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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的北京BTN60401型75%乙醇(RNase-Free)现货用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多75%乙醇(RNase-Free)等生化试剂产品请联系我司咨询订购。
名称:北京BTN60401型75%乙醇(RNase-Free)现货
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:250mL
编号:BTN60401
想要了解更多关于北京BTN60401型75%乙醇(RNase-Free)现货的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
DL-异亮*酸 Fenofibrate 443-79-8
ARB12892 小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)含量测试 Mouse alpha-fetoprotein,afp ELISA KIT
BL0956 胶体金标记兔抗鸡IgG抗体
ARB13701 兔环磷酸腺苷(cAMP)Elisa分析 Rabbit cyclic adenosine monophosphate,camp ELISA KIT
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ARB13795 豚鼠肠脂肪酸结合蛋白(IFABP)含量测试 Guinea pig intestinal fatty acid binding protein,ifabp ELISA KIT
CYB161040 猪IgG(液体-pH7.2PBS)
α-半乳糖苷酶 SP Sephadex C-25 9025-35-8
BTN120698 青霉素G*盐溶 Penicillin G Sodium Solution
BL1212 抗酸染色液(试剂盒)
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北京BTN60401型75%乙醇(RNase-Free)现货关键词:百奥莱博,75%乙醇,RNase-Free,BTN60401,75%乙醇(RNase-Free)
·亲和硅烷
编号:BTN90308
英文名称:Binding Silane
规格:25mL
本产品为一定浓度的Silane A174,其全名是3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷,CAS号是2530-85-0,分子量是280.35。主要用于制备PAGE胶时,处理其中一块玻璃板,使附着的凝胶不易被剥离。本产品最好跟剥离硅烷结合使用。但本产品不能用于硅化玻璃器皿。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
·改良Lowry法蛋白定量试剂盒
编号:BTN101102
英文名称:Enhanced Lowry Assay Kit
规格:1000次
Folin酚试剂(磷钼酸和磷钨酸混合物)跟蛋白质中含酚*基酸(色*酸和酪*酸)发生颜色反应,可用于测定蛋白质浓度,但灵敏度较低。Lowry在此基础上加入Biuret(双缩脲)反应步骤,即先在碱性条件下使蛋白质和Cu+形成复合物,再使其与Folin酚试剂发生显色反应,产物在750nm检测。
Lowry法使不含酚的蛋白质也能被检测出来,灵敏度是单独使用Folin酚的10倍左右,是双缩脲反应的200倍,因此成为早期检测蛋白浓度的主要方法。传统Lowry法受到很多常用的试剂(如DTT、糖、甘油、Triton等)干扰,步骤繁琐。本公司对Lowry法进行改良。
Lowry检测原理图如下:

产品特点:
1.即开即用,不需要单独购买每个成分再配制。
2.能抵抗部分干扰物(如一定浓度SDS或其他去污剂)的干扰。
3.检测线性范围广,在2-100μg,检测上限比经典Lowry法高30%-40%。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A成分一 | 208ml |
| 溶液A成分二 | 16ml |
| 溶液A成分三 | 16ml |
| 溶液B | 80ml |
| 溶液C | 80ml |
| 福林酚 | 10mL(用100mL 棕色瓶) |
| BSA标准品(2mg/mL in水) | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存(但BSA 标准品需要-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
一、准备工作
1.制备溶液A:将16mL溶液A成分二和16mL溶液A成分三加入到装溶液A成分一的塑料瓶中,混合均匀得到240mL溶液A。注意:溶液A各成分分开提供更加稳定。
2.制备 Lowry工作液:将溶液A、溶液B和溶液C按3:1:1的体积比混合得到Lowry工作液。此工作液可以室温放置2-3周,所以最好用多少配多少。如果发现溶液B或溶液C有沉淀,需37℃溶解并摇匀后再使用。
3.制备福林酚工作液:在装有10mL 福林酚的棕色塑料瓶中加入90mL 去离子水,摇晃混匀待用。此工作液在避光条件下可以放置6个月。
二、试管法
4.先用去离子水将BSA 标准(2mg/mL)稀释到50μg/mL,然后在标记的试管中加入下列成分(单位:μL)。注意:每个样品最好做三个稀释度,每个稀释度最好设置三次重复,阴性对照和标准品也最好做三次重复。
| 标准品(每个做三次重复,此处只列出一个) | |||
| 编号 | BSA 标准(50μg/mL) | 水 | 总体积 |
| 阴性对照 | 0 | 0 | 200 |
| 1 | 0 | 200 | 200 |
| 2 | 25 | 175 | 200 |
| 3 | 50 | 150 | 200 |
| 4 | 100 | 100 | 200 |
| 5 | 150 | 50 | 200 |
| 6 | 200 | 0 | 200 |
| 样品(以1个样品、3个稀释度为例,每个稀释度三个重复,此处只列出一个) | ||
| 编号 | 样品 | 总体积 |
| 1 | 200(稀释度1) | 200 |
| 阴性对照1 | 200(用稀释度1稀释的溶解蛋白样品的缓冲液) | 200 |
| 2 | 200(稀释度2) | 200 |
| 阴性对照2 | 200(用稀释度2稀释的溶解蛋白样品的缓冲液) | 200 |
| 3 | 200(稀释度3) | 200 |
| 阴性对照3 | 200(用稀释度3稀释的溶解蛋白样品的缓冲液) | 200 |
5.每管中加入200μl Lowry工作液,振荡混匀后室温反应10分钟。
6.每管中加入100μl 福林酚工作液,振荡混匀后室温反应30分钟。
7.用容量为0.5mL、光径为1 cm的玻璃比色杯或聚*乙*(代"烯")比色杯测定750nm的光吸收。测定时,先空白(即阴性对照)后样品,测定样品和BSA标准品时,先低浓度后高浓度。测定未知样品前需要将杯子清洗干净,必要时可以用甲醇清洗吸附到比色杯壁上的染料。
8.根据标准品三个重复的平均值绘制标准曲线,然后根据未知样品的光吸收从标准曲线中查得其对应的浓度。
三、96微孔板法
9.同上,只是反应用96 微孔板设置,用酶标测试仪750nm 测定光吸收。
四、样品中干扰物质的去除(本产品不含相关产品,如果样品中有干扰Lowry法蛋白定量的物质(见附表),可另购本公司的微量蛋白质沉淀试剂盒(BTN81217)去除,也可以用自备试剂按下法去除:用水将样品调到体积为200μl,加入20μl 0.15%去氧胆酸*,混匀,室温放置10分钟。加入20μL 72%的TCA,室温放置5分钟。3000 g离心15分钟,小心去除上清。用200μl水溶解蛋白沉淀后以用于Lowry法测定。
附:常见Lowry法蛋白定量干扰物(低于所列浓度不干扰,高于所列浓度则会干扰,需要按上法去除。不能含任何浓度的DTE,DTT和硫*(代"酸")胺)。
| 干扰物 | 浓度 | 干扰物 | 浓度 |
| Acetone | 10% | 2-Mercaptoethanol | 1mM |
| Aprotinin | 10mg/mL | NaCl | 1 M |
| CHAPS | 0.05% | NaOH | 100mM |
| DMF | 10% | NaPi | 100mM |
| DMSO | 10% | NP40 | 0.02% |
| EDTA | 1mM | PMSF | 1mM |
| EGTA | 1mM | SDS | 1% |
| Ethanol | 10% | Sodium Citrate | 100mM |
| Glucose | 100mM | Sucrose | 7% |
| Glycin | 100mM | Tris | 10mM |
| HEPES | 1mM | Trition X-100 | 0.03% |
| Imidazole | 25mM | Tween 20 | 0.05% |
| Methanol | 10% | Urea | 3M |
疑难解答:
1. 该方法检测的蛋白质浓度范围1μg~50μg/ml。
2. 由于Lowry法测定的是蛋白质中酪*酸残基,对于那些酪*酸残基数高于或低于BSA,其测定的蛋白质含量将偏低或偏高。如果遇到该情况,需要采用BCA或Bradford法测定。
3. 阅读测定方法后化学试剂对测定方法的影响。
北京BTN60401型75%乙醇(RNase-Free)现货关键词:百奥莱博,75%乙醇,RNase-Free,BTN60401,75%乙醇(RNase-Free)
我公司立足北京,辐射全国。随着产品战略的不断延伸,产品理念的不断完善,百奥莱博将逐步成长为一流的生化试剂供应商,并一如既往的为您提供优质的75%乙醇(RNase-Free)和完善的售后服务,与您一起携手整合各自的优势资源,竭尽全力支持您的事业,为中国生命科学的发展贡献一份力量。
·柱式藻类RNA大量提取试剂盒
编号:BTN120504
英文名称:Algae RNA Column large-scale extraction kit
规格:5次
本试剂盒是在本公司柱式藻类RNA提取试剂盒(BTN120503)的大提升级产品,跟柱式藻类RNA提取试剂盒相比,它具有下列特点:
1.样品处理量大,最多可以处理50mL液体藻类培养物。
2. 操作简单快捷,整个过程只需要约30分钟。
3. RNA 纯度高,OD260/280一般都在2.0左右,可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA 合成等。
4. RNA产量高,一般在20-70μg/mL液体藻类培养物(约2.0×107个细胞)。非酶细胞破裂法,适用于各种形态的藻类和各个种属的藻类。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 50ml |
| 溶液C | 150ml |
| 溶液D | 50ml |
| 大提离心吸附柱 | 5套 |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| RNA 洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将50mL液体藻类培养物在塑料离心管中5000-7,000rpm 4℃离心1分钟,并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入10mL溶液A并充分吹打混匀。注意:溶液A存放时容易产生沉淀,如果有沉淀,用前请置于65℃融化并充分摇晃均匀。
3. 加入10mL溶液B,剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。注意:不要超过5分钟,否则RNA 容易降解。
5. 5000-7,000rpm 4℃离心3~5分钟,转移上清到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
6.在上清液中加入2mL自备的*仿,充分振荡30秒混匀。
7. 4℃ 5000-7,000rpm离心3~5分钟,转移上清液到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清液(约10mL左右)3倍体积的溶液C和1倍体积的溶液D,充分混匀。如果上清为10mL,则加入30mL溶液C和10mL溶液D。
9. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中,每次转移后需要室温放置2-3分钟以让RNA跟吸附膜充分结合,然后5000-7,000rpm室温离心30-60秒,弃收集管中的穿透液,然后再加入后一批混合液,重复操作,直到混合液全部挂柱。
10. 第一次洗涤:将10mL 通用洗柱液加到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
11. 第二次洗涤:一次洗涤一般足够去除杂质,但如果样品OD260/280 比值不高,可以再用10mL 通用洗柱液重复上步洗涤一次。
12.室温离心空柱子(带收集管)半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 50mL塑料离心管中,加入1mL RNA 洗脱液。
14.室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA完整性的电泳检测:
注意:普通DNA上样液不含变性剂,更没经过去RNase处理,所以最好不要用于RNA电泳。
16. RNA产量和纯度产率测定:
将5-10μL RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA 稀释在DEPC 水中检测OD260和OD280,否则光吸收比在TE中测得的低10%-15%;也不要稀释过度,使OD读数在仪器的有效范围之外,这样得到的OD 比值没有意义。
疑难解答:
Q:上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA 吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶,也必须在上样前使RNA变性。使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时,可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2,最好不要使用TBE缓冲液,因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物,RNA 很难形成锐利的条带。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用5分钟柱式DNA 清除剂、非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。
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