NCI-H661细胞

NCI-H661细胞产品概述：

NCI-H661 人大细胞肺癌细胞
细胞名称	NCI-H661（人大细胞肺癌细胞）
种属	人
年龄（性别）	男；43岁
组织来源	肺
生长特性	贴壁
细胞形态	上皮细胞样
背景描述	NCI-H661细胞源自一位43岁患有大细胞肺癌的男性白人的淋巴结；NCI-H661细胞缺乏产生粘液和鳞状分化的亚显微结构和生化证据。NCI-H661细胞表达的p53mRNA易于检测，明显高于正常肺细胞的水平，与此同时，没有出现总体性的结构DNA崎变，它们可以说明存在点突变或很小的变异。NCI-H661细胞角蛋白和波形蛋白纤维染色阳性，神经丝三联体蛋白阴性。
生长培养基	RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃

收到常温NCI-H661细胞后如何处理？
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
NCI-H661细胞传代操作步骤
一、贴壁细胞传代
1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞。
3.加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用。
4.用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡。
5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
二、悬浮细胞传代
1.将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min。
2.弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液。
3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
温馨提醒：
1、可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中，备用；细胞首次传代时，可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用，让细胞逐渐适应培养条件。
2、确认细胞状态良好后，应及时将部分细胞冻存，再进行后续的实验，避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失，影响后续实验。
3、建议客户收到细胞后前3天，100X、200X、400X各拍3张细胞照片，记录细胞状态，便于后续和技术支持沟通交流。
订购NCI-H661细胞事先需要准备什么？
客户应具有一定细胞培养知识与经验，并具备基本实验设备，如细胞培养实验室、无菌操作台、CO2培养箱，倒置显微镜等；还应准备好相应的无菌培养基、血清、双抗、细胞培养瓶、培养板等。
细胞发货标准是什么？规格、数量是多少：
细胞发货时，保证细胞处于生长对数期；贴壁细胞达到75%以上汇合度，约5×10^5cells/T25细胞培养瓶；传代次数5代以内；冻存细胞发2个冻存管；无微生物污染。
NCI-H661细胞发货形式：
细胞通常用T25细胞培养瓶培养，发货时用相应的完全培养基灌满细胞瓶，密封瓶口后放在包装盒内，以快递的方式发送给客户。天气变冷，最低温低于4℃时，以冻存细胞,干冰运输的方式发货。
HZ-0371    K7M2 wt [K7M2-WT]（小鼠骨肉瘤成骨细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0302    PA319（人大肠癌细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0079    ES-2（人卵巢透明细胞癌细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0301    M-NFS-60 [NFS-60]（小鼠髓性白血病淋巴细胞/小鼠白血病G-CSF依赖性细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0078    EL4（小鼠淋巴瘤细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0077    Eca-109（人食管癌细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0076    EAC（小鼠艾氏腹水癌细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0300    NCI-H661（人大细胞肺癌细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0075    DU 145（人前列腺癌细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0074    DLD-1（人结直肠腺癌上皮细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0073    DH82（犬巨噬细胞/狗肾恶性组织细胞增生症细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0072    Daudi（人Burkitt's淋巴瘤细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0071    CT26.WT（小鼠结肠癌细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0070    CRFK（猫肾细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0299    NCI-H460 [H460]（人大细胞肺癌细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0298    NCI-H1975（人肺腺癌细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0069    COS-7（非洲绿猴SV40转化的肾细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0068    COS-1（非洲绿猴SV40转化的肾细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0067    COLO 320DM（人结直肠腺癌细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0066    COLO 205（人结肠癌细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0297    Y3-Ag 1.2.3（大鼠骨髓瘤细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0065    CoC1/DDP（人卵巢癌细胞CoC1顺铂耐药亚株）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0064    CoC1（人卵巢癌细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0296    MX-1（人乳腺癌细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0063    CNE（人鼻咽癌细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0062    CHO-K1（仓鼠卵巢细胞亚株）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0295    MV3（人黑色素瘤细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0294    MuM-2C（人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0293    MuM-2B（人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0292    MKN-45（人胃癌细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0291    MKN-28（人胃癌高转移细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0290    MDA-MB-468（人乳腺癌细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0289    MDA-MB-435（人乳腺癌高转移细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0288    MA-891（小鼠乳腺癌高转移细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0287    M14（人黑色素瘤细胞）    5×10cells/T25培养瓶
HZ-0286    M1（小鼠白血病细胞）    5×10cells/T25培养瓶