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北京现货大肠杆菌HB101化学感受态细胞优惠

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • BTN81221-VBO
  • 2025年07月08日
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      干冰运输、-80℃保存

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      长期

    • 英文名

      E.coli HB101 Chemical Competent Cell

    • 库存

      315

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产供应北京现货大肠杆菌HB101化学感受态细胞优惠,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。

    北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京现货大肠杆菌HB101化学感受态细胞优惠,产品信息:

    类别:克隆与表达

    英文名:E.coli HB101 Chemical Competent Cell

    产品名 产品编号 包装规格
    大肠杆菌HB101化学感受态细胞 BTN81221 0.1mL*10

    品牌:百奥莱博

    规格:0.1mL*10

    产地:国产|进口

     HB101菌株是E.coli K12菌株与E.coli B菌株的杂合产物(同时也是Stbl3的原始菌株)。recA13突变可有效抑制长片段末端重复区的重组,降低错误重组的概率;但不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中去蛋白液。hsdS20 背景使HB101缺失内切酶系统,增强了外源DNA的稳定性和提取质量。本产品是采用大肠杆菌HB101特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。

     

    产品特点:

    1. 具有链霉素抗性。

    2.基因型:F- mcrB mrr hsdS20(rB- mB-)recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1galK2 xyl-5 mtl-1rpsL20((strR)glnV44λ-。

    3. 不存在 lacIqZΔM15,不可用于蓝、白斑筛选。

    4. 该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验。

     

    储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。

     

    自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。

     

    使用方法:

    1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。

    以下实验以50μL感受态细胞为例。

    2. 待感受态细胞处于冰水混合状态时,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴25分钟。

    3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟,晃动会降低转化效率。

    4. 每个离心管中加入450μL 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,200rpm 振荡培养60分钟使菌体复苏。

    5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含有相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃倒置培养12-16小时。

     

    注意事项:

    1. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。

    2. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(5000rpm,1分钟)收菌后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。

    3. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

    4. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

    北京现货大肠杆菌HB101化学感受态细胞优惠专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司

    关键词:E.coli HB101 Chemical Competent Cell,大肠杆菌HB101化学感受态细胞,BTN81221

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    编号 类别 名称
    BTN71205 DNA纯化 柱式土壤DNA提取试剂盒
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    BTN130840 核酸扩增(PCR) 硫*(代"酸")*溶液(PCR级MgSO4溶液)
    BTN130983 RNA纯化 RNase喷雾清除剂

     

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      , 1ml 转至50 ml LB, 37oC 250 r/m至 A600=0....     液氮或低温冰箱中取出的 大肠杆菌 *E.COLI DH5, JM109,HB101等,在LB平板上划线,37度过夜至长出单菌落.挑直径1-3毫米的单菌落*可多个, 接种到250毫升/3升锥形瓶 或80毫升/1升 锥形瓶 的SOC培养基.   培养基 量不可再多,会影响效率.在18度 150

    • 细菌转化实验

      观察到。 三.实验材料 受体菌:E.coli K12 HB101 质粒:pGLO plasmid 转化液(CaCl2) 氨苄青霉素(amp) 阿拉伯糖(ara) 培养基:固体LB、液体LB 接种环、移液器等 四.实验步骤 1. 准备平板: 每组:1块LB平板,2块LB/amp平板,1块LB/amp/ara平板 2. 准备感受态细胞:用250µl无菌水或转化液悬浮试剂盒中提供的大肠杆菌菌粉,此即感受态细胞

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