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Blood RNA freezing preservation solution
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")冷冻型血液RNA保存液现货供应,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:冷冻型血液RNA保存液现货供应
产地:国产|进口
规格:100mL
品牌:百奥莱博
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·耐热型MMLV逆转录酶(无RNase H活性)
编号:BTN131210
英文名称:Thermal Stable MMLV Reverse Transcriptase (H-)
规格:10000U
本产品为点突变型M-MLV逆转录酶(RNase H缺失),拥有RNA和DNA聚合酶活性,但由于在RNase H结构域内进行了点突变,该酶缺少RNase H的活性,不会降解第一链CDNA 合成时形成的RNA-DNA 复合物中的RNA,从而可以从长模板中获得高产量的全长cDNA。缺失了RNase H活性的逆转录酶为长cDNA的制备及包含高比例全长cDNA的文库制备提供了更好的选择。
产品特点:
1.温度稳定性,点突变产物的热稳定性可防止与二级结构相关的问题,增强了与模板的亲和力。
2.能够在较宽的温度范围内保持活性,在42-45℃之间具有最佳活性,在温度高达55℃时仍有活性。
3.聚合酶活性增强,本产品与其它缺失突变得到的M-MLV 逆转录酶相比,具有更高的cDNA产率。
4.高产量制备全长的第一链cDNA,最长可达13kb。合成时可掺入带有修饰的核苷酸(例如 Cy3-、Cy5-、罗丹明-、*基烯丙基-、荧光素-标记的核苷酸)。
5.广泛的工作范围:提高了逆转录的性能,使得可以在更广泛的酶浓度和底物浓度的条件下工作。
产品组成:
成分 | 规格 |
耐热型MMLV逆转录酶(H-),200U/μL | 50μl |
5×RT Buffer | 1ml |
说明书 | 1份 |
成分 | 用量 |
▶RNA模板 | |
Total RNA 或poly(A)RNA 或specific RNA |
0.1ng-5μg 10pg-500ng 0.01 pg-0.5μg |
▶引物 | |
Oligo dT18 或随机引物 或基因特异引物 |
0.5μg(100pmol) 0.2μg(100 pmol) 15-20 pmol |
▶RNase-free水 | Up to 12.5μL |
5×RT Buffer | 4μL |
RNase Inhibitor | 0.5μL(20U) |
dNTP Mix,10mM each | 2μL(终浓度1mM) |
耐热型MMLV逆转录酶(H-) | 1μL(200U) |
成分 | 规格 |
MMLV 逆转录酶(含RI) | 100μl |
RT Buffer(含dNTP) | 300μl |
Oligo(dT)18引物(0.5μg/μL) | 50μl |
随机引物(0.2μg/μL) | 50μl |
RNase-free 水 | 10ml |
PCR MagicMix 3.0 | 9ml |
专用染料 | 360μl |
说明书 | 1份 |
RNA模板 | |
总RNA | 100-500ng |
或poly(A)mRNA | 10-500 ng |
或专一的RNA(如体外转录制备的) | 0.01pg-500ng |
引物 | |
Oligo(dT)18(0.5μg/μL) | 1μL |
或随机引物(0.2μg/μL) | 1μL |
或自备模板专一反向引物(10pmol/μL) | 1-2μL |
RNase-free水 | 补水到12μL |
成份 | 加入量 |
PCR MagicMix 3.0(已加染料) | 15μl |
cDNA样品(上步的RT反应液) | 1-5μl |
模板专一性正向引物(10 pmol/μL) | 1-2μl |
模板专一性反向引物(10 pmol/μL) | 1-2μl |
补水到 | 30μl |
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 94℃ | 5min |
PCR反应(35个循环) | 94℃ | 1min |
55℃ | 1min | |
72℃ | 2min | |
最后延伸 | 72℃ | 10min |
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