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Picogreen dsDNA Assay Kit
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货双链DNA定量检测试剂盒批发是高品质的核酸电泳和回收产品,由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多双链DNA定量检测试剂盒等核酸电泳和回收产品请联系我司咨询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京现货双链DNA定量检测试剂盒批发,产品信息:
类别:核酸电泳和回收
英文名:Picogreen dsDNA Assay Kit
产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
双链DNA定量检测试剂盒 | SY0260 | 2000T |
编号:SY0260
规格:2000T
英文名:Picogreen dsDNA Assay Kit
Picogreen是一种极为灵敏的荧光核酸染料,常用于双链DNA的定量检测。历来DNA浓度的测定在cDNA文库的构建,DNA亚克隆、PCR产物的估测等领域中具有重要意义,疫苗等生物制品中残留微量DNA的检测更是直接关系到人类的健康。
常用的检测核酸的方法有:1)紫外吸光法(A260),该法操作简便,但DNA样品中核苷酸、单链DNA、RNA和蛋白质对紫外吸收信号影响很大,还容易受到核酸样品中污染物的干扰,不能区分DNA和RNA,而且灵敏度低(ΔA260=0.1相当于5ug/ml的dsDNA);2)探针杂交法,该法是传统检测微量DNA的常用方法,基本能满足目前疫苗和治疗性生物制品的检测需求,但是该法耗时较长,操作繁琐,稳定性、敏感性和特异性较差;3)Hoechst33258染料法,Hoechst33258是一种一定程度上特异于双链DNA的核酸染料,基本不受蛋白质等污染物的干扰,可以检测低至10ng/ml的DNA;在检测稳定性和灵敏度上仍达不到理想效果。
Picogreen dsDNA定量法:Picogreen仅在与DNA双链结合后才发出荧光,且所产生的荧光与DNA浓度呈正比,在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下,可以选择性地检测低至25pg/ml的dsDNA。该分析在三个数量级范围内呈线性,且几乎无序列依赖性,可以精确地测量多个来源的DNA,包括基因组DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR扩增产物。
相比传统的方法,Picogreen dsDNA Quantitation Reagent定量具有以下优势:
①灵敏度高:数量级较UV吸光读数更敏感,可节省宝贵的样品;
②特异性强:在等摩尔的RNA存在的条件下,对dsDNA具有特异性;
③耐受性好:耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、*仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖,可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。
④易于使用——只需在样品中加入染料,等待5分钟,然后读数即可,且适用于96和384孔板;与大多数基于荧光的酶标仪和荧光计兼容。
⑤适用范围广:可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。
若每次分析体积为2 mL,本试剂盒各组分试剂足够200次分析使用,若使用微孔板或96孔板检测,每次使用量200µl,则各组分试剂足够2000次分析。
产品组份:
组分名称 | 产品编号/规格 | 保存 |
dsDNA Quantitation Reagent | 100µl×10 | 2~6℃避光干燥 |
2×TE buffer | 50ml | 2~6℃(短期)或-20℃(长期) |
Calf thymus DNA standard (100µg/ml) | 1ml | 2~6℃(短期)或-20℃(长期) |
注意事项
1)Picogreen定量试剂含有DMSO(已知有毒试剂),请小心操作;
2)尽管目前尚未有数据表明Picogreen具有诱变性和毒性,但是该试剂能结合双链DNA,请操作时务必小心。
试剂准备
1)1×TE buffer 的配制:将2×TE 用无菌去离子水(不含Dnase)等体积稀释至1×工作液。
2)PicoGreen工作液的配制:使用前将PicoGreen dsDNA定量试剂回温至室温;PicoGreen是以100µL 200×的浓缩液形式保存于无水DMSO中的(共10管)。实验当天,根据实验需求用1×TE按1:200 的比例稀释适量定量试剂浓缩液。例如要准备足够的操作溶液以2ml检测体系测定20个样品,可向19.9mL1×TE 中加入100μL PicoGreen dsDNA 定量试剂。
【注】:
a、由于试剂容易吸附到玻璃表面,要在塑料容器中配制。
b、PicoGreen 试剂见光易降解,所以应将配好的溶液用铝箔包住或放置暗处避光保存。
c、溶液最好在配制好数小时内使用,以保证最佳结果。
检测步骤
1、 2µg/ml的Calf thymus DNA standard浓缩液的配制
用1×TE对Calf thymus DNA standard (100µg/ml)进行50倍稀释,即向30µl Calf thymus DNA standard加入1.47ml 1×TE混匀即可。
2、 标准曲线的制备
① 比色皿体系检测---(2ml)
a、按照表1 向一次性微量比色皿中加入TE和2µg/ml Calf thymus DNA standard,随后加入1ml PicoGreen定量试剂,混匀后,于室温避光孵育2-5min,并以1×TE缓冲液为blank。
【注】:确信不要在样品中引入气泡,轻轻地弹微量检测皿的外部,可以驱散气泡。
TE (µl) | 2µg/ml Calf thymus DNA standard (µl) | 稀释的PicoGreen定量试剂(µl) | Calf thymus DNA standard终浓度 |
0 | 1000 | 1000 | 1µg/ml |
900 | 100 | 1000 | 100ng/ml |
990 | 10 | 1000 | 10ng/ml |
999 | 1 | 1000 | 1ng/ml |
1000 | 0 | 1000 | blank |
表1 比色皿体系所需加入各组分量及标准品终浓度表
b、于荧光仪中检测各浓度荧光值,Ex/Em=480nm/520nm。
【注】:为了确保荧光读数在荧光仪的检测范围内,应调节增益使含最高DNA浓度的样品荧光值与荧光仪的最大值一致;为了减少光漂白,应保持所有样品的检测时间一致。
c、各浓度得到的荧光值减去空白对照荧光值,对DNA浓度和荧光值做标准曲线。
② 微孔板体系检测(200µl)
a、按照表2 向96孔板中加入TE和2µg/ml Calf thymus DNA standard,随后加入100µl PicoGreen定量试剂,混匀后,于室温避光孵育2-5min,并以1×TE缓冲液为blank。【注】:确信不要在样品中引入气泡,轻轻地弹微量检测皿的外部,可以驱散气泡。
TE (µl) | 2µg/ml Calf thymus DNA standard (µl) | 稀释的PicoGreen定量试剂(µl) | Calf thymus DNA standard终浓度 |
0 | 100 | 100 | 1µg/ml |
90 | 10 | 100 | 100ng/ml |
99 | 1 | 100 | 10ng/ml |
99.9 | 0.1 | 100 | 1ng/ml |
100 | 0 | 100 | blank |
表1 酶标板体系所需加入各组分量及标准品终浓度表
b、于荧光酶标仪中检测各浓度荧光值,Ex/Em=480nm/520nm。
【注】:为了确保荧光读数在荧光仪的检测范围内,应调节增益使含最高DNA浓度的样品荧光值与荧光仪的最大值一致;为了减少光漂白,应保持所有样品的检测时间一致。
北京现货双链DNA定量检测试剂盒批发专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:SY0260,双链DNA定量检测试剂盒,Picogreen dsDNA Assay Kit
我公司是一家生物高新技术企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销*(代"售")。并代理销*(代"售")Omega、Sigma、R&D、GBD、ATCC、HYCLONE等二十多家国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务,满足生物化学、分子生物学 、双链DNA定量检测试剂盒、细胞生物学、免疫学 ELISA试剂盒等生物科技实验需求。
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编号 | 类别 | 名称 |
SY0395 | 蛋白质研究 | 谷胱甘肽琼脂糖树脂(用于GST标签蛋白纯化) |
SY0721 | 二抗 | Alexa Fluor 488标记驴抗小鼠IgG(H+L) |
SY0544 | 其他细胞生物学试剂 | 支原体去除试剂2(100X) |
SY0517 | 其他培养基 | *化可的松 |
SY0675 | 二抗 | Alexa Fluor 488标记山羊抗兔IgG(H+L)F(ab)2片段 |
SY0322 | 蛋白质研究 | 预活化正钒酸*溶液 |
SY0649 | 一抗 | 小鼠抗Flag-Tag单克隆抗体(DYKDDDDK) |
SY0496 | 细胞凋亡与增殖 | DAPI染液(即用型) |
SY0778 | 免疫检测 | 免疫染色用一抗二抗稀释液 |
SY0307 | 蛋白质研究 | 十二烷基硫*(代"酸")*(分子生物学级) |
SY0235 | 报告基因检测 | 腔肠素h |
SY0559 | 探针标记及检测 | 7-*基放线菌*(代"素")D |
SY0248 | 核酸电泳和回收 | 强力*化乙锭去除剂 |
SY0238 | 报告基因检测 | 腔肠素cp |
SY0001 | DNA纯化 | 蛋白酶K |
SY0587 | 探针标记及检测 | 糖原PAS染色试剂盒 |
SY0060 | 报告基因检测 | VDR萤火虫荧光素酶报告基因质粒 |
SY0457 | 蛋白质研究 | 牛脱铁转铁蛋白 |
SY0406 | 蛋白质研究 | 5ml重力层析空柱 |
SY0062 | 报告基因检测 | STAT1萤火虫荧光素酶报告基因质粒 |
SY0190 | 报告基因检测 | Oct4-GFP报告基因质粒 |
SY0274 | RNA纯化 | 快速核酸银染试剂盒 |
SY0484 | 细胞凋亡与增殖 | 广谱Caspase抑制剂(Z-VAD-FMK)(20mM) |
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