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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输,4℃保存(微型离心管专用研磨杵
- 保质期:
长期
- 英文名:
Protein Gel Mini-Extraction Kit
- 库存:
233
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应蛋白胶微量回收试剂盒哪里买,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:蛋白胶微量回收试剂盒哪里买
规格:50次
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:BTN90402
英文名:Protein Gel Mini-Extraction Kit
十二烷基硫*(代"酸")*-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)不仅可用于检测蛋白质的相对分子质量,而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一,随着蛋白质技术的微量化,有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、*基酸组分分析或末端序列测定等。
产品特点:
1.简单,不需要复杂而昂贵的仪器(如电洗脱仪)。
2.适用于变性胶(SDS-PAGE)和非变性胶。
3.回收率一般在50-90%之间(跟蛋白质大小,洗脱时间相关)。
4.跟后续的实验兼容,包括2-D电泳、质谱测序等。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 10ml |
| 溶液B | 50ml |
| 微型离心管专用研磨杵 | 50只 |
储存条件:常温运输,4℃保存(微型离心管专用研磨杵可以室温保存),有效期一年。
使用方法:
1.按常规方法进行变性(SDS-PAGE)或非变性蛋白电泳。
2.切取含目的蛋白的胶(尽可能地把多余的胶切除,否则会影响回收效率)。
注意:固定和染色后蛋白回收效果很差,所以建议把样品分多孔上样,电泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色,然后将此胶条放回到在整体胶中原来的位置,通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区域,并切下此区域的胶进行回收。
3.将切下的胶块转移到1.5mL塑料离心管中。
4.用研磨杵充分将胶块压磨成尽可能细小的碎片。
5.加入20μL溶液A,4℃摇晃洗脱至少2-16小时(过夜)。此时最好将溶液B放在冰箱预冷。
6.10000g离心10分钟,转移上清到新的离心管中,注意不要吸取碎胶。
7.加入5倍体积的预冷的溶液B,摇晃混匀。
8.-20℃放置至少10-30分钟。
9.室温12000g离心5-20分钟,弃上清。
10.室温充分晾干,得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在适当的缓冲液中,可用于后续实验(2-D电泳、质谱测序等)。
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蛋白胶微量回收试剂盒哪里买关键词:Protein Gel Mini-Extraction Kit,蛋白胶微量回收试剂盒,BTN90402
·柱式植物DNA提取试剂盒
编号:BTN60602
英文名称:Plant DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在植物DNA提取试剂盒基础上开发的柱式植物基因组DNA提取产品,可以用于多种植物基因组DNA(含叶绿体和线粒体DNA)的快速提取。
产品特点:
1. 纯度高,不含污染和抑制剂,可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、mμLtiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting,microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验。
2.产率一般在3-30μg/100mg样品。OD260/280一般在1.8以上。DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
3.适用范围广,可以使用于绝大多数植物的各种组织。
4. 不会发生离心柱堵塞现象。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 40ml |
| 溶液B | 20ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
注意:溶液A和溶液B容易产生沉淀,溶液B比较粘稠,用前均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分摇匀。
1. 65℃预热柱式植物DNA提取试剂盒溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取0.75mL加入到10mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取植物组织0.1-0.5 g左右,剪成微小的碎片,加入到有溶液A的10mL塑料离心管中并短暂匀浆。也可以液氮研磨后将粉末加入到管中(建议不要在陶器或玻璃研钵中破碎细胞,因为二氧化硅会非特异地吸附DNA,降低DNA 回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。
3. 将匀浆液(包括植物碎片)全部转移到新的1.5mL塑料离心管(此时匀浆液较为粘稠,可将枪头剪去一截后转移上清,不能吸取的植物碎片可以小心倒入)。
4.在匀浆液中加入0.5倍体积预热的溶液B到离心管中,颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。(由于溶液B比较粘稠,可以将1mL枪头剪去一截再吸取)。
5. 65℃水浴3~5分钟。如果室温放置,DNA产量会降低10-20%。
6. 加入200μl自备*仿,震荡混匀10-30秒,此时溶液将呈乳白色。
7. 12000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明,中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中,避免触及中间层的白膜。
8. 加入1.5倍体积的溶液C,颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中,室温放置至少2分钟。
9. 12000rpm室温离心1分钟,DNA 将吸附在离心吸附柱的膜上,倒弃收集管中的穿透液。
10. 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃穿透液。
11. 重复上步操作一次。
12. 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5mL离心管中。
13. 将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中,加50-100μL DNA 洗脱液2.0,室温放置3~5分钟。
14. 12000rpm室温离心1分钟即得植物DNA溶液。
15. 由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强,可以重复上步操作一次,以洗脱得到更多的DNA。
16. 直接取5-10μL电泳检测DNA,其余放冰箱备用。
使用效果:
图注:用本产品提取0.1g牵牛花叶片基因组DNA,60μL洗脱液洗脱,取15μL检测。泳道3和4为本产品提取效果,泳道1和2为某公司同类产品提取效果。本公司提取的牵牛花叶片基因组DNA 条带清晰,产量高。M为本公司Marker,染料为本公司绿如蓝核酸染料(BTN70909)。
蛋白胶微量回收试剂盒哪里买关键词:Protein Gel Mini-Extraction Kit,蛋白胶微量回收试剂盒,BTN90402
·YPDG液体培养基
编号:BTN130897
英文名称:YPDG Liquid Medium
规格:250mL
YPDG培养基为YPD和YPG培养基的混合培养基。可用来区分+和-菌落。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
·抑*肽酶溶液(5mg/mL)
编号:BTN130536
英文名称:Bestatin Solution
规格:5mL
本产品为5mg/mL抑*酶的甲醇溶液,工作浓度为40μg/mL(130μM)。抑*肽酶(Bestatin),又称*肽酶抑制剂、乌*美司(ubenimex),分子量是308.4,是一种竞争性的蛋白酶抑制剂,可抑制*肽酶B、白*酸*基肽酶、三肽*肽酶和哺乳动物细胞表面的*基肽酶等蛋白酶的活性,不能抑制羧肽酶。
储存条件:低温 运输,-20℃保存,有效期一年。
·真菌总蛋白质微量提取试剂盒
编号:BTN81202
英文名称:Fungal Total Protein Miniprep Kit
规格:50次
本产品专门用于快速提取微量酵母蛋白用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析。本产品结合玻璃珠破壁和化学法破壁两种方法,适合于各种形态的各种酵母材料。
产品特点:
1.破壁效率高,能达到80-90%。
2.可以处理各种酵母样品。
3.操作简单,得到的裂解液可以直接用于SDS-PAGE和Western印迹分析。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 100ml |
| 溶液B成分一 | 50ml |
| 溶液B成分二 | 1.5g |
| 玻璃珠,400μm | 5g |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输、4℃保存(溶液B成分二需-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
准备工作:将溶液B成分二(干粉)全部加到50mL溶液B成分一中,充分摇晃使之全部溶解,成为溶液B,然后分装成小分(体积根据每次实验的样品数决定)并放-20℃长期保存。
1.将酵母细胞接种到5mL YPD培养基中,30℃摇晃(250rpm/分钟)过夜培养使其OD600达到0.5~2.0。
2.把酵母细胞培养物转到装有2mL预冷溶液A的10-15mL离心管中,混匀。
3.4℃,5000g离心5分钟沉淀酵母细胞,吸出上清液。
4.用30μL溶液B悬浮酵母细胞,并快速转移到1.5mL塑料离心管中。
5.100℃下保温3分钟,使蛋白酶失活,样品存放于-20℃。
6.加入0.1g的玻璃珠。
7.在旋涡振荡器上剧烈振荡混合2-10分钟。
8.加入70μl溶液B,稍加振荡,置100℃保温1分钟。
9.取5-20μl抽提液上样直接进行SDS-PAGE凝胶电泳。
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文献和实验目的DNA带,用刀片切在带的下上下边缘各切一个小口作为标记。注意:含有大量DNA酶切产物的凝胶既不用加荧光染料,也不用紫外灯照射! (4)将做好标记的凝胶条与未染色的凝胶原位对齐,根据小胶条上的标记估计未染色的大胶上DNA酶切产物的位置,用刀片切下大胶中DNA产物所在的凝胶(尽量不要多余的凝胶),转移至一个称量过的干净的1.5ml微量离心管中。再称量后计算出胶的重量。 (5)按照北京鼎国生物技术有限公司生产的DNA快速纯化/回收试剂盒操作说明,纯化回收目的片段。 纯化/回收试剂盒组成
至一个称量过的干净的1.5ml微量离心管中。再称量后计算出胶的重量。 (5)按照DNA快速纯化/回收试剂盒操作说明,纯化回收目的片段。 纯化/回收试剂盒组成: 溶液A:6 M NaClO4,0.03 M NaAc,pH5.2,少量酚红; 溶液B:3 M NaAc; 溶液C:用时加入35 ml无水乙醇; 溶液D:TE缓冲液。 胶回收步骤如下: a. 将切下的胶带放入1.5 ml离心管中,按照1:3 (胶带重量:溶液A的体积)的比例加入溶液A; b
于室温即可。 6.70%乙醇 7.胶回收试剂盒(Omega公司) (二)器材 水平式电泳装置,电泳仪,台式高速离心机, 恒温水浴锅, 微量移液枪, 微波炉或电炉,紫外透射仪, 凝胶成像系统或其它照相设备。 【操作方法】
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