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上海研谨生物
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5g
产品货号:[J-SS9990-5]
产品规格:{5g}
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床。
常用试剂配制常识
1、哪种浓度的酒精消毒效果最好?
70%酒精杀菌力最强,它能使蛋白质脱水和变性,在3~5分钟内杀死细菌。因此,它用于消毒和防腐,适用于皮肤和器械、塑料制品等的消毒。高浓度的酒精95~100% 能引起菌体表层蛋白质凝固,形成保护层,使酒精分子不易透入,因此杀菌能力反而弱。
2、试剂的等级有哪些?
根据化学试剂的纯度,按杂质含量的多少可分为四级:
一级试剂为优质纯试剂,通常用G·R表示;
二级试剂为分析纯试剂,通常用A·R表示;
三级试剂为化学纯试剂,通常用C·R表示;
四级试剂为实验或工业试剂,通常用L·R表示。
此外,根据特殊的工作目的,还有一些特殊的纯度标准,例如光谱 纯、荧光纯、半导体纯等。使用时应按不同的实验要求,选用不同规格的试剂。
3、固体试剂的溶解知多少?
较大的固体颗粒溶解前,应该先粉碎固体。固体的粉碎是在洗净和干燥的研钵中进行的。研钵中所盛固体的量不要超过研钵总容量的三分之一。溶解固体时,常用搅拌,加热等方法来加快溶解速度。
搅拌液体应手持搅拌棒并转动手腕,转动速度不要太快,也不要使搅拌棒碰在器壁上。搅拌试管中的液体时,搅拌棒可以转动,也可轻轻上下搅动,但不要用力过大,以免将试管弄破。还可用振荡试管的方法代替搅拌。
加热以加速固体溶解的方法与加热液体时相同,即一般有直接加热方法和水浴加热方法等。要视被加热物质的稳定性,而选用不同的加热方法。另外还要注意在容器上盖表面皿,以防止液体蒸发。
4、下面这些你注意了吗?
==称量试剂的天平应保持清洁、干燥,避免潮湿及腐蚀性气体的侵蚀。在进行称量操作时,被称取的试剂应置于称量纸上或其它器皿内,不可在盘中直接称量。
==在配制强酸、强碱溶液或接触有毒性药物时,应严格按操作规程进行。如稀释硫酸时,应谨慎的将浓硫酸缓缓倾注水中,切不可把水倒入浓硫酸中。
==在配制药物溶液时,某种动物注入药液的最大容量决定所配药物溶液的浓度。如静脉注射药液容量过大,可影响其循环系统的正常功能。故静脉注射容量最好在体重的1/100以下;静脉外 皮下、肌肉及腹腔 注射容量最好在体重的1/40以下;因此,可根据动物的体重,选择所配药物溶液的适当浓度。
==在配制药物溶液时,应考虑到实验动物内环境的稳定性以及动物离体器官或组织在实验条件下的正常功能。应力求达到与血液及体液呈等渗与等张以及等pH值和离子平衡状态,应使用生理盐水配制 温血动物用0.9%NaCl,冷血动物用0.6%NaCl 。离体器官灌流液或营养液因用量大,应严格计算渗透压、pH值与各种离子浓度,有时还要考虑营养成分如葡萄糖的含量等,根据动物离体器官的不同而使用不同的生理溶液。
5、常用的抗凝剂有哪些?
==肝素 Heparin
肝素的抗凝血作用很强,常用来作为全身抗凝剂,特别是在进行微循环方面动物实验时的肝素应用更有重要意义。纯的肝素10mg能抗凝100ml血液 按1mg等于100个国际单位,10个国际单位能抗凝1ml血液计 。如果肝素的纯度不高,或过期,所用的剂量应增大2~3倍。用于试管内抗凝时,一般可配成1%肝素生理盐水溶液,取0.1ml加入试管内,加热80℃烘干,每管能使5~10ml血液不凝固。
作全身抗凝时,一般剂量为:大鼠2.5~3mg· 200~300g体重 -1,兔或猫10mg·kg-1,狗5~10mg·kg -1。如果肝素的纯度不高,或过期,所用的剂量应增大2~3倍。
== 草酸盐合剂
配方:草酸铵 1.2g
草酸钾 0.8g
福尔马林 1.0ml
蒸馏水加至 100ml
配成2%溶液,每1ml血加草酸盐2mg 相当于草酸铵1.2mg,草酸钾0.8mg 。用前根据取血量将计算好的量加入玻璃容器内烤干备用。如取0.5ml于试管中,烘干后每管可使5ml血不凝固。此抗凝剂量适于作红细胞比容测定。能使血凝过程中所必须的钙离子沉淀达到抗凝的目的。
上海研谨生物是一家专业从事生化试剂、分子生物学试剂、实验耗材及实验仪器研发、销售、服务为一体的专业性生物科技公司。目前公司销售、代理:Invitrogen、Amersham、sigma、Aldrich、Amresco 、YOYOBIO、BD Difco 、Fluka、Merck、Omega、PALL、Millipore、Peprotech、Pierce、Roche、Eppendorf、 BioHiT、Whatman、Axygen、corning、Pharmaia、等诸多品牌。与各大产品建立紧密的合作伙伴关系,代理其领先世界的尖端产品。
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文献和实验Nat Metab:李贵登等团队合作发现肿瘤内酸度维持 T 细胞干性影响肿瘤免疫治疗
甲硫氨酸的摄入,最终抑制 S-腺苷甲硫氨酸(SAM)的产生。S-腺苷甲硫氨酸作为组蛋白甲基化修饰的甲基供体,其减少会导致 T 细胞内组蛋白修饰的改变。另一方面,长期的胞外酸处理显著抑制了调控 H3K27me3 修饰的甲基化酶 EZH2 的表达,最终减少了胞内 H3K37me3 的水平。接下来,作者们通过 CUT&Tag 测序确定了胞外酸处理诱导的 H3K27me3 的减少促进了 T 细胞内干性相关基因的转录激活,最终维持了 T 细胞的干性特征。另外,作者们发现回补外源性甲硫氨酸可显著恢复 MYC
methiomine,SAM)。SAM中的甲基是高度活化的,称活性甲基,SAM称为活性蛋氨酸。 SAM可在不同甲基转移酶(methyl transferase)的催化下,将甲基转移给各种甲接受体而形成许多甲基化合物,如肾上腺素、胆碱、甜菜碱、肉毒碱、肌酸等都是从SAM中获得甲基的。SAM是体内最主要的甲基供体。 SAM转出甲基后形成S�腺苷同型半胱氨酸S�adenosyl homocystine,SAH),SAH水解释出腺苷变为同型半胱氨酸(homocystine,hCys
2. 5mC免疫沉淀法(MeCIP) 这种方法是基于能够与5mC发生特异性反应得到单克隆抗体,通过抗体与5mC结合,将甲基化的DNA片段沉淀下来。再通过测量沉淀DNA估计甲基化程度。 3. M.SssI甲基转移酶 M.SssI可以将同位素标记的甲基从S―腺苷甲硫氨酸(SAM)转移到非甲基化的CpG序列上形成5mC,通过测量转移后同位素能量估计总体甲基化水平。 4. 氯乙醛法 DNA经重亚硫酸盐处理,使未甲基化的胞嘧啶全部转变
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