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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃恒温保存一年
- 保质期:
-20℃恒温保存一年
- 英文名:
StarScript II SYBR Two-Step qRT-PCR Synthesis Kit(with ROX II)
- 库存:
大量
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 规格:
说明书
本产品是专为两步法qRT-PCR实验设计的高灵敏度RT-PCR反应系统和高扩增效率的荧光定量PCR检测试剂盒。该反转录系统可以从极低量的总RNA或poly(A) mRNA合成第一链cDNA,无需额外添加RNase抑制剂,合成的cDNA产量更高,长度可达15 kb。2×RealStar Green Mixture 中的HotStartTaq DNA Polymerase高温加热前,抗Taq单克隆抗体与Taq 酶结合,抑制Taq酶的聚合酶活性,从而抑制在低温条件下出现的由引物和模板DNA非特异性杂交或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq单克隆抗体在PCR反应第一循环的变性步骤中已完全失活,不会阻碍之后的Taq Polymerase反应,大大提高了PCR反应的灵敏度及特异性,所含的SYBR Green I荧光染料可以与所有的DNA双链相结合,使该产品可以用于多种不同靶序列的检测。同时,该产品具有高特异性和高灵敏度的特点,即使极低丰度的基因也能得到有效扩增。
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组分名称
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KL309-02
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KL309-05
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StarScript II RT Mix
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22 μl
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55 μl
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2×Reaction mix
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220μl
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550μl
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Oligo (dT)18 (50 μM)
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22μl
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55 μl
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Random Primer (50 μM)
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22 μl
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55 μl
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2×RealStar Green Fast Mixture with ROX II
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1.1 ml
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1.1 × 3 ml
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DEPC-ddH2O
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1 ml
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2.5 ml
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ROX Reference Dye (50×):ABI Prism7000/7300/7700/7900HT和ABI Step One /ABI Step One Plus荧光定量PCR仪。
ROX Reference Dye II (50×):ABI Prism7500/7500 Fast荧光定量PCR仪 , MJ Research Chromo4,Opticon (II) , Corbett Rotor Gene 3000 , Agilent Technologies Mx3000P荧光定量PCR仪。
不加ROX Reference Dye: Thermal Cycler Dice Real Time System , LightCycler , Smart Cycler System,Corbett Rotor-gene 6000荧光定量PCR仪等。
-20℃恒温保存,有效期一年
2. 尽可能减少2×RealStar Green Mixture在光下的曝露时间,长时间的曝光可导致荧光信号强度的丧失。
3. 本试剂盒不能用于杂交探针法。
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文献和实验and synthesis of first-strand cDNA (ref. 60), allowing the construction of solid-phase cDNA libraries and solid-phase RT-PCR. 实验试剂 Lysis/Binding Buffer Washing Buffer A Washing Buffer B 10 mM Tris-HCl (Elution Buffer
cDNA Synthesis from MOLT-4 Cells
the reaction 4. Add 5μl SuperScript II RT, mix again and spin the tube 5. Incubate it at 37℃ for 1 hour. 6. Place the tube on ice to terminate the reaction 7. Remove 2 μl from the reaction , and add it to a micr℃entrifuge tube containing 43 μl of 20 mM EDTA
Native Chromatin Preparation and Illumina/Solexa Library Construction
Antibody and preimmune serum for ChIP CD4+ T cell Isolation Kit II (human) (Miltenyi Biotec) Alternatively, Dynabeads Untouched Human CD4 T Cells Kit (Invitrogen) can be used (see Steps 5-21). DNA End-Repair Kit (Epicentre Biotechnologies
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