北京现货双链DNA定量检测试剂盒批发

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京现货双链DNA定量检测试剂盒批发，产品信息：

类别：核酸电泳和回收

英文名：Picogreen dsDNA Assay Kit

产品名	产品编号	包装规格
双链DNA定量检测试剂盒	SY0260	2000T

编号：SY0260

规格：2000T

英文名：Picogreen dsDNA Assay Kit

Picogreen是一种极为灵敏的荧光核酸染料，常用于双链DNA的定量检测。历来DNA浓度的测定在cDNA文库的构建，DNA亚克隆、PCR产物的估测等领域中具有重要意义，疫苗等生物制品中残留微量DNA的检测更是直接关系到人类的健康。

 

常用的检测核酸的方法有:1）紫外吸光法（A260），该法操作简便，但DNA样品中核苷酸、单链DNA、RNA和蛋白质对紫外吸收信号影响很大，还容易受到核酸样品中污染物的干扰，不能区分DNA和RNA，而且灵敏度低（ΔA260=0.1相当于5ug/ml的dsDNA）；2）探针杂交法，该法是传统检测微量DNA的常用方法，基本能满足目前疫苗和治疗性生物制品的检测需求，但是该法耗时较长，操作繁琐，稳定性、敏感性和特异性较差；3）Hoechst33258染料法，Hoechst33258是一种一定程度上特异于双链DNA的核酸染料，基本不受蛋白质等污染物的干扰，可以检测低至10ng/ml的DNA；在检测稳定性和灵敏度上仍达不到理想效果。

 

Picogreen dsDNA定量法：Picogreen仅在与DNA双链结合后才发出荧光，且所产生的荧光与DNA浓度呈正比，在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下，可以选择性地检测低至25pg/ml的dsDNA。该分析在三个数量级范围内呈线性，且几乎无序列依赖性，可以精确地测量多个来源的DNA，包括基因组DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR扩增产物。

 

相比传统的方法，Picogreen dsDNA Quantitation Reagent定量具有以下优势：

①灵敏度高：数量级较UV吸光读数更敏感，可节省宝贵的样品；

②特异性强：在等摩尔的RNA存在的条件下，对dsDNA具有特异性；

③耐受性好：耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、*仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖，可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。

④易于使用——只需在样品中加入染料，等待5分钟，然后读数即可，且适用于96和384孔板；与大多数基于荧光的酶标仪和荧光计兼容。

⑤适用范围广：可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。

 

若每次分析体积为2 mL，本试剂盒各组分试剂足够200次分析使用，若使用微孔板或96孔板检测，每次使用量200µl，则各组分试剂足够2000次分析。

 

产品组份：

 

组分名称	产品编号/规格	保存
dsDNA Quantitation Reagent	100µl×10	2～6℃避光干燥
2×TE buffer	50ml	2～6℃（短期）或-20℃（长期）
Calf thymus DNA standard (100µg/ml)	1ml	2～6℃（短期）或-20℃（长期）

 

注意事项

 

1）Picogreen定量试剂含有DMSO（已知有毒试剂），请小心操作；

2）尽管目前尚未有数据表明Picogreen具有诱变性和毒性，但是该试剂能结合双链DNA，请操作时务必小心。

 

试剂准备

1）1×TE buffer 的配制：将2×TE 用无菌去离子水（不含Dnase）等体积稀释至1×工作液。

2）PicoGreen工作液的配制：使用前将PicoGreen dsDNA定量试剂回温至室温；PicoGreen是以100µL 200×的浓缩液形式保存于无水DMSO中的（共10管）。实验当天，根据实验需求用1×TE按1:200 的比例稀释适量定量试剂浓缩液。例如要准备足够的操作溶液以2ml检测体系测定20个样品，可向19.9mL1×TE 中加入100μL PicoGreen dsDNA 定量试剂。

【注】：

a、由于试剂容易吸附到玻璃表面，要在塑料容器中配制。

b、PicoGreen 试剂见光易降解，所以应将配好的溶液用铝箔包住或放置暗处避光保存。

c、溶液最好在配制好数小时内使用，以保证最佳结果。

 

检测步骤

1、 2µg/ml的Calf thymus DNA standard浓缩液的配制

用1×TE对Calf thymus DNA standard (100µg/ml)进行50倍稀释，即向30µl Calf thymus DNA standard加入1.47ml 1×TE混匀即可。

2、 标准曲线的制备

① 比色皿体系检测---（2ml）

a、按照表1 向一次性微量比色皿中加入TE和2µg/ml Calf thymus DNA standard，随后加入1ml PicoGreen定量试剂，混匀后，于室温避光孵育2-5min，并以1×TE缓冲液为blank。

【注】：确信不要在样品中引入气泡，轻轻地弹微量检测皿的外部，可以驱散气泡。

 

 

TE (µl)	2µg/ml Calf thymus DNA standard (µl)	稀释的PicoGreen定量试剂(µl)	Calf thymus DNA standard终浓度
0	1000	1000	1µg/ml
900	100	1000	100ng/ml
990	10	1000	10ng/ml
999	1	1000	1ng/ml
1000	0	1000	blank

 

表1 比色皿体系所需加入各组分量及标准品终浓度表

 

b、于荧光仪中检测各浓度荧光值，Ex/Em=480nm/520nm。

【注】：为了确保荧光读数在荧光仪的检测范围内，应调节增益使含最高DNA浓度的样品荧光值与荧光仪的最大值一致；为了减少光漂白，应保持所有样品的检测时间一致。

c、各浓度得到的荧光值减去空白对照荧光值，对DNA浓度和荧光值做标准曲线。

② 微孔板体系检测（200µl）

a、按照表2 向96孔板中加入TE和2µg/ml Calf thymus DNA standard，随后加入100µl PicoGreen定量试剂，混匀后，于室温避光孵育2-5min，并以1×TE缓冲液为blank。【注】：确信不要在样品中引入气泡，轻轻地弹微量检测皿的外部，可以驱散气泡。

 

 

TE (µl)	2µg/ml Calf thymus DNA standard (µl)	稀释的PicoGreen定量试剂(µl)	Calf thymus DNA standard终浓度
0	100	100	1µg/ml
90	10	100	100ng/ml
99	1	100	10ng/ml
99.9	0.1	100	1ng/ml
100	0	100	blank

 

表1 酶标板体系所需加入各组分量及标准品终浓度表

 

b、于荧光酶标仪中检测各浓度荧光值，Ex/Em=480nm/520nm。

【注】：为了确保荧光读数在荧光仪的检测范围内，应调节增益使含最高DNA浓度的样品荧光值与荧光仪的最大值一致；为了减少光漂白，应保持所有样品的检测时间一致。

北京现货双链DNA定量检测试剂盒批发专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：SY0260,双链DNA定量检测试剂盒,Picogreen dsDNA Assay Kit

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编号	类别	名称
SY0395	蛋白质研究	谷胱甘肽琼脂糖树脂(用于GST标签蛋白纯化)
SY0721	二抗	Alexa Fluor 488标记驴抗小鼠IgG(H+L)
SY0544	其他细胞生物学试剂	支原体去除试剂2(100X)
SY0517	其他培养基	*化可的松
SY0675	二抗	Alexa Fluor 488标记山羊抗兔IgG(H+L)F(ab)2片段
SY0322	蛋白质研究	预活化正钒酸*溶液
SY0649	一抗	小鼠抗Flag-Tag单克隆抗体(DYKDDDDK)
SY0496	细胞凋亡与增殖	DAPI染液(即用型)
SY0778	免疫检测	免疫染色用一抗二抗稀释液
SY0307	蛋白质研究	十二烷基硫*(代"酸")*(分子生物学级)
SY0235	报告基因检测	腔肠素h
SY0559	探针标记及检测	7-*基放线菌*(代"素")D
SY0248	核酸电泳和回收	强力*化乙锭去除剂
SY0238	报告基因检测	腔肠素cp
SY0001	DNA纯化	蛋白酶K
SY0587	探针标记及检测	糖原PAS染色试剂盒
SY0060	报告基因检测	VDR萤火虫荧光素酶报告基因质粒
SY0457	蛋白质研究	牛脱铁转铁蛋白
SY0406	蛋白质研究	5ml重力层析空柱
SY0062	报告基因检测	STAT1萤火虫荧光素酶报告基因质粒
SY0190	报告基因检测	Oct4-GFP报告基因质粒
SY0274	RNA纯化	快速核酸银染试剂盒
SY0484	细胞凋亡与增殖	广谱Caspase抑制剂(Z-VAD-FMK)(20mM)

 

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