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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输及保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Animal DNA extraction kit
- 库存:
452
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应动物DNA提取试剂盒 DNA纯化,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:动物DNA提取试剂盒 DNA纯化
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
规格:100mL
编号:BTN3670
英文名:Animal DNA extraction kit
本试剂盒用于快速提取新鲜或冷冻的动物组织中的基因组DNA。
产品特点:
1. DNA 纯净,大多数DNA样品的OD260/280 值在1.9左右,不含蛋白质和RNA污染,可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应,DNA产率为0.5-2mg/g组织。
2. 操作简单,整个过程室温操作约15分钟,适合大规模样品处理,不需要离心柱,不会发生该类产品经常发生的离心柱堵塞现象。
3. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
4. 性价比高,质量和国外同类产品相当,但价格更便宜。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 动物DNA提取试剂 | 100mL |
| DNA 洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1. 取10mL 圆底塑料离心管一支,加入1mL 65℃预热的动物DNA提取试剂盒溶液,接第二步。如果使用培养的细胞,则需要先吸弃培养基,然后在培养瓶中直接加入1mL 65℃预热的动物DNA提取试剂盒溶液,充分吹打后转移到1.5mL无菌塑料离心管中,接第三步。
2. 称取10-100mg 剪碎的动物组织,加入裂解液中,用匀浆机匀浆五秒到十秒(注:匀浆将产生泡沫,但不影响后面的操作)。如果加入在液氮条件下研成粉末的动物组织,则不需要匀浆,上下摇晃混匀即可。
3. 65℃水浴保温5-10分钟。
4. 将圆底塑料离心管中的匀浆液转移到新的1.5mL 无菌塑料离心管中,(如果材料是培养的细胞,样品已经在1.5mL 无菌塑料离心管中,无需转移)。12000~15000g离心2分钟,转移上清到新的1.5mL 无菌塑料离心管。
5. 加0.2mL *仿(自备)到离心管中,震荡混匀2分钟(如果需要保持DNA完整性,也可以上下摇晃两分钟充分混匀),12000~15000g离心2分钟,转移上清到新的1.5mL 无菌塑料离心管,两相中间层为细胞破碎物,吸取上清时避免触及。
6. 重复第5 步一次,中间层将有少量呈膜状的白色杂质,吸取上清时最好不要碰及。
7.在装有上清液(约0.70mL)的塑料离心管中加入等体积异丙醇,用手颠倒混匀30秒,12000~15000g离心5分钟,弃上清。
8. 加1mL 75%乙醇,用手颠倒混匀30秒,12000~15000g离心1分钟,弃上清。
9. 重复第8步一次,此步可有效提高DNA的纯度。
10.在掌上离心机上短暂离心几秒使离心管壁上残留的液体沉到管底,用移液枪去尽残留的液体,室温放置2分钟进一步晾干,最后加入50-200μl DNA洗脱液2.0溶解DNA后待用。注意:得到的DNA一般需要放置过夜以后才能完全溶解到溶液之中。
关于动物DNA提取试剂盒 DNA纯化的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·细胞蛋白质-RNA共提试剂盒
编号:BTN130829
英文名称:Cells total RNA and total protein co-extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在同一样品中同时高效快速提取总RNA和总蛋白的试剂盒。本试剂盒的操作过程不用使用*酚、*仿,使用本试剂盒提取的Total RNA和Total Protein可用于siRNA的效果分析、RNA/蛋白质的表达分析等。通常分析经过各种药物处理(或经siRNA Transfection)后的动物培养细胞中的靶mRNA或蛋白质的表达差异时,需要将培养细胞分成2份,或者进行两次培养,一份用于提取Total RNA,另一份用于提取Total Protein,这样实验操作复杂烦琐,实验数据误差较大。本试剂盒可以从同一样品中同时提取Total RNA和蛋白质,方便了实验操作,提高了实验可信度。其实验流程如下:
本试剂盒使用含非离子性表面活性剂的Cell Lysis Buffer裂解细胞,然后使用盐析法将染色体DNA和细胞残渣除去。实验操作只需15分钟,便可以从1×103~1×107个培养细胞中制备含Total RNA和Total Protein的可溶性溶液,此溶液可直接用于蛋白质电泳和Western Blotting分析等。此溶液经Isopropanol沉淀回收Total RNA,再经RNA Preparation Water溶解后的Total RNA溶液可用于Real Time RT-PCR法进行mRNA的表达分析等。
·包涵体中量纯化试剂盒
编号:BTN90509
英文名称:Inclusion Body Midiprep Kit
规格:5次
本产品是我们公司包涵体微量纯化试剂盒(BTN90508)的中量提取升级产品,用于中量,快速的提取高质量的包涵体。
产品特点:
1.中量提取,一次可以处理30-50mL的菌液,一次中量提取相当于10-20次微量提取。
2.操作简单快速,整个过程只要四十分钟左右。
3.大规模提取,可以在15-50mL离心管中完成。
4.能有效去除包涵体中的细胞壁和细胞膜等非重组蛋白成份,使重组蛋白所占比重达到60%以上。
5.细胞裂解通过非离子洗涤剂的化学裂解法,裂解更加温和。
6.得到的包涵体可以用于重折叠。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 25ml |
| 溶液B | 250ml |
| 包涵体溶解液 | 25mL |
| 溶菌酶 | 3g |
| Benzonase(1U/μL) | 125μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,但溶菌酶和Benzonase需要低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
准备工作:
将3g溶菌酶全部加入到25mL溶液A中溶解,然后根据每次的需要量(一次大量提取需要5mL)分成1mL/只放-20℃待用。每次只取用一管含溶菌酶的溶液A。
包涵体中的重组蛋白一般比溶解状态中的蛋白质更能够抵抗微量内源性蛋白水解酶的降解,如果实验发现得到的重组蛋白确有降解,则需要在溶液A中新鲜加入自备的蛋白酶抑制剂混合物(BTN80808)。
一、细胞裂解和包涵体的纯化:
1.在蛋白诱导期结束时,转移30mL菌液到一个干净的塑料离心管中。
2.5000-7,000rpm室温离心3分钟,小心弃上清。
3.加入5mL含溶菌酶的溶液A重悬细胞。
4.室温放置10-20分钟裂解细菌,其间可以用手轻弹离心管混匀。
5.-20℃冷冻至凝固。凝固有利于裂解细菌,所以一定要凝固到细菌溶液变成固体。
6.室温水浴解冻。如果裂解充分,细菌释放出的DNA将使裂解物十分粘稠。如果不粘稠,说明裂解不充分,需要重复3-6步,否则完整细菌将和包涵体一起沉淀,影响包涵体的纯度。如有条件最好在显微镜下检查细菌是否充分裂解。
7.加入25μL的Benzonase(1U/μL),脱色摇床上摇晃直到裂解液不再粘稠,一般需要30分钟左右(检查方式是将裂解物倾倒转移到另一离心管中,在转移过程中看其是否粘稠)。
8.5000-7,000rpm 4℃离心5分钟,小心收集上清。上清含有以可溶形式存在的重组蛋白,可以保留作为SDS-PAGE对照样品。
9.将沉淀(主要由包涵体构成)悬浮在25mL的溶液B中,轻柔混匀后室温放置5分钟。
10.5000-7,000rpm 4℃离心10分钟,小心收集上清,可以作为包涵体第一次洗涤的对照样品。
11.将沉淀(主要由包涵体构成)悬浮在25mL的溶液B中,轻柔混匀后室温放置5分钟。
12.5000-7,000rpm 4℃离心10分钟,小心收集上清作为包涵体第二次洗涤的对照样品。一般洗涤两次就能够得到足够纯净的包涵体,如果需要更多洗涤,需要用户单独购买包涵体洗涤液(溶液B)。
13.得到的沉淀即为包涵体,可以长期放置在冰箱待用或直接进入包涵体的溶解步骤。
二、包涵体的溶解:
1.在包涵体沉淀中加入5mL包涵体溶解液,用枪头充分吹打后漩涡震荡。如果低温放置,包涵体溶解液会产生沉淀,必须45-65℃溶化并混匀后才能使用。
2.室温放置1小时使蛋白质充分溶解。
3.20000g 4℃离心20分钟,小心收集上清,保留不溶性沉淀。注意:检查离心管能否承受此离心力。SDS-PAGE检查是否大部分重组蛋白都在上清中。如果没有,说明包涵体没有完全溶解,需要用适当增加包涵体溶解液的用量。
4.得到的蛋白质溶液可以用于复性等试验。由于不同的蛋白质有不同的最佳复性条件,所以本公司不能提供统一的复性溶液,需要用户自己摸索。
注意:包涵体纯化过程中引入了溶菌酶、DNase和RNase等外源蛋白质,在SDS-PAGE分析时可能有额外条带出现。
动物DNA提取试剂盒 DNA纯化关键词:BTN3670,Animal DNA extraction kit,动物DNA提取试剂盒
·Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH7.5)(不含RNase)
编号:BTN60903
英文名称:RNase-Free Tris-HCl Solution
规格:250mL
·柱式DNA污染清除剂(大处理量)
编号:BTN90802
英文名称:Maxi Column DNA Scavenger
规格:5次
本品是柱式DNA清除剂(BTN90318)的大提升级产品,可用于细胞总RNA样品中基因组DNA污染的去除。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。本公司开发的大提柱式非酶DNA清除剂不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有下列特点。
产品特点:
1.处理量大,一次可以处理高达400μg的总RNA。
2. 操作简单快速,全部操作只需要十余分钟。
3. 回收率高达80%以上。
4.高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平,而 RNA分子完整性不受任何影响。
5. 本身不含RNase污染,避免了用DNase处理的最大问题。
6. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
7. 性价比高,单位成本远低于RNase-free DNase。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 5ml |
| 溶液B | 100ml |
| 大提离心吸附柱 | 5套 |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| RNA洗脱液 | 5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输、除溶液A 需要 4℃保存外其余均可室温保存、有效期一年。
使用方法:
1. 将1mL 总 RNA溶液与1mL溶液A 加入一个自备的30-50mL塑料离 心管中,并充分震荡 1分钟。注意:RNA溶液中盐(如*离子)的浓度 不能高于0.2 M,如果 RNA溶液的量不足 1mL,最好加自备的无 RNase 水补足到 1mL以便后续操作。
2. 加入9倍体积(即 18mL)的溶液B,颠倒数次充分混匀。注意:溶液B在 4℃放置后可能会产生沉淀,用前需检查,如果确实有沉淀,必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将混合液转移到离心吸附柱中,室温 5000-7000rpm离心一分钟,弃穿透液。
4. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温 5000-7000rpm离心一分钟,弃穿透液。
5.一次洗涤一般足够去除杂质。如果有必要,可以再加 10mL 通用洗柱液 到离心吸附柱中,室温 5000-7000rpm离心一分钟,弃穿透液。一般 情况,此步可以省略。
6.室温 5000-7000rpm离心一分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗 柱液会影响 RNA的使用。
7. 将离心吸附柱转移到一个新的自备的50mL塑料离心管中,加入0.5mL RNA 洗脱液,室温放置 1-2分钟。室温 5000-7000rpm离心一分钟,离心管中溶液即为RNA样品。
8. 由于离心吸附柱吸附能力强,还有大量 RNA 吸附在柱上,所以还需要加 入0.5mL RNA 洗脱液,室温放置 1-2分钟。室温 5000-7000rpm离 心一分钟。
9. 两次收集的1mL RNA样品,可以立即使用,也可以存放于-80℃待用。
疑难解答:
Q:能否用本产品对同一样品进行反复处理?
A:可以。
Q:本产品跟 DNA Scavenger-2有何区别?
A:本产品为柱式升级产品,比 DNA Scavenger-2 更快速清除 RNA样品中的DNA污染。
动物DNA提取试剂盒 DNA纯化关键词:BTN3670,Animal DNA extraction kit,动物DNA提取试剂盒
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3-(N-玛啡啉)丙磺酸*盐 o-Dianisidine dihydrochloride 71119-22-7
离子交换剂Ⅴ Zearalanone
BTN80403 RNase-free水 RNase-free Water
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