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- 2025年07月18日
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99
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诺博莱德
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200ml/KIT
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文献和实验测定细胞免疫功能首先要从人或动物外周血或组织中获取有活性的细胞，如淋巴细胞、巨噬细胞、粒细胞等。取得有活性的细胞应根据不同目的，采用不同方法，考虑：(1)细胞纯度；(2)细胞获得量；(3)细胞活力；(4)使用方法的简易程度和本室条件等。目前常用Ficoll密度梯度离心法直接分离和纯化外周血单个核细胞。 (一) 原理: 常用来分离人外周血单个核细胞（PBMC）的分层
-4，rhIL-6，TNF-α和PGE-2均购自PEPRO Tech公司，MTT购自R＆D Systems公司）。正常人外周血取于4名健康供者。肝癌细胞株SMMC-7721为本实验室液氮保存株。流式细胞仪为美国Becton Dickinson公司产品，透射电镜为HITACHI公司产品。 CIK细胞的体外诱导和扩增 通过血细胞分离机从健康供者采集外周血单个核细胞（MNC），用淋巴细胞分离液
，说明两等位基因均出现C到T的突变，为-159T/T纯合子，无166bp而被消化成较小的片段则为-159C/C的纯合子，出现含166又有酶切片段是-159C/T杂合子 。 单个核细胞的分离：空腹抽取外周全血，用ACD抗凝，小心加在同体积的淋巴细胞分离液上，以500g离心30 min。小心取出离心管，可见离心管中部有一水平的白色混浊区，用1ml移液器小心吸出中间层白色细胞，用PBS/EDTA缓冲液洗涤2次，用ACK缓冲液裂解残留的红细胞。以550g离心10min得到的细胞沉淀即为单个核细胞
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