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- 英文名:
T4 DNA Ligase
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大量现货
- 供应商:
上海研谨生物
- CAS号:
9015-85-4
- 规格:
2.5KU
英文名: T4 DNA Ligase
别名:
CAS号: 9015-85-4
MDL: MFCD00163508
| 货号 | 品牌/规格/主要参数 | 市场价 | 货期 | |
| JS10129-40KU | BR | ¥1200.00元 | 2-3天 |
使用建议:粘末端的连接反应:插入片段和载体的摩尔浓度比特别重要,此比例在2-6之间为好,低于2:1就会导致较低的连接效率,高于6:1则会导致多个插入。摩尔比请按载体与插入片段DNA浓度及分子大小来计算。
平滑末端的连接反应:平滑末端的连接反应与突出末端相比反应较慢(其Km值约为突出末端的100倍)。进行平滑末端的连接反应时,可提高DNA浓度,将使用酶量增加到突出末端量的2~5倍左右。 向粘粒或噬菌体进行连接反应:可使载体和插入DNA的摩尔比调整为1:1,同时增大DNA浓度以便取得良好效果。(0.05~0.1μg/μl以上)
反应温度: 该酶的最适温度为37℃,由于热稳定性较差,因此 长时间反应时通常需在16℃下进行。若反应1-2小时左右的话也可在室 温下进行反应。
抑制剂:T4 DNA连接酶要求Mg2+,因此螯合Mg2+的EDTA的存在会阻碍反应。将溶解于含有高浓度EDTA缓冲液中的DNA准备作为样品使用 ,先用灭菌蒸馏水或TE缓冲液进行置换。
储存条件: -20℃
用途: DNA片段和载体DNA的连接
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文献和实验Ligation of DNA with T4 DNA Ligase
recombination and DNA synthesis. DNA ligase from E. coli is a polypeptide with a molecular weight of 74,000 and is NAD-dependent. T4 DNA ligase is the product of gene 30 of the T4 phage, has a molecular weight of 68,000, and is ATP-dependent. Both enzymes
Joining RNA Molecules with T4 DNA Ligase
Researchers interested in studying RNA structure and function or RNA-protein interactions are increasingly using site-specifically modified RNAs to probe sites of interest (1 ). In addition to expanding the repertoire of functional groups
Splint Ligation of RNA with T4 DNA Ligase
Splint ligation of RNA, whereby specific RNA molecules are ligated together, can be carried out using T4 DNA ligase and a bridging DNA oligonucleotide complementary to the RNAs. This method takes advantage of the property of T4 DNA ligase
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