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长期
- 英文名:
ISRE-luc Reporter gene plasmid
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343
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北京百奥莱博科技有限公司
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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货ISRE荧光素酶报告基因质粒(干扰素激活反应元件)品牌,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货ISRE荧光素酶报告基因质粒(干扰素激活反应元件)品牌
编号:YT449
产地:国产|进口
英文名:ISRE-luc Reporter gene plasmid
品牌:百奥莱博
ISRE报告基因质粒是用于检测ISRE转录活性水平的报告基因质粒。ISRE质粒是以pGL6-TA质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个ISRE结合位点,可以高灵敏度地检测ISRE的激活水平。
pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
ISRE质粒的主要信息如下:
| Base pairs | 5671 |
| ISRE response element | 26-85 |
| Minimal TA promoter (pTA) | 108-130 |
| luc2 reporter gene | 172-1824 |
| SV40 late poly(A) signal | 1859-2080 |
| SV40 early enhancer/promoter | 2128-2546 |
| Synthetic neomycin phosphotransferase | |
| (Neor) coding region | 2571-3365 |
| Synthetic poly(A) signal | 3390-3438 |
| Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region | 3505-3524 |
| ColE1-derived plasmid replication origin | 3762 |
| Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region | 4553-5413 |
| Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site | 5518-5671 |
| Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region | 5620-5639 |
ISRE质粒的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. ISRE可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT273)。
3. 可以激活ISRE的试剂,可以用作ISRE报告基因检测时的阳性对照。
储存条件:-20℃。
欲了解更多北京现货ISRE荧光素酶报告基因质粒(干扰素激活反应元件)品牌的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
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1305-62-0 Bromocresol Purple *甲*(代"酚")紫
北京现货ISRE荧光素酶报告基因质粒(干扰素激活反应元件)品牌关键词:ISRE荧光素酶报告基因质粒(干扰素激活反应元件),YT449,ISRE-luc Reporter gene plasmid
·Cyclin D3抗体
编号:YT667
英文名称:anti-Cyclin D3 antibody
规格:>20次
本抗体用人Cyclin D3的一段多肽(241-260位*基酸)作为抗原制备而成的抗Cyclin D3小鼠单克隆抗体。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
本Cyclin D3抗体特异识别总Cyclin D3(total Cyclin D3),未发现其和cyclin D1或cyclin D2有交叉反应。
Cyclin是调节细胞周期活动的重要蛋白,在细胞增殖和肿瘤发生中具有重要作用。目前已经发现cyclin包括cyclin A-L、O、T、Y共15类,29种。通常cyclin都可以和Cdk相结合,但也有未发现其结合的Cdk的cyclin F。不同的cyclin在不同的时相通过相应的Cdk调控细胞周期。Cyclin和CDK(Cyclin-dependent kinase)和一起调控细胞周期中一些关键蛋白的磷酸化,从而调控细胞周期进程。CDK的激酶活性受其T-loop的磷酸化、cyclin、以及Cip/Kip或INK等CDK抑制蛋白的调控。无活性的CDK4/cyclin D和p27/Cip1形成的四聚复合物在有丝分裂信号的刺激下,会导致p27的释放和降解。处于活化状态的CDK4/cyclin D可以磷酸化Rb蛋白(retinoblastoma protein),导致转录因子E2F的释放,并激活G1/S期基因的表达。CKD6也可以和cyclin D形成复合物,可以磷酸化Rb蛋白(retinoblastomaprotein),促进G1/S期转换的发生。当与CDK抑制剂INK4结合后,CDK6/cyclin D复合物失活。CDK抑制剂P21 Waf1/Cip1会增强CDK6与cyclin D的相互作用。
Cyclin D包括D1、D2和D3,均可以和CDK4和CDK6形成复合物,调控G1/S期的转换。生长因子移除时,cyclin D会通过磷
酸化依赖的降解途径被下调。Cyclin D3表达主要发生在细胞周期的G1期晚期。和cyclin D1和D2不同,在巨噬细胞中cyclin D3不会被CSF-1所诱导表达。尽管cyclin D不是完全相互冗余的,cyclin D3和cyclin D1一样在细胞的分化和增殖中起重要作用。Cyclin D3在人类多种肿瘤组织中高表达。
组份:
Cyclin D3抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml
免疫原种属:人
免疫原:人Cyclin D3的一段多肽(241-260位*基酸)
克隆性:单克隆抗体
宿主:小鼠
用途:WB,IHC
交叉反应性:人,小鼠,大鼠
同种型:IgG1
Cyclin D3分子量:~31kD
推荐稀释比例:WB(1:1000),IHC(1:100)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
储存条件:-20℃,有效期一年。
北京现货ISRE荧光素酶报告基因质粒(干扰素激活反应元件)品牌关键词:ISRE荧光素酶报告基因质粒(干扰素激活反应元件),YT449,ISRE-luc Reporter gene plasmid
2-*乙*(代"醚") Thiourea 93-18-5
BOC-L-脯*酸 Boc-L-tyrosine 15761-39-4
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N-乙酰-DL-亮*酸 Triisooctylamine 99-15-0
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2-丁酮酸 Leupeptin 600-18-0
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BTN60105 加A试剂盒 dA Tailing Kit
PY01-099 琼脂条 100克
5328-37-0 L-Arabinose L-阿拉伯糖
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文献和实验【求助】请问将含荧光素酶报告基因的质粒转染到真核细胞中,建立稳定的细胞系,用哪种转染方法比较好?中间有什么细节是值得注意的
lsdcfhyj 请教前辈,将含荧光素酶报告基因的质粒转染到真核细胞中,建立稳定的细胞系,用哪种转染方法比较好?中间有什么细节是值得注意的 chenjing198345 如果lab经费充裕的话可以用试剂盒包装慢病毒,然后感染真核细胞,完全按照protocol做就行,没啥特别的,sbi的kit不错。如果经费有限,一般是用磷酸钙转染法,这种方法在《分子克隆》里面有介绍,缓冲液的ph值很关键。 lsdcfhyj
双链短RNA(dsRNA)阻断基因表达机理及双链RNA的构建
RNA非特异的阻断哺乳动物成体细胞中的基因表达,RNAi在哺乳动物成体细胞中的应用受到限制。但Tuschl等人的研究工作克服了这一障碍。他们发现,21个核苷酸的双链RNA能够诱发哺乳动物细胞内的RNAi机制,同时不会激活细胞内的干扰素 [7]。他们合成了以荧光素酶的mRNA为靶分子的21个核苷酸的双链RNA,将它和荧光素酶的表达质粒用脂质体共转染到NIH3T3,COS- 7,Hela S3,293细胞中,报告基因的表达被抑制了90%。由于报告基因得到的结果不能完全说明细胞内的情况,他们又合成了细胞
化的胚胎细胞中,上述防御病毒的机制存在缺陷,因而双链RNA能特异的阻断基因的表达。 由于大于30个核苷酸的双链RNA非特异的阻断哺乳动物成体细胞中的基因表达,RNAi在哺乳动物成体细胞中的应用受到限制。但Tuschl等人的研究工作克服了这一障碍。他们发现,21个核苷酸的双链RNA能够诱发哺乳动物细胞内的RNAi机制,同时不会激活细胞内的干扰素。他们合成了以荧光素酶的mRNA为靶分子的21个核苷酸的双链RNA,将它和荧光素酶的表达质粒用脂质体共转染到NIH3T3,COS-7,Hela S3
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