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500ml
一般描述
)中的铜(II)进行预处理。酚试剂的加入可产生在550-750 nm间提高吸光值的色原。通常,在尖峰(750 nm)或肩峰(660 nm)处的吸光度用于定量1-100 mg/ml之间的蛋白浓度,而550nm处的吸光度用于定量更高的蛋白浓度。
在没有铜的情况下,颜色强度主要由蛋白中的酪氨酸和色氨酸含量决定,并在较小程度上由半胱氨酸和组氨酸决定。铜(II)对由酪氨酸、色氨酸或组氨酸而形成的颜色没有影响,但会由于半胱氨酸而减少颜色形成。[1][4][5][6][7]
许多对原始检测流程的修改已得到发表,[4]包括用于增强显色、[6][8]测定不溶性蛋白含量[1][9]以及过程的自动化。[10]多种物质包括许多缓冲剂、螯合剂、去污剂和环状有机化合物都可对Lowry蛋白检测产生干扰。[4]
Folin & Ciocalteu酚试剂可在色谱过程中用作喷雾剂。
应用
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文献和实验COMPARISION OF DIFFERENT PROTEIN DETERMINATION METHODS
, Ammonium sulphate, Sulphydryl compounds, PO4 buffers Folin-Ciocalteu reagent: SIGMA (#F9252) - MERCK LOWRY 10 µg/ml - 1 mg/ml Very accurate 1 ml reagent + 0.2ml sample
相关专题 一、原理:蛋白质与福林酚试剂反应,生成深蓝色复合物。蓝色的深浅与蛋白质含量成正比。可用分光光度计 于500nm波长下进行测定。与标准曲线对照,而确定蛋白质含量。 二、试剂与材料 标准酪蛋白溶液(250ug/ml):酪蛋白预先用微量凯氏定氮法测定纯度,再称量制备。也可用250ug/ml牛血清蛋白 质标准溶液。 福林酚试剂:吸取试剂A(0.2M氢氧化钠与4%无水碳酸钠溶液等体积混合
. 5 ml 1 M Tris-HCl, pH 8.0 2 ml 0.5 M EDTA 2 ml Triton X-100 (Sigma X-100) ddH2O to 100 ml TTE: 10 mM Tris-HCl, pH 8.0, 0.5% Triton X-100, and 0.1 mM EDTA in double distilled water. 500 ul 1 M Tris-HCl, pH 8.0 250 ul Triton X
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