相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输
- 保质期:
一年
- 英文名:
Antibody Dilution Buffer
- 库存:
680
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京印迹膜抗体稀释液多少钱,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京印迹膜抗体稀释液多少钱
产地:国产|进口
编号:BTN81208
品牌:百奥莱博
规格:250mL
本产品用于稀释Western Blot抗体,即开即用,方便快捷。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 抗体稀释液成分一 | 100ml |
| 抗体稀释液成分二 | 0.5g |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、转膜(湿法电转移,本产品不含相关试剂)
1.制备湿法电转液:将湿法电转液干粉全部溶解在1L去离子水中得20×湿法电转液,用时用去离子水稀释20倍预冷待用。
2.根据PAGE胶的大小剪切同样大小的滤纸和各边都大1mm的硝酸纤维素膜(以下简称膜)。避免手直接接触膜。
3.将切好的膜浸泡在新鲜稀释的1×湿法电转液(下简称转移液)中15-20分钟。
注意:最好用镊子夹住膜的一边轻轻置于转移液上,只让膜下层不转移液接触,通过毛细管作用使整个膜浸湿。避免让膜沉入转移液中,否则膜不转移液之间形成的气泡会阻止膜的湿润。
4.在容器中将两块海绵垫、六层滤纸用转移液浸湿。
5.在转移夹上依次放上一张浸湿的海绵垫、三层浸湿的滤纸、一块PAGE胶(只要分离胶部分)、一张浸湿的膜、三层浸湿的滤纸、一张浸湿的海绵垫。
注意:每叠加层一定要用玻棒来回擀几遍以擀走里面的气泡。膜两边的滤纸绝对不能相互接触,否则电转移时会发生短路,烧坏装置。
6.合起转移夹幵放入转移槽中(一定要注意方向,转印带负电荷的蛋白质时电极方向是膜正胶负;转印带正电荷的蛋白质时,电极方向是膜负胶正),然后用预冷的转移液灌满转移槽。
7.插上电极,一般在冷却条件下用100V恒压转移30-60分钟或冷室中14V转移过夜。
注意:一定要检查电流的大小,电流一般在0.1-0.4A。应根据蛋白分子量的大小确定转膜时间,对于小分子量的蛋白,转膜时最好垫2张或更多张膜(最多可10 张),即使白质已经转过了第一张膜,还会在其它膜上检测到;对于大分子量的蛋白,转膜时电压要高一点,时间也要延长一点,开始最好也用两块或多张膜。转移时间长的时候特别要注意加强降温措施。如果目的蛋白转移效率低,可以在转移液中加终浓度为20%的甲醇或0.1%的SDS。
8.终止转移后,取出膜,幵在膜上剪去一个小角以标记方向。如有必要可用自备的各种染液对胶或膜进行染色以确定蛋白质转移效率。
二、封膜(本产品不含相关试剂)
1.将膜转移至杂交袋中,加5-10mL Western封膜液后热密封杂交袋开口。
2.室温下用脱色摇床摇动杂交袋30-60分钟。
三、与一抗二抗结合
1.用5mL Western抗体稀释液(配制方法:将抗体稀释液成分二干粉到入成分一溶液中,溶解后即可。未用完的抗体稀释液需-20℃保存)将自备的一抗稀释至适当的倍数(一般需要稀释10-100000倍使用,最佳稀释倍数跟一抗效价相关,需摸索)。
2.剪开杂交袋的一角,倒去封膜液,加入5mL新鲜稀释的一抗溶液,加热密封杂交袋开口。
3.室温下在脱色摇床上摇动杂交袋30-60分钟。
4.用抗体稀释液将自备的HRP或AP标记的二抗稀释至适当浓度(一般需要稀释500-4000倍。最佳稀释倍数跟二抗效价相关,需摸索)。
5.剪开杂交袋的一角,倒去一抗溶液(可留存),加入5mL新鲜稀释的二抗溶液,加热密封杂交袋开口。
6.室温下在脱色摇床上摇动杂交袋30-60分钟,也可过夜孵育。
7.剪开杂交袋的一角,倒去二抗溶液(可留存)。
8.剪开杂交袋,用镊子取出膜,用Western洗膜液在器皿中洗3次,每次10分钟。
9.根据二抗的标记酶选择下面两种显色方法之一。
四、HRP显色检测(对HRP标记的二抗,本产品A型,本产品不含相关试剂)
1.将膜平放,在吸附了抗原抗体的一面加入100-500μL TMB溶液A和100-500μL TMB溶液B,铺满整个膜表面(具体用量可按膜的大小增减)。
2.置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2至5分钟,直至深蓝色条带出现。
3.用镊子夹起膜,放入去离子水中洗膜3次终止反应,每次30分钟。
4.空气中晾干后照相保存。
注意:膜显色后的颜色在数小时后将会褪色,不能永久存在,故需要及时照相。
五、AP显色检测(对AP标记的二抗,本产品B型,本产品不含相关试剂)
1.用新鲜配制的1×AP缓冲液洗涤硝酸纤维素膜5分钟。
2.将膜转移到新配制的BCIP-NBT法AP显色液中,每cm2膜需要0.1mL显色液。新鲜配制BCIP-NBT法AP显色液(以10mL为例)的方法:将9mL去离子水、1mL 10×AP缓冲液、50μl BCIP溶液和50μl NBT溶液混匀。此溶液必须在1小时内使用。
3.室温摇晃5-30分钟显色(37℃可加速反应)。
4.显色到合适程度后用自备去离子水洗膜3次终止反应,每次30分钟。
5.用吸水纸吸干膜上的水分,避光干燥保存或在一周内照相。
六、Western抗体清除剂(说明:此处理可能会使蛋白质失去某些表位,本产品不含相关试剂)
1.将膜浸泡在Western抗体清除剂中,70℃摇晃孵育30分钟,去除一抗和二抗。用Western洗膜液洗膜两次,每次10分钟。
2.膜即可用于下一次Western检测的膜封堵步骤。
我公司的北京印迹膜抗体稀释液多少钱,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
BFD071 H7亚型禽流感抗原快速检测卡
103-47-9 2-(环己*(代"胺")基)乙*(代"烷")磺酸 CHES
9050-94-6 葡聚糖凝胶G-100 Sephadex G-100 medium
ARB14163 大鼠流行性出血热(EHF)ELISA检测服务
BL0001 槲皮素标准品
2-羟基-4’-甲氧基二*甲酮 Amberlite XAD7HP 131-57-7
草双甘膦 3-Iodobenzoic acid 1071-83-6
F030435 胶体金标记山羊抗鸡IgY IgG抗体 Polyclonal Goat Anti-Chicken IgY(IgG)*GOLD
PY02-145 改良Skirrow氏琼脂基础 250克
F030223 HRP标记兔抗猴IgG抗体 Rabbit Anti-monkey IgG*HRP
BL0915 FITC标记BSA抗体
BFD016 鸡传染性支气管炎病毒抗体检测试剂盒
CYB161008 兔IgG(冻干粉)
ARB12027 大鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)含量检测 Rat β-thromboglobulin,β-tg ELISA KIT
鲁米诺 Glycocholic acid hydrate 521-31-3
ARB10495 人白介素8(IL-8/CXCL8)elisa测定使用说明书 Human interleukin 8,IL-8 ELISA KIT
N-三(羟甲基)甲基-2-*基乙磺酸 PBS(Phosphate buffer saline) powdered 7365-44-8
ARB12036 大鼠γ*基丁酸(GABA)Elisa分析 Rat gamma-aminobutyric acid,gaba ELISA KIT
BL1442 X-gal(20mg/ml)
ARB12522 大鼠热休克蛋白90(HSP-90)酶联免疫定量检测 Rat heat shock protein 90,hsp-90 ELISA KIT
北京印迹膜抗体稀释液多少钱关键词:BTN81208,印迹膜抗体稀释液,Antibody Dilution Buffer
ARB10116 人LeIshmAnIA ELISA代测服务
9002-04-4 Thrombin 凝血酶
ARB10861 人抗神经元核抗体2型/抗RI抗体(ANNA-2/RI)含量测试 Human neuronal nuclear autoantibody,anna-2/ri ELISA KIT
ARB10259 人二胺氧化酶(DAO)免费代测 Human diamine oxidase,dao ELISA KIT
乙基纤维素 Sodium acetate anhydrous 9004-57-3
BL1417 "Western blotting(小鼠/兔IgG)
F030624 FITC标记兔抗牛IgG抗体 Rabbit Anti-Bovine IgG*FITC
ARB14089 牛白血病(ALV)Elisa定量检测
反丁烯二酸 4-Amino-1-methyl-3-n-propyl-5-pyrazolecarboxamide 110-17-8
CV0601 平末端DNA加A试剂盒
ARB13864 猪生长激素释放多肽(GHRP)ELISA代测服务 Porcine growth hormone releasing Peptide,ghrp ELISA KIT
ARB10395 人可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)定量分析 Human soluble endothelial protein c receptor,sepcr ELISA KIT
HC0262 Conbitips Plus分液管
J0306 兔抗山羊IgG(H+L)抗血清 1ml/10ml
CYB165019 生物素化羊抗兔IgG
北京印迹膜抗体稀释液多少钱关键词:BTN81208,印迹膜抗体稀释液,Antibody Dilution Buffer
·百万碱基级真菌DNA提取试剂盒
编号:BTN130942
英文名称:Fungus DNA extraction kit(millions of base)
规格:10次
·硫*(代"酸")*溶液(PCR级MgSO4溶液)
编号:BTN130840
英文名称:MgSO4,PCR Grade
规格:5mL
本产品为专门用于PCR的MgSO4溶液,浓度10mM,可以用于调节MgSO4的最佳浓度。MgSO4为常用的PCR增强剂之一。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
·50mL亲和层析柱
编号:BTN140653
英文名称:Affinity Chromatography Colum(50mL)
规格:50mL
本产品适用范围广泛,可用于纯化分离重组蛋白、抗体和抗原、多肽、糖蛋白、磷酸化蛋白、DNA及DNA结合蛋白等生物大分子;还可以用于去除生物样品中的内毒素等污染。
亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而发明的纯化技术。它是利用生物分子间存在的特异性相互作用(如抗原-抗体、酶-底物或抑制剂、激素-受体等),通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,对另一个分子进行分离纯化。
亲和层析柱常见的使用方法有重力法、手动加压法、蠕动泵法,其示意图如下:
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
常用亲和标签及纯化方案:
我公司正在优惠促销蛋白质研究等系列产品,期待您的咨询选购北京印迹膜抗体稀释液多少钱。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验【原创】暗室实验(化学发光底物检测方法)及Western Blot实验优化方法
;然而这些设施可能需要更长的曝光时间。 13. 在最佳的印迹膜上,超感应反应底物产生的信号可能会持续超过8 h。未获得最佳结果,印迹能重复曝光到胶片上或者成像系统中。随印迹时间的延长,需延长曝光时间。如果未得到最佳结果,可用抗原和/或抗体稀释液重复进行这个程序。
案例一:DAB染色后切片着色一片黄/背景深 背景:奥运会期间我们课题组研究生都在实验室做实验,许多从北京购买的试剂买不到,对我们的许多实验产生了很大的影响。 我以前一直用中杉金桥的Sp三步法染色试剂盒,效果不错,在奥运会期间我准备做同批实验分不同批次酶免疫组化实验,第一批组化实验结果很好,抗体浓度感觉比较合适(Santa Cruz公司1:200),等做第二批时发现封闭血清不够了,为了保证实验顺利进行,我又从福州迈新顶了一个SP试剂盒,同时抗体稀释液也不够了,我又重新从博士
底物孵育 恰当的发光或显色底物 曝光 曝光时间掌控,X-光片,显影定影试剂 后Western Blot选择 抗体剥离缓冲液(蛋白印迹膜再生液),底片北京去除剂
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









