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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
上海三抒生物科技有限公司
- 检测范围:
见说明书
- 检测方法:
酶联免疫法
- 应用:
科研实验
- 适应物种:
见说明书
- 标记物:
咨询客服
- 样本:
血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被维生素D(VD)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的维生素D(VD)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
上海三抒生物科技有限公司是一家从事于生物化学行业的企业,公司致力于为实验室分析领域提供一站式服务,为用户提供专业、快捷、可靠的全方位服务。
公司 能为广大用户提供各种技术平台服务。我们提供的产品主要有:生化试剂(elisa试剂盒、生化试剂盒)、通用试剂、抗体、细胞、中间体、培养基、对照品/标准品、实验室耗材等,同时我司能以优惠的价格为您提供各种进口的生物化学试剂、抗体以及分析仪器等。
上海三抒生物科技有限公司将一直致力于生物、化学、医药、精细化工、食品工业、现代农业、地质矿产、生命科学、环境保护、疾病控制、新能源等领域的长远发展,一如既往地秉承“专业的”服务精神,“真诚的”服务理念和“客户至上”的服务宗旨,更好地服务于全体用户,为用户提供性价比最高的产品和最专业的技术服务!
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文献和实验一、实验原理 细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。 其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法
在细胞培养实验过程中,大家是不是总会好奇别人家的实验总是做的又快又好,而自己做的实验又慢又难得做出自己满意的结果,搞得一天到晚也挺忙的,心想:我也很努力很认真啊,为啥效率总提不起来呢?其实,有时候并不是自己不努力,只是没有找对方法。做实验可不能光是埋头苦干,还要学会运用合适的检测试剂盒,这样就能事半功倍。如果你还在用 MTT,那就真的 OUT 了,MTT 花 4 小时才能得到的结果用 CCK-8 只需 1 小时,CCK-8 可用于细胞增殖和毒性分析,同 MTT 法相比,CCK-8 即开即用
相关专题 Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。 WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体 内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。 WST-8是MTT的一种
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