- ￥1620 - 4997
- Immobilon
- WBKLS0100，WBKLS0500
- 美国
- 2026年04月30日
企业认证
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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Immobilon Western 化学发光 HRP 底物
- 保质期：
1年
- 保存条件：
2-8℃
- 供应商：
上海瓦兰生物
- 库存：
大量
- 规格：
2 x 50 mL/ 2 x 250 mL
| 规格： | 2 x 50 mL | 产品价格： | ￥1620.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 2 x 250 mL | 产品价格： | ￥4997.0 |
WBKLS0100,WBKLS0500，化学发光 HRP
是Merck Millipore旗下Immobilon品牌的HRP化学发光底物，，它的作用原理：HRP催化鲁米诺氧化发光，检测抗体-抗原复合物信号，发射波长约425nm，核心用于Western Blot（WB）等免疫印迹检测，属免疫检测专用生物试剂。检测灵敏度达~0.01pg（中飞克级），信号稳定可持续2小时以上，兼容PVDF/NC膜及常用缓冲液与封闭试剂，可减少抗体用量2-5倍。
实验注意事项
1. 储存与解冻：
全程 2-8℃避光保存，严禁冻存，反复冻融会导致鲁米诺降解、发光强度骤降。工作液需现配现用，A液与B液1:1混合后，室温避光放置不超过1小时。
2. 操作环境：
实验全程避免强光直射（尤其是紫外光），孵育底物时建议在暗室或弱光环境下进行，防止信号提前淬灭。所用容器（如孵育盒）需洁净无酶污染，避免残留的HRP抑制剂影响反应。
3. 膜处理要点：
PVDF/NC膜在孵育底物前，需用洗涤缓冲液（如TBST）充分洗涤（3次×5分钟），彻底去除未结合的抗体，降低背景噪音。
膜表面需沥干多余洗涤液（不可干燥），避免工作液被稀释，影响检测灵敏度。
4. 孵育与检测：
工作液需完全覆盖膜的蛋白面，室温孵育 1-5分钟 即可，过长孵育会增加非特异性背景。检测时尽快将膜转移至成像仪或X射线胶片，信号在孵育后10-20分钟内最强，超过2小时后会逐渐衰减。
5. 安全与废液处理：
试剂含过氧化物成分，避免与皮肤、黏膜直接接触，操作时佩戴手套和防护眼镜。废液需按实验室化学废液规范处理，不可直接倾倒。
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文献和实验底物范围较广，包括二氨基联苯胺 (DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB 是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物，在水和醇中不溶解。多数情况下，推荐在 DAB 中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中，辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色，且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1. 需要的溶液和特殊设备 DAB，0.05 mol/L Tris 缓冲液 (pH7.6), 0.3％ (W
问：有没有做辣根过氧化物标记的朋友啊，能不能把你们的步骤发给我。本人开始做，发现很多人用的浓度都不一样。答：1.1 试剂准备1) 10mg/mL HRP2) 0.06mol/L NaIO43) 0.16mol/L乙二醇4) 碳酸盐缓冲液(Na2CO3 0.7952g NaHCO3 1.4702g 溶于500mL蒸馏水中，调pH值到9.5)5) 2.5mg/mL NaBH46) 0.01mol/L磷酸盐缓冲液，pH7.41.2 操作步骤1. 10mg/mL取HRP VmL，溶液为棕黄色，加入
显色（HRP酶） 1．增强化学发光法(ECL) Ecl 显色原理：氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物，是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺（luminol，5＇-氨基-2，3-二氢-1，4-酞嗪二酮）的分子结构及化学反应式如下： 鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物，也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中，含有H2O2和鲁米诺，在HRP（辣根过氧化物酶）的作用下，发出荧光来。 试验步骤： 1）将两种显色底物1：1等体积混合（一般各1ml/membrane）。
