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正常细胞/肿瘤细胞
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详询
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上皮细胞样
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详询人员
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良好
PubMed=6203805; DOI=10.20772/cancersci1959.75.2_151
Nakabayashi H., Taketa K., Yamane T., Miyazaki M., Miyano K., Sato J.
Phenotypical stability of a human hepatoma cell line, HuH-7, in long-term culture with chemically defined medium.
Gann 75:151-158(1984)
DOI=10.1007/978-4-431-68349-0_4
Alexander J.J.
Human hepatoma cell lines.
(In) Neoplasms of the liver; Okuda K., Ishak K.G. (eds.); pp.47-56; Springer; Tokyo (1987)
DOI=10.11418/jtca1981.12.3_221
Namba M., Nakabayashi H., Doi I., Sato J., Miyazaki M.
Cellular characteristics and utilization of human hepatoma cell lines which were established in our laboratory and distributed by Japanese Cancer Research Resources Bank.
Tissue Cult. Res. Commun. 12:221-227(1993)
细胞名称:HuTu 80 人十二指肠腺癌
组织来源:肠
培养条件:EMEM +10% FBS
形 态:贴壁;上皮母细胞样
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。 4、低温原则 所取样本离体后,应依据样本类型迅速采取低温措施:动物及人体组织、体液等样本应尽快置于干冰或-80℃ 保存;植物样本应尽快置于冰袋或 4℃ 环境冷藏保存,以避免外泌体/囊泡降解。 注意:不接收任何具有传染性和致病性样本。 二、样本制备指南 1、细胞上清 1)细胞在正常含有血清的培养基中培养一定时间,贴壁细胞密度在 70 %-80 %,悬浮细胞密度在 60 %-70 %; 2)对于贴壁细胞,去除原有培养基,加入适量的 PBS 缓冲液冲洗一次,彻底去除血清;对于悬浮细胞,300 g,4°c
,小心收集上清液(血清),立即进行测定。建议在-20℃或-80℃下将收集的血清分装保存,避免反复冻融。 在收集血液样本的过程中应避免溶血,因为红细胞在溶解时会释放具有过氧化物酶活性的物质,这种情况下,ELISA实验中将会出现非特异性显色反应,导致检测结果不准确。另外,样本还应避免细菌污染,因为细菌可能含有内源性HRP,也会导致检测结果不准确。 血浆 使用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液样本,采集后30分钟内,2-8℃下以1000×g离心15分钟,小心收集上清液(血浆)。建议在-20℃或-80
time PCR 之前都要把 sample 离心保证取样的准确。 11、1~10ul 的*取 3ul 以上才比较准确,所以考虑好自己 PCR 反应体系的配置。 12、一个 ChIP 一般需要 3~4 天的时间,其中有几个步骤是可以停下来的: 1)细胞收集:用含蛋白酶抑制剂的 PBS 洗涤离心,去上清的细胞收集液可置 -80° 冻存; 2)用 SDS 重悬细胞后可置 -80° 冻存; 3)sonication 结束,离心后的上清置新的离心管后可 -80° 冻存; 4)reverse cross
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