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动植物总蛋白微量提取试剂盒现货价格

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  • ¥170 - 1700
  • 百奥莱博
  • 北京
  • BTN90707-CDT
  • 2025年07月11日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      常温运输,4℃保存,5×SDS-PAGE

    • 保质期

      长期

    • 英文名

      Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit

    • 库存

      252

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")动植物总蛋白微量提取试剂盒现货价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:动植物总蛋白微量提取试剂盒现货价格
    编号:BTN90707
    产地:国产|进口
    英文名:Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit
    品牌:百奥莱博
    本产品用于快速提取动植物总蛋白,用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析以及蛋白活性测定等。

    产品特点:
    1. 提取过程十分简便,匀浆离心即可,整个过程只需要十几分钟。
    2. 采用独特的温和裂解成分,蛋白保持天然活性。
    3.适用于各种动植物组织材料,包括新鲜或冰冻的材料。
    4. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。
    5.一次可以处理100mg左右的样品,足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    溶液A 50ml
    5×SDS-PAGE上样液 1ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输,4℃保存,5×SDS-PAGE上样液短期4℃保存,长期可放-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    使用前,最好请在溶液A中加入自备的1M DTT溶液50μL。

    一:匀浆法
     注意:对致密的实体组织(如肌肉),最好用Polytron 式匀浆机匀浆处理。
    1. 称取动物或植物组织样品100mg,剪刀剪成黄豆大小,转移到10-15mL的塑料离心管中。
    2. 加入1ml溶液A,在冰上用Polytron 式匀浆机匀浆,直到没有肉眼可见的组织块。为了避免产热,可以分多次匀浆,其间放冰上让匀浆液冷却。
    3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
    4. 4℃ 12000 g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
    5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度,请使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把样品稀释10倍后再测定,否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。

    二:直接研磨法
     注意:可以使用玻璃和陶瓷的研钵,也可以使用与微量离心管式的研磨杵(BTN80603)
    1. 称取动物或植物组织样品100mg,剪刀剪成黄豆大小,转移到预冷的研钵或离心管中。
    2. 加入1ml溶液A,用研磨杵研磨,直到没有肉眼可见的组织块。
    3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
    4. 4℃ 12000g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
    5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度,请使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把样品稀释10倍后再测定,否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。

    三:液氮研磨法
     注意:最好使用玻璃和陶瓷的研钵
    1. 取大约100mg动物或植物组织样品,转移到预冷的研钵中。
    2. 加入少量液氮,用研磨杵研磨成粉。
    3. 加入1ml溶液A溶解,然后将溶液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
    4. 4℃ 12000 g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
    5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度,请使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把样品稀释10倍后再测定,否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5× SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。

    注意事项:
    1.如果4℃ 12000g离心10分钟后得到的上清液中还有可见的沉淀,可以将上清转移到一个新的离心管中后再4℃ 12000g离心10分钟,以去除可见的小碎片。
    2.植物组织中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代谢产物,如果需要除去植物蛋白样品中残存的色素等杂质,可以在最后得到的上清液中加入5倍体积的冷丙*(代"酮")或冷甲醇,混匀后-20℃放置1小时或过夜,然后4℃,12000rpm离心10min,弃上清后室温风干,然后将样品溶于自备的后续实验缓冲液中即可。经过此纯化处理后,部分蛋白质可能会发生变性,不能再用于活性检测。

    关于动植物总蛋白微量提取试剂盒现货价格的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:

    ·柱式无内毒素质粒DNA提取试剂盒
    编号:BTN60807
    英文名称:Endotoxin-free plasmid DNA column extraction kit
    规格:50次
    本试剂盒是整合我们公司柱式质粒DNA提取和菌体内毒素清除剂两产品而成。菌体内毒素清除剂是我们公司独家推出的产品,在质粒提取前就把细胞壁上的内毒素清除掉,彻底避免了目前通用的先提取DNA+内毒素混合物,再从中纯化质粒DNA的弊端。用本产品提取的质粒DNA,内毒素的污染浓度低,适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。

    试剂盒特点:
    1. 操作简单,只在经典的柱式质粒DNA提取前,增加菌体内毒素清除一步。
    2. 去内毒素效果好,处理一次可以去除99%以上的内毒素。
    3.质粒丢失少,产率只比柱式质粒DNA提取低5-10%,效果好于先提质粒DNA,再用液相内毒素清除剂处理的方法。
    4. DNA可以直接用于转染等实验。

    试剂盒组成:
    成分 规格
    菌体内毒素清除剂 200ml
    溶液A 13ml
    溶液B 13ml
    RNase A(10mg/mL) 150μl
    离心吸附柱 50套
    通用洗柱液 50ml
    DNA洗脱液2.0 10ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输及保存,有效期一年。RNase A(10mg/mL)需要低温运输和保存。

    使用方法:

    一: 用菌体内毒素清除剂清除E.coli细胞壁上的内毒素。
    1. 收集1.5-3mL E.coli饱和菌液,12000rpm离心1分钟,弃上清,得到细菌沉淀。
    2. 加入1mL本产品温和混匀后10,000-12000rpm离心1分钟,弃上清(含内毒素)。
    3. 再重复上述操作3-4次,得到的菌体可以直接进入后续的质粒DNA提取步骤。
    二:从无内毒素的E.coli中提取质粒DNA
    1. 用1.5mL离心管收集1-4mL 过夜培养饱和菌液,12000rpm离心1分钟,弃上清,再短暂离心,吸弃残留液体。
    2. 加入250μl溶液A,用枪头充分吹打使菌体重悬。
    3. 加入250μl溶液B(如果有沉淀,用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用),温和反复颠倒混匀4-6次,看到溶液变粘即可。千万不要剧烈振荡。
    4. 加入350μl溶液C,反复颠倒混匀4-6次,可见白色沉淀物产生,然后冰上静止2-5分钟。注意:不要超过5分钟。
    5.室温12000rpm离心10分钟,将上清液转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
    6. 12000rpm离心1分钟,质粒DNA吸附到膜上,弃收集管中的废液。
    7. 加入500μl的通用洗柱液,12000rpm离心1分钟,弃收集管中的废液。注意:我们公司的通用洗柱液是由乙醇和含NaCl的溶液组成,NaCl在其中的溶解度较低,放置一段时间后可能会产生NaCl沉淀。如果有沉淀,用前最好加热使之溶解并混匀后使用。
    8. 重复上步操作1次。
    9. 12000rpm离心1分钟,甩干残留液体。此步不能省略,否则残留乙醇会影响后续的电泳上样(DNA沉不到加样孔里去)和酶反应。
    10. 将离心柱置于新的1.5mL离心管(自备)中,加入50μl DNA洗脱液2.0,室温放置2分钟。
    11. 12000rpm离心1分钟,离心管底溶液即质粒DNA。
    12. 由于天我们公司的吸附柱结合DNA能力较强,需要再加入50μl DNA洗脱液2.0到离心吸附柱中,室温放置2分钟,重复上步操作,往往还能洗脱下很多质粒DNA(相当于第一次洗脱的20-30%)。注意不要使用上步得到的含有DNA的洗脱液来进行第二次洗脱。
    13. 将两次洗脱收集到的质粒DNA汇集即可立即使用或放冰箱保存。


    动植物总蛋白微量提取试剂盒现货价格关键词:Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit,BTN90707,动植物总蛋白微量提取试剂盒

    ARB12565 大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)Elisa分析 Rat glial cell line-derived neurotrophic factor,gdnf ELISA KIT
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    PY02-172  欧氏液  100克  
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    动植物总蛋白微量提取试剂盒现货价格关键词:Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit,BTN90707,动植物总蛋白微量提取试剂盒


    ·昆虫细胞裂解液
    编号:BTN130889
    英文名称:Insect cell lysate
    规格:50mL

    ·大肠杆菌Rosetta-gami (DE3)pLys化学感受态细胞
    编号:BTN130560
    英文名称:E.coli Rosetta-gami (DE3)pLys Chemical Competent Cell
    规格:0.1mL*10
     Rosetta-gami(DE3)pLysS是Rosetta-gami(DE3)的的衍生菌株,用于具有毒性的含二硫键真核蛋白的表达。它是高度严紧表达宿主菌,包括Tunerlac 透性酶突变以及gor B/gor突变帮助细胞质内二硫键形成。

    基因型:Δ(ara–leu)7697 Δ lac X74 Δ phoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL F"[lac+lacIq pro](DE3)gor522::Tn10(TcR)gorB::kan plysS pRARE(CmR)

    储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。

    自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。

    使用方法:
    1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
    以下实验以50μL感受态细胞为例。
    2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
    3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
    4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
    5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。

    注意事项:
    1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
    2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
    3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。



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