R-1059-D细胞

R-1059-D细胞产品概述：

MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D] 人骨肉瘤细胞
细胞名称	MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D]（人骨肉瘤细胞）
种属	人
年龄（性别）	女；13岁
组织来源	骨；骨肉瘤
生长特性	贴壁
细胞形态
背景描述	MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D]细胞是HOS经0.01mcg/ml MNNG(一种致癌的亚硝胺)转化而来。MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D]细胞饱和浓度高，在软琼脂中的克隆形成率高，并能在裸鼠中成瘤。
生长培养基	MEM＋10% FBS＋1% P/S
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃

收到常温R-1059-D细胞后如何处理？
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
R-1059-D细胞传代操作步骤
一、贴壁细胞传代
1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞。
3.加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用。
4.用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡。
5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
二、悬浮细胞传代
1.将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min。
2.弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液。
3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
温馨提醒：
1、可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中，备用；细胞首次传代时，可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用，让细胞逐渐适应培养条件。
2、确认细胞状态良好后，应及时将部分细胞冻存，再进行后续的实验，避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失，影响后续实验。
3、建议客户收到细胞后前3天，100X、200X、400X各拍3张细胞照片，记录细胞状态，便于后续和技术支持沟通交流。
订购R-1059-D细胞事先需要准备什么？
客户应具有一定细胞培养知识与经验，并具备基本实验设备，如细胞培养实验室、无菌操作台、CO2培养箱，倒置显微镜等；还应准备好相应的无菌培养基、血清、双抗、细胞培养瓶、培养板等。
细胞发货标准是什么？规格、数量是多少：
细胞发货时，保证细胞处于生长对数期；贴壁细胞达到75%以上汇合度，约5×10^5cells/T25细胞培养瓶；传代次数5代以内；冻存细胞发2个冻存管；无微生物污染。
R-1059-D细胞发货形式：
细胞通常用T25细胞培养瓶培养，发货时用相应的完全培养基灌满细胞瓶，密封瓶口后放在包装盒内，以快递的方式发送给客户。天气变冷，最低温低于4℃时，以冻存细胞,干冰运输的方式发货。
HNE1【人鼻咽癌细胞】    HNE1    人鼻咽癌细胞    人    1640    贴壁    
Hca-F【小鼠肝癌细胞】    Hca-F    小鼠肝癌细胞    小鼠    DMEM    贴壁    
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HGE【人牙龈上皮细胞】    HGE    人牙龈上皮细胞    人    DMEM    贴壁    
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HSC-1【人黑色素瘤细胞】    HSC-1    人黑色素瘤细胞    人    DMEM    贴壁    
HCC1806【人乳腺鳞状癌细胞】    HCC1806    人乳腺鳞状癌细胞    人    1640    贴壁    
HCC1187【人乳腺导管癌细胞】    HCC1187    人乳腺导管癌细胞    人    DMEM    贴壁    
SCL-1【人皮肤鳞状细胞癌细胞】    SCL-1    人皮肤鳞状细胞癌细胞    人    DMEM    贴壁    
   简称    中文名称                    生长状态
293A细胞    人胚肾上皮细胞    DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
293FT细胞    人胚肾细胞     1640+10%FBS+1%P/S 悬浮 
293T细胞    人胚肾细胞    DMEM+10%FBS热灭活+1%L-glu+1%P/S 贴壁
3AO细胞    人卵巢癌细胞     1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
3D4/21细胞    猪肺泡巨噬细胞     1640+10%FBS+1mM 丙酮酸钠+0.1mM NEAA 贴壁
3T3-L1细胞    小鼠胚胎成纤维细胞     DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁
4T1细胞    小鼠乳腺癌细胞     1640+10%FBS+1%P/S 贴壁
5-8F细胞    人高转移鼻咽癌细胞系     1640+10%FBS+1%P/S   贴壁
6-10B细胞    人鼻咽癌细胞系     1640+10%FBS+1%P/S   贴壁
769-P细胞    人肾细胞腺癌细胞    1640 + 10%FBS +1%P/S贴壁