猪外周血NK细胞分离液试剂盒NKHY2011P

人NK细胞高效扩增方法总结

NK细胞是人体免疫的第一道防线，具有非限制性杀伤的特点，如何发挥NK细胞的免疫作用从而治疗肿瘤等疾病是一个重要的课题。因为NK细胞仅占外周血的5-10%，细胞数量的稀少往往是制约研究的一个重要原因。本产品用于从单个核细胞（MNC）在体外高效扩增成NK细胞，具有扩增效率高，目的细胞百分比高的特点，起始单个核细胞经过14天培养，总细胞数可以扩增约50倍左右，NK细胞数可以扩增500倍以上，且纯度可达70%-85%（由于个体差异，有的样品诱导后NK细胞纯度低于70%或高于85%）。   【操作

无血清培养基对体外激活的A-NK细胞的支持作用

。 1.2 人外周血单个核细胞的制备 淋巴细胞分离液常规分离健康人的外周血单个核细胞，充分洗涤后，置于塑料离心管中用PME（5mmol/L）室温处理40min后充分洗涤备用。 1.3 A-NK细胞的诱导 用PME处理后的人外周血单个核细胞分别用完全培养基（RPMI1640，含10%人AB血清，100U/ml青霉素，100μg/ml链霉素）和无血清培养基AIMV在塑料培养瓶内培养，每组加rhIL-2（6000IU/ml）并调整细胞

CIK细胞的制备方法

细胞活化，并进入细胞分裂状态。此外，IL-2还可刺激NK细胞的生长并增强其杀伤能力。因此CIK细胞培养中须添加IL-2，以促进T细胞的增殖与活化。 n IFN-g (干扰素-g) IFN-g 具有上调外周血淋巴细胞表面IL-2R表达的作用，因此会增强T细胞对IL-2促增殖反应的敏感度和强度。在诱导CIK细胞形成的过程中加入IFN- g ，可降低IL-2的用量。研究发现，IFN-g加入的顺序与CIK的细胞毒活性密切相关。先加入IFN- g，培养24后再加入IL-2，可明显提高CIK的细胞毒活性