNase。由于提取质粒DNA的过程中一般要使用大量的RNase A,因此质粒DNA一般都有严重的RNase A污染,所以在用作模板前,最好采取胶回收得方法回收质粒DNA。并且加入少量总RNA一起保温,然后电泳检测RNA是否被降解,以此来判断纯化的DNA模板是否有残留RNase A。
二、体外转录反应(本试剂盒不含除酶和反应液之外的相关试剂)
1.在一个RNase-free的塑料离心管中,在室温下(不是在4℃下)按次序加入下列成分:
| 成分 | 加入量 | 备注 |
| DNA模板 | 如果使用质粒DNA,必须反复酚-*仿抽提去除残留的RNase,然后再乙醇沉淀质粒DNA | |
| PCR片段 | 50ng左右 | |
| 质粒DNA | 1μg左右 | |
| RNase抑制剂 | ||
| 5×反应缓冲液 | 4μl | 需室温时使用 |
| NTP(2.5mM each) | 4μl | |
| T7 RNA聚合酶 | 0.5-1μL | |
| RNase-free水 | 补水到20μL |
注:此为20μL反应体系的用量,对其他反应体系,各成分的用量可以按比例增减。如果需要标记RNA探针,则需要订购NTP分开的试剂盒。如果需要得到加帽RNA,则需要加入自备的加帽修饰核苷酸。
2.37℃保温1-2小时。
注意:延长保温时间并不能提高产量。
3.70℃加热10分钟灭活T7 RNA聚合酶。
4.取1-3μL电泳检测转录效果。一般1μg DNA可以合成5-10μg的RNA。
5.得到的RNA可以放-80℃保存。
三、如果需要去除DNA模板(仅产品不提供所需试剂)
1.在体外转录体系中加入1μL自备的RNase-free DNase(3-5U/μL)。
2.37℃保温15-30分钟。
3.补水到100μL。
4.用自备的等体积(100μL)的Tris饱和酚-*仿抽提一次去除残留的DNase和RNA聚合酶。
5.加200μL微量核酸沉淀剂(用前需要摇晃混匀),振荡后15000rpm离心3~5分钟,弃上清。
6.加入1mL 75%乙醇,震荡10秒后15000rpm离心3~5分钟,弃上清。
7.短暂离心数秒,用枪头吸弃上清。晾干,所得沉淀即体外转录所得的RNA。可溶于RNase-free水中后立即使用或放-80℃长期保存。
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