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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8度
- 保质期:
见包装
- 库存:
大量现货
- 供应商:
上海研谨生物
- 规格:
4×10ml
产品简介:
增强革兰氏染色液故在显微镜下极难观察。染色后细菌不环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、
排列及某些结构特征,用以分类鉴定。通过此法染色可将细菌鉴别为革兰阳性菌(G+ )和革兰阴性菌(G-)两大类。细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差
异,主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物,乙醇能使它脱色。在革兰阴性细胞染色中,乙醇戒丙*&酮破坏了胞壁外膜、损伤肽聚糖层 和细胞质膜,结晶紫和碘复合物从细胞中渗漏出来,当再用其他染色液复染时,显现红色。
红色染料虽然也能进入已染成紫色的 G+细胞,但被紫色盖没,所以红色显示不出来。在革兰阳性细胞染色中,乙醇还能使厚的肽聚糖层脱水,导致孔隙变小,由于结晶紫和碘复合物 分子太大,不能通过细胞壁,不易脱色,所以保持着紫色。
研谨生物 Enhanced Gramˊs stain 采用最经典的革兰染色配方进一步改进,使用复红
复染液替代沙黄染色液,增强了染色效率,用于极难染色的细菌。临床标本直接涂片,背景 干净,胞核胞质对比强烈,胞内吞噬体清晰易辨认,细菌染色特征典型。
| 货号 | 品牌/规格/主要参数 | 市场价 | 货期 | |
| R20663-4*10ml | ¥81.00元 | 2-3天 | ||
| R20663-4*100ml | ¥250.00元 | 2-3天 | ||
| R20663-4*250ml | ¥276.00元 | |||
| R20663-4*500ml | ¥534.00元 |
产品组成:
| 4×10ml | 4×100ml | 4×250ml | |||
| 试剂(A): 结晶紫染色液 | 10ml | 100ml | 250ml | RT | 避光 |
| 试剂(B): Gram 碘液 | 10ml | 100ml | 250ml | RT | 避光 |
| 试剂(C): 脱色液 | 10ml | 100ml | 250ml | RT | |
| 试剂(D): 复红复染液 | 10ml | 100ml | 250ml | RT | 避光 |
自备材料:
1、接种环戒挑取细菌的其他工具
2、酒精灯
3、载玱片
4、光学显微镜
操作步骤(仅供参考):
1、涂片:取待检细菌,于载玱片中央涂成薄层戒者戒在载玱片上滴加少许无菌水,取菌不 的水混合均匀,涂成一薄层。
2、干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。
3、固定:手持载玱片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动 3~5 次,每
次 1s,温度不宜过高,防止菌体蛋白变性,放置待凉后染色。也可以用甲醇戒乙醇固定。4、初染:滴加结晶紫染色液染色 1~2min,清水冲洗去染色液。
5、媒染:滴加 Gram 碘液,并覆盖载玱片,室温放置 1~2min,水洗。
6、脱色:滴加脱色液,摇动 10~30s,直至流下的脱色液不出现紫色时为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。
7、复染:滴加复红复染液染色 30~60s,水洗。
8、干燥。镜检:置油镜观察。
染色结果:
革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌
蓝色至紫色红色
注意事项:
1、涂片之前,应事先在背面做好圆圈标记,以便判断后续试验的位置。2、取细菌时,应注意自我防护,拔戒塞试管塞时,应将试管口通过火焰略加烧灼,最后将 接种环在火焰上烧灼灭菌。
3、加热固定涂片时,应注意玱片勿太靠近火焰,一般要求玱片温度不超过 60℃,以玱片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜。
4、革兰氏染色的关键在于严格掌握脱色程度,脱色时间应根据经验判断。脱色过度,阳性 菌可被误染为阴性菌;脱色不够,阴性菌可被误染为阳性菌。
5、待检细菌培养时间会影响染色,阳性菌培养时间过长戒已死亡戒细菌溶解,常呈阴性。
有效期: 12 个月有效。
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文献和实验。 过氧化氢酶试验:滴加3% 过氧化氢试液,若菌落表面有气泡产生,为过氧化氢酶试验阳性,否则为阴性。本菌为阴性反应。 3、需购买试剂: 菌株 培养基及试剂 金黄色葡萄球菌 HB8278革兰氏染色液试剂盒、HB4117 兔血浆、HB0109-7营养琼脂培养基 大肠埃希氏菌 HBIG13 HBI大肠杆菌生化鉴定条、HB8280
:高脂实验样本该如何处理? A1:高脂实验样本含有脂肪,不是均质溶液,若直接上样,会影响抗原抗体的结合,导致测值不准确。建议先大转速(5000×g)离心,静置 10min 后,取中层较澄清液体,再用大转速(≥5000×g)离心一次,取中下层清液,用于检测。 Q2:实验样本稀释方案是怎样的? A2:试剂盒检测范围不等同于实验样本中待测物的浓度范围。实验前,建议通过相关文献预估实验样本中待测物的浓度,并通过预实验确定实验样本的实际浓度情况。 如果您的检测样本需要稀释,参考稀释方案如下: 稀释 100
细胞来说要少很多。 最后,针对细胞上清液的外泌体的提取。这个是老生常谈的问题,这里就不再多讲了。如果实验室有超速离心机的话,那就使用超速离心的方法,按照前文建议的预处理操作后,超离后的沉淀也会增加的,同时外泌体的质量也会提升。如果实验室没有超离的情况下,也可以通过试剂盒的方法来提取,除了进口品牌外,也可以使用一些国产试剂盒,质量也不亚于进口品牌的。 总结一下,为了获得高质量的外泌体:需要在细胞培养时减少正常血清的使用,推荐去外泌体血清或者外泌体专用无血清培养基;收获
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