钙敏感受体1抗体组织在制作过程中,由于化学试剂的作用封闭了抗原,又由于热的作用致使部分抗原的肽链发生扭曲,致使在免疫组化的染色过程中不能将其显示出来,为了解决上述的问题。 钙敏感受体1抗体利用化学试剂和热的作用将这些抗原重新暴露出来或修正过来: A、抗原热修复 a. 高压热修复 在沸水中加入EDTA(ph8.0)或0.01m枸橼酸钠缓冲溶液(ph6.0).盖上不锈钢锅盖,但不能锁定,将玻片置于金属染色加上,缓慢加压,是玻片在缓冲液中浸泡五分钟,然后将盖子锁定,小阀门将会升起来,10分钟后除去热源,置入凉水中,当小阀门沉下去后打开盖子,此方法适用于较难检测或核抗原的抗原修复。 b. 沸热修复 电炉或水浴锅加热0.01枸橼酸钠缓冲液(ph6.0)至95℃左右,放入组织芯片加热10-15分钟。 c. 微波炉加热 在微波炉里加热0.01枸橼酸钠缓冲液(ph6.0)至沸腾后将组织芯片放入,断电,间隔5-10分钟,反复1-2次。 d、酶消化方法 常用0.1%胰蛋白酶和0.4%胃蛋白酶液;胰蛋白酶使用前预热37℃,消化时间为5-30min。