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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输
- 保质期:
一年
- 英文名:
DNAgreen(UV)
- 库存:
844
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")绿如蓝核酸染料(UV)大量库存促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:绿如蓝核酸染料(UV)大量库存促销
产地:国产|进口
规格:1.5mL
品牌:百奥莱博
英文名:DNAgreen(UV)
目前最常见的替代EB的核酸染料SYBR Green I(属于花*类染料)虽然毒性比EB低、灵敏度比EB高,但由于其化学稳定性差(怕光、怕水、怕热),实验结果的重复性往往不尽人意;此外,SYBR Green I在电泳过程中能在DNA分子间移位,很容易使DNA 条带模糊和扭曲,电泳清晰度和分辨率也不如EB。所以在实际应用中依然不能有效替代EB。本产品是同时具有EB 稳定性和SYBR Green I低毒性的新性核酸染料
产品特点:
1.低毒。其主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品,有利于保护使用者的健康和保护日益恶化的环境。
2. 灵敏。检测灵敏度跟EB相当,能满足常规核酸电泳实验要求。
3. 稳定。对光、水和热的稳定性跟EB相当,可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。
4. 无分子间位移现象。不会出现SYBR染料常见的条带模糊和扭曲现象。
5. 使用方法多样。既可以加入熔化的胶中,也可以电泳后染色,还可用于PAGE。
6.跟各种常用的核酸电泳缓冲液(如SuperBuffer-2、TBE、TAE)兼容,但在SuperBuffer-2和TBE中背景最低。
7. 观察时不需要任何额外的仪器设备或UV光源,可以使用现成的观察EB的300nm UV。
8.可用于RNA染色(也呈绿色)。
9. DNA或RNA浓度较高时还可以直接在日光下观察(需要将胶放在黑色背景下)。由于避免了UV 对DNA的伤害,尤其适用于胶回收实验。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
注意:虽然本产品的主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品,但操作时最好还是戴上塑料手套。
使用方法之一:电泳中染色DNA(RNA的染色跟DNA完全一样)。
本方法是将DNAGREEN 直接加入溶化的凝胶中使用,只适用于琼脂糖凝胶电泳,不适用于PAGE。
1. 将DNAGREEN 直接加入到融化的琼脂糖凝胶中,每100mL凝胶加3-10μl DNAGREEN,混合均匀后倒胶。琼脂糖凝胶中不能含任何其他染料(如EB和SYBR Green I,否则会相互干扰)。在100mL 琼脂糖凝胶中加入DNAGREEN的量不要超过10μl,否则背景将很强。注意:一定要保证琼脂糖彻底熔化,尤其是在第一次熔化胶的时候,否则未熔化的小颗粒将产生跟染料相同的荧光。
2. 将DNA样品与DNA上样液按比例混合后上样。注意:一定要使用不含SDS等去污剂的上样液,否则SDS 会跟染料结合,极大地降低灵敏度。
3.上样后电泳,电泳参数同常规的电泳。如果使用百奥莱博五分钟核酸电泳液SuperBuffer-2,需要较高电压,详见该产品说明书。
4.电泳结束后在300nm左右的UV下观察。注意:不要使用波长为260nm或360nm的UV,否则检测灵敏度会降低。如果DNA或RNA浓度较高,还可以直接在日光下直接观察(需要将胶放在黑色背景下),避免UV 对DNA的伤害,尤其适用于胶回收实验。
注:显色结果:在紫外下,DNA浓度非常高的时候是白色,浓度低的时候是绿色的,单链核酸有时是红色的。
5. 用配置了520-550nm 滤光片(一般呈黄色或深黄色)的相机拍照。注意:不要使用与EB 兼容的红色滤光片(它能阻挡520-550nm的光)。如果能再加上能滤去UV的滤光片,效果会更好。
6.后续 Southern、转膜或DNA胶回收实验按常规操作进行。
使用方法之二:电泳后染色DNA
本方法是在电泳后对DNA进行染色,适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE。但该方法需要单独的染色处理,染料用量较大,不推荐用于琼脂糖凝胶的染色。
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 用去离子水将DNAGREEN 稀释500倍后(100mL 水需要加0.2mL DNAGREEN),将凝胶放入,室温下摇晃染色30分钟(对琼脂糖凝胶)或15分钟(对PAGE)。
3. 用水脱色 10-30分钟,具体时间需根据背景强弱决定,其余同方法一。
注意:电泳后染色液可以反复使用次数。
疑难解答:
Q:本产品可否用于RNA染色?
A:可以,不论RNA是在甲醛变性胶中电泳,还是在普通的SuperBuffer-2、TBE或TAE胶中电泳,RNA染色后在300nm下都跟DNA一样呈绿色。
Q:本产品是否可以加入上样液中进行染色?
A:不行,本产品只能直接加入凝胶中进行染色或电泳后再染色。
Q:为何前端(靠近正极)的DNA 条带很淡或根本看不见?
A:跟EB一样,电泳时DNAGREEN 朝负极方向移动,当前端的DNA(最小片段)进入没有DNAGREEN的区域时,已经结合的染料分子会逐渐从DNA分子上脱落,所以条带会变淡或根本看不见。解决办法之一是缩短电泳时间或电泳后再染色;之二是在每100mL电泳缓冲液中补加3-5μL染料。
Q:本产品在哪种缓冲液中效果最好?
A:DNAGREEN染料在不同缓冲液中背景荧光强度不同,从弱到强的顺序是:
SuperBuffer-2、TBE、TAE。在背景较强的缓冲液体中,可以适当降低染料的用量,比如100mL胶中加3-5μl。最佳浓度需要稍做摸索。
Q: 为何电泳后前面部分(靠近正极)的胶呈白色,后面的胶呈黑色?
A: DNAGREEN染料带正电,电泳时往上走,胶的黑色部分是染料上移后留下的无染料胶。
本产品在TAE中背景最强,可参考上个问题答案更换电泳液以降低背景值。
Q:用SYBR染色的DNA在电泳时为何容易发生条带模糊和扭曲现象?
A:SYBR染料一般与DNA的小沟结合,但在常规电泳条件下该结合并不牢固,染料分子可以在标记的和未标记的DNA分子之间转移,使DNA分子的泳动速度时快(无染料结合时)时慢(有染料结合时),发生条带模糊和扭曲现象。嵌入型染料(如EB和本产品)与DNA 结合牢固,则无此现象。
Q:核酸染料是否都有毒性?
A:核酸染料对动物和人的毒性由多方面决定。
一是染料的膜通透性,EB 被归类为强诱变剂是由于其分子量较小,容易进入细胞内。而EB 二聚体Ethidium Homodimer(EthD)嵌入DNA的能力比EB 强上千倍,但毒性很小,就是由于其分子比EB大,不能透过细胞膜,所以毒性反而更低。SYBR 系列染料虽然低毒,但由于一般都溶于DMSO(因为容易水解,不能使用水溶液做溶剂)中,所以如果溅到皮肤表面,更容易进入皮肤。
二是染料是否容易被人体降解。比如EB在体外就很难降解,一旦进入体内能在人体内残留的时间可能比较长,增加了毒性;而SYBR Green I等染料(也能以嵌入方式与DNA 结合)由于不稳定,比较容易自然降解,所以毒性自然较低。
三是降解产物是否有毒性,比如用很多方法(如强碱法)降解EB 得到的产物有的比EB 毒性更大,而有的染料降解产物毒性却低很多,甚至无毒。
四是染料进入细胞核以后是否能跟DNA 结合,很多实验结果显示即使EB染料也很难嵌入型到染色体中,因为染色体中的DNA 已经紧密地与各种组蛋白结合。
五是细胞修复突变的能力,正常人体都有很强的修复突变的能力,如修复日光中UV 诱导的DNA突变。总之,一种DNA染料的毒性强弱是多种因素综合的结果。
欲咨询购买绿如蓝核酸染料(UV)大量库存促销,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·25mM*化锰溶液(PCR级MnCl2溶液)
编号:BTN130307
英文名称:MnCl2,PCR Grade
规格:5mL
本产品为专门用于易错PCR的MnCl2水溶液,浓度为25mM,可用于调节MnCl2的最佳浓度。由于Mg2+在PCR过程中可以稳定非互补的碱基对,Mn2+能够降低聚合酶对模板的特异性,因而调整两种离子的浓度,可获得不同突变频率的多样性文库。
*化锰分子量为125.8,CAS号为7773-01-5,水合*化锰外观为玫瑰色单斜晶体;无水*化锰外观为桃红色结晶。密度为2.977g/cm3。熔点是650℃。在高于熔点温度下升华。沸点1190℃。易溶于水,溶于醇,不溶于醚。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
·低熔点琼脂糖
编号:BTN130835
英文名称:Low Melting Agarose
规格:5g
低熔点琼脂糖是指在糖链上引入羟乙基、甲氧基等基团后的琼脂糖,其能在30℃左右成胶,约65℃熔化,熔化温度低于大多数双链DNA熔点。利用低熔点琼脂糖的这种性质可以从凝胶中回收天然形式的DNA。本产品具有更高的筛过特性,更高的分辨率,更透明,是理想的DNA和RNA电泳产品。因其在37℃以下保持流动,亦适用于凝胶内进行的酶促反应、组织培养、细胞克隆以及病毒空斑实验。
储存条件:常温运输及保存、有效期一年。
·YPDG液体培养基
编号:BTN130897
英文名称:YPDG Liquid Medium
规格:250mL
YPDG培养基为YPD和YPG培养基的混合培养基。可用来区分+和-菌落。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
·抑*肽酶溶液(5mg/mL)
编号:BTN130536
英文名称:Bestatin Solution
规格:5mL
本产品为5mg/mL抑*酶的甲醇溶液,工作浓度为40μg/mL(130μM)。抑*肽酶(Bestatin),又称*肽酶抑制剂、乌*美司(ubenimex),分子量是308.4,是一种竞争性的蛋白酶抑制剂,可抑制*肽酶B、白*酸*基肽酶、三肽*肽酶和哺乳动物细胞表面的*基肽酶等蛋白酶的活性,不能抑制羧肽酶。

储存条件:低温 运输,-20℃保存,有效期一年。
绿如蓝核酸染料(UV)大量库存促销关键词:BTN70303,UV,绿如蓝核酸染料(UV),DNAgreen(UV)
安息香 6-APA 119-53-9
ARB10258 人二*嘧啶酶样3(DPYSL3)免费代测 Human dihydropyrimidinase-like 3,dpysl3 ELISA KIT
F050321 猫IgG抗体 The cat IgG
N-乙酰-L-*丙*酸 Chloramphenicol 2018-61-3
BTN130840 硫*(代"酸")*溶液,10mM,PCR级 MgSO4 ,PCR Grade
ARB12953 小鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)定量分析 Mouse vascular endothelial cell growth factor,vegf ELISA KIT
A7701-68 狗血清Dog Serum
二乙酸萤光素 L-Cysteine 596-09-8
ARB11423 人载脂蛋白C3(Apo C3)酶标法分析 Human apolipoprotein c3,apo c3 ELISA KIT
RN4301 EASYspin Plus 细菌RNA快速提取试剂盒
PL0201 质粒小量快速提取试剂盒(离心柱型)
ARB11764 人腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)elisa测定使用说明书 Human atp-binding cassette transporter g2,abcg2 ELISA KIT
F040102 鸡卵清蛋白偶联克伦特罗 OVA-CLE
BL1292 SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
绿如蓝核酸染料(UV)大量库存促销关键词:BTN70303,UV,绿如蓝核酸染料(UV),DNAgreen(UV)
·自诱导培养基(lac启动子)
编号:BTN100825
英文名称:Auto-induction Medium
规格:200mL
本产品是本产品是在pET 专用生长培养基的基础上开发而成的,它利用E.coli自身对培养基中不同碳源的调控利用机制,实现外源蛋白在细菌达到饱和生长期后的自动诱发。
产品特点:
1.本产品自动诱导表达,不需要添加任何IPTG或相关诱导物,节约成本。
2.免去了密切监控菌液密度的过程,尤其适合大规模筛选。
3.极大将细菌的生长密度OD600从2左右提高20以上。
4.极大提高外源蛋白的表达量,最高可占细菌总蛋白的45%。
5.与各种细胞培养容器(如培养瓶、培养罐、深孔管、发酵罐等)兼容。
6.本产品即开即用,非常方便。
7.适用于T7 RNA聚合酶基因由lac启动子控制的任何表达系统,如pET系列。
8.不适用于lacZ或lacY突变的宿主菌。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 成分A | 200ml |
| 成分B | 1.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
使用方法:
一、培养基的配制
1.配制自诱导培养基:将1.25mL溶液B全部加入到200mL的溶液A中即得自诱导培养基。
注意:必须严格无菌操作,否则自诱导培养基非常容易长细菌。
2.贴好标签待用。如果长期时间不用,可以冻存在-20℃。
二、培养基的使用
1.将构建好的质粒转化入细菌,如BL21(DE3),涂于自备的、含有1%葡萄糖的LB培养基中(需要加入适当浓度的抗菌素),37℃培养过夜。
2.挑取单个细菌接种到自备的、含适当浓度抗菌素的液体LB培养基中,37℃培养直到菌液浑浊但不饱和(一般需要6-8小时)。
3.将所得菌液按千分之一的体积比例加入自诱导培养基中(如果自诱导培养基体积是100mL,则加入100μl菌液),同时加入适当的抗菌素。注意:在自诱导培养基中,如果使用卡拉霉素,其终浓度比一般的培养基高,需要100μg/mL。由于本方法所得菌液密度大,故需要大量氧气,因此培养基的体积不能超过三角瓶的五分之一。三角瓶底最好是皱褶式的,这样摇晃中氧气供应更充分。
4.37℃培养过夜,或37℃培养到菌液饱和时降低摇床的温度到所需温度(对温度诱导型启动子)。
5.收集菌液开始蛋白纯化步骤。
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