TCEP·HCl现货供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")TCEP·HCl现货供应，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：TCEP·HCl现货供应
编号：SY0361
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：TCEP Hydrochloride
规格：1g
本品适用于凝胶电泳以及固相金属离子亲和层析（IMAC）的准备步骤，用作还原剂来破坏蛋白内或蛋白间的二硫键。也特别适用于马来酰亚胺偶联半胱*酸残基反应，它能够预防半胱*酸残基形成二硫键，也不会像DTT或β-ME，本身易与马来酰亚胺反应。RNA分离实验也常用于组织匀浆步骤。

三(2-羧乙基)膦盐*(代"酸")盐（TCEP hydrochloride, TCEP·HCl）是一种不含硫醇基且无臭的化合物，广泛应用于生物化学和分子生物学中，用作多肽或蛋白质的二硫键还原剂。与其他类似的还原剂如二硫苏糖醇（DTT），β-巯基乙醇（β-ME）相比，TCEP·HCl 具有多种优点：1）无异味——实验台上使用即可，勿需通风橱；2）稳定性高——化合物本身结构的稳定性使得在操作、使用以及保存的过程中不需要做任何预防措施来避免氧化发生。不会挥发，室温反应即可。室温稳定，抗空气氧化。水溶性缓冲液，酸液以及碱液中稳定。不会与蛋白中的其他功能基反应；3）pH工作范围广——几乎溶于任何pH值的水溶性缓冲液，pH有效工作范围为1.5-9.0。直接溶于水后的pH值约为2.5；4）还原性强——对于大部分实验，5-50 mM TCEP·HCl即可提供足够的摩尔力，于室温条件作用几分钟来充分还原二硫键；5）兼容性广——不含有硫醇基，进行下游的巯基修饰实验如马来酰亚胺偶联不需要提前去除此还原剂。

中文别名：TCEP盐*(代"酸")盐；三(2-酰乙基)磷盐*(代"酸")盐；三(2-甲酰乙基)膦盐*(代"酸")盐
英文别名：Tris-(2-carboxyethyl)-phosphine hydrochloride
CAS：51805-45-9
分子式：C9H15O6P·HCl
分子量：286.7
密度（Density）：1.041 g/mL at 25 ℃
外观：白色晶体
熔点：177℃
溶解性：溶于水（50mg/mL）
纯度：＞99%
储存条件：2～8℃保存，避光和避潮
结构式：


注意事项
1) 本品在磷酸盐缓冲液中，尤其是中性或碱性pH条件下，不是特别稳定。因此若要在PBS缓冲液中使用本品，工作液必须现配现用。
2) 本品在溶液中带电荷，因此不适用于等电聚焦实验。
3) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

除TCEP·HCl现货供应外，我公司正在打折促销以下产品：

·DyLight 405标记山羊抗兔IgG(H+L)
编号：SY0668
英文名称：DyLight 405-AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)
规格：100μl
本品为DyLight 405标记山羊抗兔IgG(H+L)。推荐稀释比例：1:25～100。

本品是使用抗原偶联的琼脂糖微珠从山羊抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的兔IgG分子，也会与其他兔免疫球蛋白的轻链结合。可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应，但不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。该荧光基团Amax（最大激发波长）为400nm，Emax（最大发射波长）为420nm。

本品适合做单标实验，广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学（ICC），流式细胞术（FC）以及免疫组化（IHC）等。要做多标（multiple-labeling）实验，建议使用与相近物种的血清蛋白或者免疫球蛋白预先经过亲和吸附处理的二抗。

浓度：0.75mg/ml
缓冲液：0.005M 磷酸*，0.125M *化*, pH 7.6
稳定剂：7.5mg/ml BSA（无IgG，蛋白酶），50% 甘油
荧光素：DyLightTM 405, Amax=400, Emax=420
防腐剂：0.025% 叠氮化*
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

·聚凝胺
编号：SY0605
英文名称：Polybrene (hexadimethrine bromide)
规格：500ul
聚凝胺是一种多聚阳离子聚合物，常用于哺乳动物细胞的DNA转染实验以增强脂质体的转染效率。Polybrene目前广泛用于逆转录病毒介导的基因转染，慢病毒介导的基因转染，作用机理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥从而促进吸附作用。Polybrene也是一种有名的抗肝素剂（肝素拮抗剂），常用来生产非特异性凝集的红细胞。另外Polybrene也多用于蛋白测序，因为小剂量的Polybrene在自动测序分析可明显改善多肽的降解现象。PVDF膜加入polybrene还能提高膜的亲和性。

本产品为即用型溶液，粉末用0.9%NaCl配置成10mg/ml的溶液，并用0.22μM滤膜过滤除菌。使用时一般按1:1000-1：2000稀释，依细胞种类不同稀释比例不同，具体查阅相关文献。
注：Polybrene对某些细胞（如末端分化的神经元，DC细胞）毒性较大，初次应用建议先做毒性测试。

操作步骤(仅供参考，具体使用浓度请参考相关文献)

实验1：逆转录病毒感染（Retroviral Infection）
（1）重组逆转录病毒原液的制备：取5ml生长培养基（5%血清）加入约含单层转染逆转录包装细胞的100mm培养盘内。孵育24h后，吸去培养液并用0.45μm滤器过滤。
（2）待感染细胞的培养：100mm培养盘内加入10ml完全培养基，细胞密度为5×105/盘。
（3）病毒感染：细胞培养24h后，吸去完全培养液。用含polybrene的2ml病毒上清 （或将病毒原液稀释到2ml）感染细胞，polybrene的终浓度为5μg-10μg/ml。37℃孵育3-6h。
（4）收集病毒颗粒：加入8ml完全培养基。感染3天后，按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。

实验2：转染
（1）完全生长培养基培养细胞，培养细胞密度约50%；
（2）孵育细胞18-24h后准备DNA-培养基- Polybrene混合液，按如下操作制备混合液：①添加完全培养基（60mm培养皿2ml，100mm培养皿3ml），37℃预热；②添加10ng~10µg质粒轻轻混匀；③加入Polybrene至终浓度为5μg-10μg/ml。轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。
（3）去除培养基，在细胞中加入DNA-培养基-Polybrene溶液，在37℃孵育细胞6-20h。细胞培养的前6h内约每1.5h轻柔混匀。
（4）去除DNA-培养基-Polybrene溶液。用DMSO shock solution（15%DMSO in 1X HBSS）轻轻盖住细胞（60mm培养皿3ml，100mm培养皿4ml）。每次加入溶液时用手轻晃培养盘10s，使得液体均匀分布。然后37℃孵育细胞4min。
（5）立即去除DMSO shock solution，用完全生长培养基轻轻清洗细胞2次。对于60mm培养皿每次用5ml培养液清洗，100mm培养皿每次用10ml培养液清洗。
（6）加入完全培养基到细胞中；
（7）稳定转化：去除生长培养基，按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。
瞬时表达：去除生长培养基，加入新鲜的生长培养基。24-72h后收获细胞。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期2年。


TCEP·HCl现货供应关键词：三(2-甲酰乙基)膦盐*(代"酸")盐,三(2-酰乙基)磷盐*(代"酸")盐,TCEP盐*(代"酸")盐,TCEP·HCl

ARB12523 大鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)Elisa方法检测 Rat heat shock protein glycoprotein 96,hsp gp96 ELISA KIT
ARB11925 大豆凝集素(SBA)含量检测 soybean agglutinin,sba ELISA KIT
SJ0234 DMEM/F-12
ARB10580 人吖啶橙(AO)elisa测定使用说明书 Human acrine orange,ao ELISA KIT
F020223 兔抗豚鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Guinea Pig IgG
ARB12874 小鼠可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)血清中含量检测 Mouse soluble myosin heavy chain 1,smhc-1 ELISA KIT
偶氮脒类引发剂V59 Amprolium hydrochloride 13472-08-*(代"7")
PY02-013-1  营养肉汤(GB)  250克  
BL1098 RPMI Medium 1640
BL0850 兔抗山羊IgG纯化抗体
BL1310 2×Taq PCR MasterMix(不含染料)
ARB13519 鱼类超敏C反应蛋白(hs-CRP)elisa检测操作说明书 Fish high sensitivity c-reactive protein,hs-crp ELISA KIT
F040108 鸡卵清蛋白偶联莱克多巴胺 OVA-RAC
7235-40-7 β-胡萝卜素(原装) β-Carotene
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·天然腔肠荧光素
编号：SY0234
英文名称：Coelenterazine Native
规格：1×500μg
本品为粉末形式供应的天然腔肠素（Coelenterazine native），是海肾荧光素酶（Rluc）和Gaussia荧光素酶（Gluc）等多种荧光素酶的作用底物，也是水母发光蛋白的辅助因子，应用非常广泛，可用于检测活细胞中*离子浓度，基因报告分析，BRET（生物发光共振能量转移）研究，ELISA，HTS，以及组织或细胞中ROS水平的化学发光检测。

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。

腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET），利用此特性，当与荧光蛋白如GFP的突变体（增强的黄色荧光蛋白，EYFP）联合使用，在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量随之转移到EYFP上，发出绿光（~530nm）。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估，适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外，由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量，适用于高通量筛选如药物开发。

更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当*离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内*离子水平。与常规的荧光*离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点，1）能检测较大范围的*浓度 – 从0.1 μM至 >100μM；2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光*离子指示剂；虽然信号比使用荧光*离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的*离子监测。



目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素（Coelenterazine native），另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验，但是由于其发光波长，细胞膜渗透性，光量子效率上的差异，使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物（见附录1，腔肠素及其衍生物的特性）。

中文别名：天然腔肠素；腔肠素游离酸
英文别名：3,2-Dihydro-2-(p-hydroxybenzyl)-6-(p-hydroxyphenyl)-8-benzylimidazolo[1,2-a] pyrazin-3-one CLZN; Renilla luciferin; Coelenterazine free base
CAS：55779-48-1
分子式：C26H21N3O3
分子量：423.46 g/mol
外观：棕黄色粉末
溶解性：溶于甲醇或者乙醇，不可溶于DMSO
纯度：＞95%（TLC）
结构：


注意事项
1) 腔肠素粉末或者储存液最好使用惰性气体-氮气或氩气，在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃，长期保存于-80℃。管内即使有少量空气进入，也可能造成腔肠素氧化失活，使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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