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- 百奥莱博
- 北京
- QN1081-KNQ
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
RIPA裂解液4℃保存，PMSF-20℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
RIPA buffer
- 库存：
345
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的普通RIPA裂解液(组织/细胞)品牌用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多普通RIPA裂解液(组织/细胞)等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称：普通RIPA裂解液(组织/细胞)
规格：100ml
英文名：RIPA buffer
品牌：百奥莱博
RIPA组织/细胞裂解液是利用表面活性剂等来裂解细胞膜(包括核膜)。本试剂提取的蛋白为可溶性总蛋白。
使用方法：
如发现RIPA有沉淀，请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。
根据使用量，取每1ml RIPA 加入10ul PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM，混匀备用 (PMSF现用现加)。
1、样品前处理：
a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150～250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板每孔细胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液，用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 5～10×105细胞/管，然后再裂解。
c)对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液
(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：
将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
储存条件：RIPA裂解液4℃保存，PMSF-20℃保存，有效期1年
关键词：组织/细胞,RIPA buffer,QN1081,普通RIPA裂解液,普通RIPA裂解液(组织/细胞)
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| 编号 | 名称 |
| QN0116 | 维生素B3(烟酸) |
| QN0721 | 肝素* |
| QN0653 | 反式肉桂酸 |
| QN0278 | D-赖*酸 |
| QN0049 | 多粘菌素E硫*(代"酸")盐 |
| QN0246 | 曲拉通X-114 |
| QN0702 | k-卡拉胶 |
| QN0506 | 崩溃酶 |
| QN0734 | 茶多酚 |
| QN1061 | pEGFP-N2 荧光表达载体 |
| QN0226 | N6-异戊烯基腺嘌呤(植物细胞培养级) |
| QN0769 | 4-*-2-**甲醛 |
| QN1118 | 膜再生液 |
| QN0364 | L-天门冬*酸 |
| QN0033 | 甲砜霉素 |
| QN0888 | 土壤基因组DNA提取试剂盒 |
| QN0212 | 2,4-二**氧乙酸(2,4-D) |
| QN0786 | DPPH |
| QN1106 | 考马斯亮蓝快速染色液 |
| QN0420 | 谷*酸脱*酶 |
| QN0870 | AMPK选择性抑制剂 |
| QN0486 | 溶菌酶(100mg/ml) |
| QN0946 | Oligo(dT)15引物 |
| QN1255 | 加拿大树胶 |
| QN0880 | PAGE凝胶银染试剂盒 |
| QN1048 | PBR322载体 |
| QN0460 | 胰蛋白酶(1:250) |
| QN0921 | 液相RNase清除剂 |
| QN1162 | DAB法显色试剂盒(小鼠IgG) |
| QN0422 | 醛缩酶(来源于兔肌肉) |
| QN0549 | 鸟苷-5"-二磷酸二*盐 |
| QN0216 | α-*乙酸(NAA) |
| QN0222 | 24-表芸苔素内酯 |
| QN0004 | 阿奇霉素 |
| QN0072 | 衣霉素 |
| QN0101 | 羧苄青霉素* |
| QN0186 | 2-脱氧-D-葡萄糖 |
| QN0140 | 黄芪多糖 |
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文献和实验/ml 牛胰蛋白酶抑制剂 （ aprotinin ），1μg/ml亮抑蛋白酶肽 （ leupeptin ）裂解液缓冲液：10mM Tris-HCl（pH7.4），0.15M NaCl，5mM EDTA（pH8.0），1%Triton×100；使用前加5mM DTT，0.1mM PMSF异丙醇和5mM ε-氨基己酸。2. 裂解液的制备A. 制备细胞裂解液：①收集胰蛋白酶消化的细胞并离心，用PBS清洗。②用100μl RIPA缓冲液冰浴溶解沉淀10min（每500000个细胞20μl RIPA缓冲
，比如 RIPA，虽然裂解剧烈，但是无法维持蛋白天然构象，会破坏互作蛋白对。 如果自配，建议采用温和系统，比如 NP40/Triton 0.1%-1%；SDS ≤0.1%，盐离子≤150 mM 记得要加蛋白酶和/或磷酸酶抑制剂 结合液---利于蛋白之间的相互结合，要考虑孵育（结合）顺序 如果抗体和 beads 先孵育，建议 选择 pH 8.2（更常用）或者 pH 5.0 如果选用纯抗原作为诱饵蛋白 X 去拉裂解液中的靶蛋白 Y，抗体和抗原的结合 buffer 选择中性PBS/TBS 如果诱饵蛋白 X
多篇 SCI 发现用 RIPA 提蛋白存在问题，我们该如何应对？
这篇综述重点说明使用 RIPA 裂解液提取总蛋白以及下游实验中可能存在的问题。RIPA 裂解液常用于从脊椎动物细胞和组织中提取总蛋白 [1]。但是由于蛋白质间有较大的差异和非蛋白成份的干扰，所以从一个样本中同时释放和溶解所有蛋白质是非常困难的。特别是一些整合到膜上的蛋白质，或与其他蛋白质 / 核酸形成复合物时，就大大阻碍了提取效率。因此可以推断，蛋白质在提取过程中或多或少的与在体内时真实情况不尽相同。经典 RIPA 裂解液中含有低浓度的十二烷基硫酸钠（SDS 变性剂），脱氧胆酸（干扰蛋白质间
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