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- 详细信息
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- 库存:
624
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 英文名:
SuperOptimal Broth,Powder
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")SOB培养基品牌,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:SOB培养基品牌
编号:BTN100813
规格:250g
品牌:百奥莱博
英文名:SuperOptimal Broth,Powder
SOB培养基是由美国科学家Hanahan在1983年在LB培养基的基础上开发的培养基,专门用于复苏电转化或化学转化的E.coli感受态细胞以提高转化效率。配制一升液体培养基需要25g本产品。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
SOB培养基品牌正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·辛甲基β葡糖苷
编号:BTN131044
英文名称:Octyl-β-Glucoside
规格:1g
本产品是一种广泛用于溶解膜蛋白的非离子型去垢剂。低分子量,可通过透析去除。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·电泳级SDS溶液(10%)
编号:BTN100881
英文名称:SDS Solution,EG
规格:250mL
本产品是电泳级的SDS溶液,专门用于配制SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE凝胶,也可用于制备变性上样液。当SDS与蛋白质的重量比超过4:1时(一般终浓度为0.1%即可),就能够打开蛋白质的二级结构,并且使蛋白质的在SDS-PAGE胶中的泳动速度只取决于分子大小。如果蛋白质含有二硫键,必须在上样液中补充足够b-巯基乙醇。
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
·Tth DNA聚合酶
编号:BTN90501
英文名称:Tth DNA Polymerase
规格:250U
本酶来源于嗜热菌Thermus thermophilus HB8。在有Mg2+等二价阳离子存在的情况下,具有DNA多聚酶活性。它与Taq酶一样被广泛用于PCR反应,但耐热性比Taq酶高,因此对高GC含量模板的PCR 也有较好的效果。本酶基本上没有3´→5´外切酶活性及5´→3´外切酶活性,所以也可用于双脱氧法测序。另外,本酶具有RTase活性,在Mn2+存在的情况下,RTase活性会得到强化。利用该特性,可以用来在同一管中进行逆转录反应和PCR反应,即一步法RT PCR。(但是,在Mn2+存在时,RT-PCR的准确性不高)此外,本酶与Taq DNA多聚酶一样,PCR产物可通过T载体进行TA克隆。
产品特点:
1.RT-PCR反应的特异性增加:在较高的温度下进行逆转录,增加了引物杂交和延伸的特异性。
2.二级结构减少:在较高的温度下进行逆转录,减少了由于RNA二级结构引起的问题。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Tth DNA聚合酶(5U/μL) | 50μl |
| 10×Tth Buffer | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
以λDNA为模板,以10×Tth Buffer(+MgCl2)作为缓冲液进行体积为50μL的PCR扩增反应为例
1.按下列组份配制PCR反应液。
| 成分 | 终浓度 | 用量 |
| Tth DNA聚合酶(5U/μL) | 1.25U | 0.25μl |
| 10×Tth Buffer(+MgCl2) | 1× | 5μl |
| dNTP Mixture(各2.5mM) | 各0.2mM | 4μl |
| 模板DNA | 50pg~1μg | 详见下表 |
| 引物1(10μM) | 0.1~1μM | 最多到1μL |
| 引物2(10μM) | 0.1~1μM | 最多到1μL |
| 灭菌蒸馏水 | 加到50μL |
推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量:
| 哺乳动物基因组DNA | 0.5~1μg |
| 酵母基因组DNA | 5~500ng |
| 细菌基因组DNA | 0.5~50ng |
| 质粒DNA | 5~500pg |
| PCR回收片段 | 1~100pg |
2.PCR反应条件
以λDNA为模板,扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下:
注:PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
注意事项:
1.循环测序:该酶为耐热性酶,可通过与PCR 同样的温度条件进行测序反应。由于其高温稳定性好,对于复杂高级结构的模板效果较好。
2.引物:用于耐热性酶测序的引物需比用于非耐酶测序的引物设定更长的时间。采用较短的引物时,可能会出现不能获得条带变淡的情况。
SOB培养基品牌关键词:SOB培养基,BTN100813,SuperOptimal Broth,Powder
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SOB培养基品牌关键词:SOB培养基,BTN100813,SuperOptimal Broth,Powder
·蛋白marker(3.3~20.1kD)
编号:BTN70102A
英文名称:Protein Marker(3.3-20.1kD)
规格:15次
本产品为蛋白质电泳标准系列,为已知的标准蛋白质混合物,在SDS-PAGE时可以作为分子量标准,估计其他蛋白质的分子量大小。
产品特点:
1.简单,不需要自己单独购买各种蛋白质配置。
2.本产品有粉末型和溶液型两种,十分稳定。
3.本系列三种产品涵盖从 3.3 KD-200 KD的分子量范围。
| 所含成分及其分子量 | A型 | B型 | C型 | |
| 肌球蛋白重链 | 200.0KD | 有 | ||
| *调素结合蛋白 | 130.0KD | 有 | ||
| 兔磷酸化酶B | 97.4KD | 有 | 有 | |
| 牛血清白蛋白 | 66.2KD | 有 | 有 | |
| 兔肌动蛋白 | 43.0KD | 有 | 有 | |
| 牛碳酸酐酶 | 31.0KD | 有 | ||
| 人生长激素 | 22.0KD | |||
| 大豆胰蛋白酶抑制剂A | 20.1 KD | 有 | 有 | |
| 鸡蛋清溶菌酶 | 14.4KD | 有 | 有 | |
| 人工合成肽1 | 7,823D | 有 | ||
| 人工合成肽2 | 5,856D | 有 | ||
| 人工合成肽3 | 3,313D | 有 | ||
产品组成:
| 成分 | A型 | B型 | C型 |
| 蛋白分子量标准A型(低分子量) | 15T | - | - |
| 蛋白分子量标准B型(中分子量) | - | 20T | - |
| 蛋白分子量标准C型(高分子量) | - | - | 10T |
| 1×SDS-PAGE上样液 | 0.5ml | 0.5ml | 0.5ml |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
使用方法:
一、干粉型的使用:
1.开封后将1×SDS-PAGE上样液加入到样品管中溶解蛋白质粉末,各分子量标准所需的1×SDS-PAGE上样液的体积如下:
低分子量标准(BTN70102A)需要150μL。
中分子量标准(BTN70102B)需要200μL。
高分子量标准(BTN70102C)需要100μL。
2.沸水浴中加热 5分钟。
3.短暂离心后将溶液按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中,置-20℃长期保存。
4.使用时每次取一管,室温放置直到液体融化后,沸水浴中加热3~5分钟,即可上样进行SDS-PAGE电泳。BTN70102A型推荐使用Tricine-甘油SDS-PAGE胶、BTN70102B 推荐使用12%的分离胶、BTN70102C 推荐使用8%的分离胶。
5.电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后出现的带型见上表。
二、溶液型的使用:
1.将溶液按每管一次电泳的用量分装到塑料离心管中冻存,每次只用一管,这样避免反复冻融。
2.使用时取一管室温放置直到液体融化。
3.沸水浴中加热3~5分钟后趁热上样并进行SDS-PAGE电泳。BTN70102A型推荐使用Tricine-甘油SDS-PAGE胶、BTN70102B 推荐使用12%的分离胶、BTN70102C 推荐使用8%的分离胶。
4.电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后出现的带型见上表。
疑难解答:
1.分子量不同,SDS-PAGE的分离胶和浓缩胶浓度不同。需要自己根据具体情况调整。
2.电泳之后可将胶进行染色观察,如果使用传统配方进行染色时效果不好或考虑其毒性,请选择本公司的一步式蓝色PAGE染液(BTN61204),该产品具有染色快,无毒,灵敏性高等物点,是常规蛋白染色液的替代品。
我公司强烈推荐干粉培养基系列产品,热情期待您的咨询选购SOB培养基品牌。
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文献和实验细胞来说要少很多。 最后,针对细胞上清液的外泌体的提取。这个是老生常谈的问题,这里就不再多讲了。如果实验室有超速离心机的话,那就使用超速离心的方法,按照前文建议的预处理操作后,超离后的沉淀也会增加的,同时外泌体的质量也会提升。如果实验室没有超离的情况下,也可以通过试剂盒的方法来提取,除了进口品牌外,也可以使用一些国产试剂盒,质量也不亚于进口品牌的。 总结一下,为了获得高质量的外泌体:需要在细胞培养时减少正常血清的使用,推荐去外泌体血清或者外泌体专用无血清培养基;收获
仪器用具:37℃培养箱及冰浴Electroporation cuvette (electrode gap, 0.1 cm)Electroporator (Bio-Rad, IBI geneZapper 或其它厂牌)药品试剂:无菌水 (置冰浴中)10% glycerol (置冰浴中)SOB 液体培养基SOB 固体培养基SOC 液体培养基SOC/Amp 固体培养基大肠杆菌JM109Ligation mixtures方法步骤:菌体的处理:1) 进行转形实验的前16~20 h,将菌种JM109 接种
利用冰冷的CaCl2 制备competent cells,以传统方法进行质体的转形。仪器用具:37℃培养箱;42℃水浴;冰浴实验步骤:0.1 M CaCl2置冰浴中2 M glucose:取18 g glucose溶于水中,并调体积至50 mL,无菌过滤,分装后置 -20℃贮存。2 M Mg2+:取20.3 g MgCl2 · 6H2O及24.65 g MgSO4 · 7H2O溶于水中,并调体积至100mL,无菌过滤的,分装小瓶置 -20℃贮存。亦可以MgCl2完全取代MgSO4.SOB 液体培养基
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