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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
949
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 英文名:
Super Broth Medium,Powder
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")SB培养基哪里卖,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:SB培养基哪里卖
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:BTN100822
规格:250g
SB培养基所含的Peptone和Yeast Extract分别比LB高220%和300%。同样培养条件下能得到更多菌体,常用于质粒制备和蛋白质表达。配制一升液体培养基需要25g本产品。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
更多有关SB培养基哪里卖的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·人源脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶
编号:BTN130634
英文名称:Apurinic-Apyrimidinic Endonuclease I
规格:1000U
人源脱嘌呤/脱嘧啶(AP)核酸内切酶APE1,也称为HAP1或Ref-1,与大肠杆菌外切酶III蛋白具有同源性。APE 1水解断裂脱嘌呤/脱嘧啶位点5´端的磷酸二酯键,产生单链DNA断裂,留下3´羟基和5´脱氧核糖磷酸末端。除具有AP核酸内切酶活性外,据报道APE1还具有弱的DNA 3´二酯酶、3´到 5´外切酶和RNase H活性。除 DNA修复活性外,APE 1还能通过一种氧化还原机制,体外调控许多转录因子的DNA结合活性。作为这个功能的一部分,APE 1已被证实能刺激Fos-Jun异源二聚体、Jun-Jun同源二聚体、Hela细胞AP-1蛋白以及包括NF-kB、Myb和ATF/CREB家族成员在内的其它几种转录因子的DNA结合活性。其反应示意图如下:

产品特点:
➤ 单细胞凝胶电泳(彗星试验),彗星试验的推荐稀释倍数1:10³;
➤ 碱洗脱;
➤ 碱解旋;
➤ 改良切刻翻译。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在10μl总反应体系中,37℃条件下1小时,能切割20pmol含一个单独AP位点的34 mer寡核苷酸双链所需要的酶量。
AP位点的创建方法如下:37℃条件下,用1单位尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)处理20pmol含一个尿嘧啶碱基的34bp寡核苷酸双链2分钟。
SB培养基哪里卖关键词:BTN100822,SB培养基,Super Broth Medium,Powder
·PCR法DNA探针生物素标记试剂盒
编号:BTN90604B
英文名称:PCR DNA Labeling Kit(Biotin)
规格:5次
PCR标记的原理是用带标记的dNTP进行PCR,最后得到的PCR产物将带有标记,可以直接用于杂交试验。其原理示意图如下:

产品特点:
1.一站式,本试剂盒提供经过优化的试剂,不需要用户自己摸索。
2. 足够10次50μl体系的常规PCR(用于制备标记反应的模板和设置对照反应)和5次50μl体系的标记反应。
3.一次标记可以得到μg级的双链DNA探针或约700ng的单链DNA探针,足够多次杂交实验用。
4. 既可用于制备双链探针,也可以用于单链探针。
5. 90604A需自备含标记核苷酸的dNTP,90604B和90604C分别含生物素和地高*(代"辛")标记的底物。自备的标记包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。
6. 本产品得到的探针参入率一般为4-5%(每100个核苷酸中有4-5个将带有非同位素标记),有效降低了空间阻碍,检测效果最佳。
7.可以用于Southern和Northern Blot、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等分析。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 2×标记专用PCR Mix | 500μl |
| dNTP,2mM each | 50μl |
| 含Biotin-11-dUTP的dNTP | 25μL(仅B有) |
| 含DIG-11-dUTP的dNTP | 25μL(仅C有) |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
注:标记专用PCR Mix不含dNTP。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:准备工作
1. 按常规的方法设计PCR引物,使探针长度在400-800bp之间。过短则标记参入少,探针杂交信号强度减弱;过长则非特异杂交增加,背景变强。
2. 根据PCR引物优化PCR条件。
3. 由于标记的dNTP比较珍贵,所以本试剂盒不推荐以基因组DNA或其他复杂DNA为模板直接进行PCR标记,而是建议采取下述的两步法标记来提高成功率,即先制备非标记PCR产物,再以之为模板制备标记的PCR产物。
二:非标记PCR产物的制备
4. 设置50μL PCR的反应体系:
| 成份 | 用量 |
| 2×标记专用PCR Mix | 25μl |
| dNTP,2mM each | 5μl |
| 自备的探针引物一(10pmol/μL) | 1μL(10μM) |
| 自备的探针引物二(10pmol/μL) | 1μL(10μM) |
| 自备的模板DNA | 1μg基因组DNA或1ng质粒DNA |
| 超纯水 | 补到50μL |
5. 按已经优化的PCR参数进行PCR。
6.电泳检测和胶回收所需的PCR产物,并定量。用10 pmol引物一般能得到1μg左右的PCR产物(具体取决于PCR产物的长度)。注意:最好采取胶回收而不是PCR回收以避免残留引物干扰后续的标记PCR。
三:标记PCR反应(最好做一个不加标记的对照用于定量)
说明:在设置下面反应时,如果加一种引物,就得到单链标记的PCR产物;如果加两种引物,则得到双链标记的PCR产物。由于双链PCR探针在杂交前虽然要变性成单链后使用,但杂交时变性的双链彼此还会复性,这种复性会与探针-靶DNA杂交反应相竞争,降低杂交效率,因此强烈推荐使用单链标记的DNA探针。
| 成份 | 样品 | 对照 |
| 2×标记专用PCR Mix | 25μl | 25μl |
| 含Biotin-11-dUTP的dNTP或 含DIG-11-dUTP的dNTP或 自备的含其他标记dUTP的dNTP |
5μl | 不加 |
| dNTP,2mM | 不加 | 5μl |
| 双链标记:探针引物一和引物二 单链标记:探针引物一或引物二 |
每种50 pmol 一种50 pmol |
每种50 pmol 一种50 pmol |
| 上步胶纯化所得PCR产物 (单链标记可用100ng) |
10 ng | 10 ng |
| 超纯水 | 补到50μL | 补到50μL |
注意:本试剂盒提供的dNTP混合物中,标记底物与非标记底物的比例已经进过优化,如果自备标记dUTP,其与dTTP的最佳比例需要优化,标记不同,比例不同。对DIG-11-dUTP,最佳比例1:3;对BrdUTP,最佳比例为1:1。
7. 按第5步的PCR参数进行标记PCR,但需要进行下列修改:一是循环数增加到35-55个循环。由于模板为纯化后的PCR产物,探针对扩增长度完整性要求不高(长度不均的探针由于能形成网络结构,效果反而更好),所以可以增加循环数;二是延伸时间增加15秒,因为标记dUTP参入到DNA的速度比常规的dTTP慢;三是降低复性温度5-7℃,因为标记核苷酸参入到DNA后,新模板的Tm值将降低。
8. 标记探针的定量:取标记反应和对照反应的产物1-5μl,在琼脂糖凝胶上跟浓度已知的DNA marker一起电泳,并判断探针的浓度。由于标记反应的PCR产物中额外带有非同位素的配体(生物素,地高*(代"辛")等)、因此其泳动速度将慢于非标记PCR产物(但同位素标记不能用此法)。
注意:如果扩增的是单链DNA探针,其结合EB的能力远低于双链DNA(EB是嵌合到双链碱基对之间的,而单链DNA没有碱基对,只有一些局部区域折叠形成的有限双链区,因此能结合的EB很少),因此EB染色的强弱不能准确反应DNA的浓度,可以采用银染定量(跟marker比较)。一般100ng模板按上述条件经过单链PCR扩增可得到700ng左右探针。
9. 剩余的PCR标记产物可以不经过纯化,直接加入(对单链PCR探针)杂或加热变性并急冷后加入(对双链PCR探针)到杂交液中使用。如果暂时不用请放-20℃长期保存。如果需要纯化,请使用乙酸铵/乙醇沉淀法。
SB培养基哪里卖关键词:BTN100822,SB培养基,Super Broth Medium,Powder
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