北京现货胞浆蛋白提取试剂盒厂家直销

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名称：北京现货胞浆蛋白提取试剂盒厂家直销
编号：QN1066
品牌：百奥莱博
规格：50T|100T
产地：国产|进口
胞浆蛋白提取试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取胞质蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，作用较为温和，可获得蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验，由于含有上述的酶抑制剂，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。

操作方法:
1、组织总蛋白的提取
(1)在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF;混匀，放置在冰上备用;
(2)称取0.1g的新鲜组织，放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处，用眼科剪将组织块尽可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至没有明显的组织块，这个过程注意冰上操作;
(3)将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中，4℃，12000g离心30min;
(4)吸取上清至新的管中;
(5)进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80℃，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。)
2、细胞总蛋白的提取
(1)裂解液的用量：107个细胞需要裂解液1ml;
(2)贴壁细胞：弃去培养基，用冷的PBS洗两次，弃去PBS，然后加入计算好的细胞裂解液;
(3)在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞，
(4)将刮离的细胞裂解液移入EP管中，颠倒裂解20-30min
(5)悬浮细胞：4℃400g离心收集细胞，用冷的PBS洗两次细胞，同样按细胞数加入裂解液，
(6)涡旋10s，放置冰上裂解10min，重复3-4次;
(7)裂解完毕之后，将细胞裂解液4℃，12000g离心30min;
(8)将上清移入新的EP管中;
(9)进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80℃，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。)

注意事项：
1、实验过程，所有试剂都要需要预冷或者即融，保证操作过程中的低温环境;
2、PSMF(有毒)现用现加，因为PMSF在水溶液中会快速降解。

储存条件 ：-20℃

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·硫*(代"酸")卡那霉素
编号：QN0093
英文名称：Kanamycin A sulfate；Kanamycin monosulfate
规格：5g|100g
本品是一种*基糖苷类抗生素，能结合到70S核糖体亚单元从而 抑制肽链的形成，用于抗性筛选。

CAS：25389-94-0
分子式：C18H36N4O11 ·H2SO4
分子量：582.60
储存条件：室温
性状：白色或类白色粉末或不规则棱柱体结晶

硫*(代"酸")卡那霉素(Kanamycin sulfate)是一种*基糖苷类抗生素，对革兰氏阳性菌和阴性菌及支原体都有抑制作用。作用机制在于靶向结合细菌70S核糖体亚基，从而抑制核糖体易位和引起错误编码进一步干扰蛋白质合成。硫*(代"酸")卡那霉素可用在细胞培养中抑制细菌污染。分子生物学研究中，它常用来选择性筛选成功转化卡那霉素抗性基因(kan gene)的细菌克隆;也常用于农杆菌介导的转化实验，选择性筛选携带npt II(APH3)基因的植物组织。本品易溶于水(50 mg/ml)，需过滤除菌后使用，推荐工作浓度为30-100µg/ml。


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