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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
Micrococcal Nuclease
- 库存:
888
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
微球菌核酸酶北京价格的品牌:百奥莱博,是优质的工具酶产品,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多微球菌核酸酶等工具酶产品请联系我司咨询订购。
名称:微球菌核酸酶北京价格
英文名:Micrococcal Nuclease
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:BTN120412
微球菌核酸酶是一种内切核酸酶,作用于单链及双链核酸,生成3´磷酸末端。对单链核酸的作用较好,能较好地分解DNA或RNA的富含AT或AU区域。本酶不需要Mg2+,其催化作用需要Ca2+的存在。
产品用途:
➤细胞粗抽提液中核酸的水解。
➤ 为制备核小体时消化分解染色质。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
储存Buffer:Tris-HCl(pH8.0)50mM,NaCl 50mM,DTT 1mM,Glycerol 50%。
反应Buffer(10×):Tris-HCl(pH8.0)200mM,NaCl 50mM,CaCl₂ 25mM。
活性定义:以热变性小牛胸腺DNA作底物,在37℃、pH8.0的条件下,30分钟生成1 OD260的酸可溶性物质所需要的酶量定义为一个活性单位(U)。
纯度:
1.50U的本酶和1μg的λDNA在Mg 存在下,37℃反应10分钟,DNA的电泳谱带不发生变化。
2.SDS-PAGE:>95%。
我公司的微球菌核酸酶北京价格,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·人基因组DNA(女性)
编号:BTN131032
英文名称:Human Genomic DNA(Female)
规格:100μg
本产品为人基因组DNA,来源于多位匿名的捐献者,其中BTN131031为男性基因组DNA;BTN131032为女性基因组DNA。利用脉冲电场凝胶电泳测量,90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括PCR)及基因组文库构建等实验。。
储存条件:低温运输、4℃保存、有效期一年。
·动植物总蛋白微量提取试剂盒
编号:BTN90707
英文名称:Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit
规格:50次
本产品用于快速提取动植物总蛋白,用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析以及蛋白活性测定等。
产品特点:
1. 提取过程十分简便,匀浆离心即可,整个过程只需要十几分钟。
2. 采用独特的温和裂解成分,蛋白保持天然活性。
3.适用于各种动植物组织材料,包括新鲜或冰冻的材料。
4. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。
5.一次可以处理100mg左右的样品,足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 5×SDS-PAGE上样液 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,5×SDS-PAGE上样液短期4℃保存,长期可放-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
使用前,最好请在溶液A中加入自备的1M DTT溶液50μL。
一:匀浆法
注意:对致密的实体组织(如肌肉),最好用Polytron 式匀浆机匀浆处理。
1. 称取动物或植物组织样品100mg,剪刀剪成黄豆大小,转移到10-15mL的塑料离心管中。
2. 加入1ml溶液A,在冰上用Polytron 式匀浆机匀浆,直到没有肉眼可见的组织块。为了避免产热,可以分多次匀浆,其间放冰上让匀浆液冷却。
3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000 g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度,请使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把样品稀释10倍后再测定,否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
二:直接研磨法
注意:可以使用玻璃和陶瓷的研钵,也可以使用与微量离心管式的研磨杵(BTN80603)
1. 称取动物或植物组织样品100mg,剪刀剪成黄豆大小,转移到预冷的研钵或离心管中。
2. 加入1ml溶液A,用研磨杵研磨,直到没有肉眼可见的组织块。
3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度,请使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把样品稀释10倍后再测定,否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
三:液氮研磨法
注意:最好使用玻璃和陶瓷的研钵
1. 取大约100mg动物或植物组织样品,转移到预冷的研钵中。
2. 加入少量液氮,用研磨杵研磨成粉。
3. 加入1ml溶液A溶解,然后将溶液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000 g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度,请使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把样品稀释10倍后再测定,否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5× SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
注意事项:
1.如果4℃ 12000g离心10分钟后得到的上清液中还有可见的沉淀,可以将上清转移到一个新的离心管中后再4℃ 12000g离心10分钟,以去除可见的小碎片。
2.植物组织中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代谢产物,如果需要除去植物蛋白样品中残存的色素等杂质,可以在最后得到的上清液中加入5倍体积的冷丙*(代"酮")或冷甲醇,混匀后-20℃放置1小时或过夜,然后4℃,12000rpm离心10min,弃上清后室温风干,然后将样品溶于自备的后续实验缓冲液中即可。经过此纯化处理后,部分蛋白质可能会发生变性,不能再用于活性检测。
微球菌核酸酶北京价格关键词:Micrococcal Nuclease,BTN120412,微球菌核酸酶
·10%Sarkosyl溶液(不含RNase)
编号:BTN100890
英文名称:RNase-free Sarkosyl
规格:250mL
·剥离硅烷
编号:BTN80935
英文名称:Repeling Silane
规格:200mL
本产品为一定浓度的二*二甲基硅烷(Dichlorodimethylsilane),其分子式为C2H6Cl2Si,分子量为129.06 ,CAS号为75-78-*(代"5")。主要用于制备PAGE胶时,处理其中一块玻璃板,使附着的凝胶易于剥离。本产品最好跟亲和硅烷结合使用。但本产品不能用于硅化玻璃器皿。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
·RNA长效保存液
编号:BTN3100
英文名称:RNA Long-term Preservative Solution
规格:1.5mL
本品是一种能高效抑制RNase活性的新型小分子混合物,用于防止RNase对RNA的降解作用。
产品特点:
1.高效抑制 RNase,保存在 RNA保存液中的RNA可以在抵抗100 ng/mL的RNase A的降解作用达 36小时,效果比人胎盘RNase抑制蛋白和RVC更有效。
2. 耐高温,100℃保温30分钟后活性不受任何影响。
3. 抗氧化,不需要DTT。
4. 有效pH范围广。
5.产品为淡红色液体,可以-20℃保存两年。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| RNA保存液 | 1.5ml |
| LiCl溶液(10M) | 1.5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:4℃运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
将本产品直接用于溶解 RNA沉淀(跟使用 RNase-free 水一样),然后 放置在适当温度下保存(一般在-20℃)。保存在 RNApreserve中的RNA可以直接电泳,不影响Northern杂交。但由于RNA保存液会抑制后续酶反应,所以如果RNA要用于RT-PCR等反应,需要预先用 LiCl沉淀去除RNA保存液(将1/3倍体积的LiCl加入溶液中,4℃12000~15000g离心20-30分钟,弃上清,用75%乙醇洗一次既得RNA沉淀)。
疑难解答:
Q:本产品抑制 RNase的Ki值是多少?
A:本产品是混合物,不能确定其Ki值。
Q:百奥莱博的液相RNase清除剂和RNA保存液都可以保存 RNA,都能灭活/抑制溶液中 2 ng/μL左右的RNase,它们的主要区别何在?
A:一是原理不同。前者通过共价修饰使 RNase 失活(类似于DEPC);后者通过竞争抑制保护 RNA(类似于RNase Inhibitor)。二是兼容性不同。前者与很多后续反应兼容,故 RNA可以直接使用;后者会抑制很多后续反应,需要去除后在使用 RNA。三是稳定性不同。后者比前者更稳定,更耐热。
微球菌核酸酶北京价格关键词:Micrococcal Nuclease,BTN120412,微球菌核酸酶
·农杆菌EHA105化学感受态细胞
编号:BTN140383
英文名称:E.coli EHA105 Chemical Competent Cell
规格:10×100μL
本产品为EHA105农杆菌化学感受态细胞,为C58型背景,核基因中含有筛选标签-利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pEHA105(pTiBo542DT-DNA),此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA 插入植物基因组必需的元件,pEHA105(pTiBo542DTDNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。本产品适用于水稻、烟草等植物的转基因操作,经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达103cfu/μg。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期一年。
自备试剂:质粒DNA、液氮等
使用方法:
转化前准备
1. 冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
2. 无菌条件下,向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒,每100μL感受态细胞加1ug(体积不大于10μl)质粒DNA,轻柔混匀。冰水浴中静置5分钟。
3. 将离心管置于液氮中速冻5分钟(注:也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4. 迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟,不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5. 加入800μl 无抗生素的2×YT或LB液体培养基,28-30℃振荡培养2~3小时。使菌体复苏,表达抗性。
6. 5000rpm离心1分钟收菌,保留100μl左右上清,轻轻吹打重悬菌体,均匀涂布到含有相应抗生素的LB 固体培养基平板上,待平板中的液体完全吸收后,倒置平板,28-30℃培养48-72小时。
注:当平板只含有50μg/mL kan时,28℃培养48 h 即可;平板中同时加入50μg/mL kan、20μg/mL rif时,需28℃培养60 h;如果使用的平板含有50μg/mL rif 则需要28℃培养72-90h。
注意事项:
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3. 平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量。
4. 利福平浓度不应高于25μg/mL,过高的利福平浓度不利于农杆菌生长,会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50μg/mL kan,若所用平板含有20μg/mL rif 则转化效率降低到1/2。
5.培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌;根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失,但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作,所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素,Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。
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