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DAPI Stain Solution
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖即用型DAPI染色液 细胞组织染色在内的细胞生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:即用型DAPI染色液 细胞组织染色
编号:RFT199
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:DAPI Stain Solution
本品是适用于常见细胞和组织细胞核染色的染色液。本DAPI染色液为即用型,可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。
DAPI是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。 DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。 DAPI的最大激发波长为340nm,最大发射波长为488nm;DAPI和双链DNA结合后,最大激发波长为364nm,最大发射波长为454nm。
操作步骤:
1、对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的DAPI染色。
2、对于贴壁细胞或组织切片,加入少量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。
3、室温放置3-5分钟。
4、吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
5、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
注意事项:
1、本DAPI染色液的浓度经过优化,确保可以满足各种常规染色的需要。
2、荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4、DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
储存条件:-20℃避光,有效期12个月。
想要了解更多关于即用型DAPI染色液 细胞组织染色的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销售下面的产品:
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即用型DAPI染色液 细胞组织染色关键词:RFT199,DAPI Stain Solution,即用型DAPI染色液
·200bp DNA ladder(200~3000bp)
编号:RFT005
规格:100T(2×250μl)
本产品是由11条带状双链DNA组成的即用型DNA Ladder,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。 11条带包括200,400,600,800,1000,1200,1400,1600,1800,2000,3000bp,其中1000bp条带为100ng/5μl,其余条带浓度为50ng/5μl。
使用方法:
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中就行电泳。
注:根据梳子的厚度和宽度进行上样。每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl。窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl;宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl。如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子,可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件:凝胶浓度为1.0%,凝胶长度8-10cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间35-40分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注意事项:
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
·2×ligation solution MasterMix
编号:RFT108
规格:150μl
2×ligation solution MasterMix是含有T4 DNA Ligase,ligation buffer的2×MasterMix,实验时,只需加入片段和载体即可进行连接反应。适用于DNA*(代"片")段和载体DNA的连接以及DNA*(代"片")段和Linker或Adaptor DNA的连接。按照10μl连接体系计算,每次使用5μl,可以使用30次。
注意事项
1、2×ligation solution MasterMix由于含有T4 DNA ligase,使用前冰浴中彻底融化,混匀后使用。
2、为了提高转化效率,转化时建议所加入连接产物的量不要超过感受态细胞体积的10%。
使用方法:
一、DNA*(代"片")段和载体DNA的连接
(1)粘性末端的连接
1.反应体系:
10μl体系 | 终浓度 | |
线性载体DNA | xμl | 10-50 ng |
插入DNA*(代"片")段 | yμl | 插入片段:载体=1:1-5:1* |
2×ligation solution MasterMix | 5μl | 1× |
ddH2O | up to 10μl |
10μl体系 | 终浓度 | |
线性平末端载体DNA* | xμl | 10-50 ng |
插入DNA*(代"片")段 | yμl | 插入片段:载体=1:1-5:1** |
2×ligation solution MasterMix | 5μl | 1× |
ddH2O | up to 10μl |
10μl体系 | 终浓度 | |
线性载体DNA | xμl | 10-50 ng |
2×ligation solution MasterMix | 5μl | 1× |
ddH2O | up to 10μl |
10μl体系 | 终浓度 | |
线性DNA | xμl | 100-300 ng |
磷酸化接头 | yμl | 0.5-1 μg |
2×ligation solution MasterMix | 5μl | 1× |
ddH2O | up to 10μl |
试剂盒组成 | 50次 | 贮存方式 |
缓冲液R1 | 40 ml | 常温 |
缓冲液R2 | 6 ml | 常温 |
缓冲液R3 | 6 ml | 常温 |
缓冲液R4 | 10 ml | 常温 |
缓冲液 R5 | 20 ml | 常温 |
漂洗缓冲液WB1 | 30 ml | 常温 |
漂洗缓冲液WB2 (浓缩液) | 13 ml | 室温 |
洗脱缓冲液EB | 15 ml | 室温 |
Glass beads | 20 g | 常温 |
吸附柱CG | 50个 | 室温 |
收集管(2 ml) | 50个 | 室温 |
说明书 | 1份 |
常见问题 | 可能原因 | 建议 |
没有洗脱出DNA | 加入缓冲液R5后没有加入无水乙醇 | 样品过柱前,必须用无水乙醇调整核酸结合条件,否则核酸不能挂柱。 |
漂洗缓冲液WB2中没有加入乙醇 | 漂洗缓冲液WB2使用前请按照标签加入无水乙醇。无水乙醇加入量不正确会导致核酸提取量大大降低。 | |
低浓度的DNA量 | 缓冲液R2使用过量 | 按照步骤1加入适量缓冲液R2 |
洗脱体积太小 | 洗脱体积不能低于50μl,如洗脱体积太小,回收率将大大降低。 | |
洗涤不恰当 | 漂洗缓冲液WB2使用前请按照标签加入无水乙醇。无水乙醇加入量不正确会导致核酸提取量大大降低。 | |
低A260/A280比率 | 蛋白污染 | 不要忽略步骤8中用漂洗缓冲液WB1冲洗吸附柱 |
洗脱液pH值不合适 | 确保使用的洗脱液pH在8.0以上,如低于8.0将导致DNA洗脱量过低。 | |
下游应用不好 | 提取的DNA含盐量高 | 漂洗缓冲液WB2使用前请按照标签加入无水乙醇。 |
提取的DNA含有乙醇 | 步骤11空甩柱子2分钟非常关键,彻底去除漂洗液中的乙醇。 | |
抑制PCR反应 | 增加缓冲液R2用量,彻底去除腐殖酸等PCR抑制因子;步骤4中确保不要吸取到沉淀。 |
北京百莱博科技有限公司是细胞组织染色产品的专业生产供应销售商,恭候您的咨询选购即用型DAPI染色液 细胞组织染色。
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